78-83_minimum inhibitory concentration

7/24/2019 78-83_Minimum Inhibitory Concentration

1/22

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM PENENTUAN MINIMUM

INHIBITORY CONCENTRATION (MIC) DARI SUATU SEDIAAN UJI

YANG BERPOTENSI SEBAGAI ANTIBIOTIK

Kelompok 1

260110140078 Ayu Apriliani Tujuan, Prinsip, Prosedur

Alat bahan, Simpulan,

Revisi,dan Kirim.

260110140079 Putri Raraswati Teori Dasar

260110140080 Ummi Habibah Data Pengamatan

260110140081 Ayyu Widyazmara Pembahasan

260110140082 Anggia D. Amaliah Teori Dasar

260110140083 Siti Nurrohmah Pembahasan

HARI/TANGGAL PRAKTIKUM : RABU, 7 OKTOBER 2015

ASISTEN :1. BETHARY K

2. HIMMATUL ULYA

LABORATORIUM FARMAKOTERAPI PENYAKIT INFEKSI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

JATINANGOR

2015


2/22

I. Tujuan

Menentukan Minimum Inhibitory Concentration (MIC) suatu sediaan uji terhadao

bakteri gram positif maupun gram negative, dengan menggunakan metoda MIC

cair atau MIC padat.

II. Prinsip

1. MIC (Minimum Inhibitory Concentration) Konsentrasi terendah obat tersebut

yang masih mampu mengahambat pertumbuhan organisme ( yang tampak baik

dengan mata atau instrumen) (Sacher, 2000).

2. Makrodilusi Menggunakan satu seri tabung reaksi yang diisi media cair dan

sejumlah tertentu sel mikroba yang di uji, dengan ukuran volume bisa lebih

dari 1 mL (Lay, 1994)..

3. Pertumbuhan Bakteri. Perbanyakan sel dan peningkatan ukuran populasi yang

di tandai dengan adanya kekeruhan pada media cair (Schlegel, 1994).

4. Teknik Aseptis Proses tanpa kontaminasi untuk menjamin preparasi bebas dari

mikroba kontaminan, teknik aseptis digunakan sepanjang percobaan

berlangsung, baik alat, bahan, lingkungan sekitar maupun praktikan (Anton,

2008).

III. Teori Dasar

Antibiotik adalah segolongan senyawa, baik alami maupun sintetik, yang

mempunyai efek menekan atau menghentikan suatu proses biokimia di dalam

organisme, khususnya dalam proses infeksi oleh bakteri. Literatur lain

mendefinisikan antibiotik sebagai substansi yang bahkan di dalam konsentrasi

rendah dapat menghambat pertumbuhan dan reproduksi bakteri dan

fungi(Koolman & Roehm, 2005 ).

Berdasarkan ketahanan suatu mikroba terhadap antibiotika, maka

antibiotika dapat digolongkan menjadi :

a.

Bakteriostatik, yaitu antibiotika yang menghambat pertumbuhan bakteri.

b.

Bakteriosida, yaitu antibiotika yang membunuh bakteri (Wahyuni, 2005).


3/22

Tetrasiklin merupakan agen antimikrobial hasil biosintesis yang memiliki

spektrum aktivitas luas. Mekanisme kerjanya yaitu blokade terikatnya asam amino

ke ribosom bakteri (sub unit 30S). Aksi yang ditimbulkannya adalah

bakteriostatik yang luas terhadap gram positif, gram negatif, chlamydia,

mycoplasma, bahkan rickettsia. Generasi pertama meliputi tetrasiklin,

oksitetrasiklin, klortetrasiklin. Generasi kedua merupakan penyempurnaan dari

sebelumnya yaitu terdiri dari doksisiklin, minosiklin. Generasi kedua memilki

karakteristik farmakokinetik yang lebih baik yaitu antara lain memiliki volume

distribusi yartg lebih luas karena profil lipofiliknya. Selain itu bioavailabilitas

lebih besar, demikian pula waktu paruh eliminasi lebih panjang (> 15 jam).

Doksisiklin dan minosiklin tetap aktif terhadapstafilokokus yang resisten terhadap

tetrasiklin, bahkan terhadap bakteri anaerob seperti Acinetobacter spp, En-

terococcus yang resisten terhadap Vankomisin sekalipun tetap efektif ( Boyd,

1980).

Antibiotik tetrasiklin merupakan antibiotik yang paling banyak digunakan

dalam mengobati penyakit yang disebabkan oleh bakteri. Pada dasarnya,

antibiotik tetrasiklin ini berfungsi untuk menekan pertumbuhan bakteri atau

bakterisidal. Kemampuan antibiotic tetrasiklin untuk mencegah dan menekan

hidup bakteri agar tidak berkembang di dalam tubuh secara sporadis. Antibiotic

tetrasiklin ini di buat dari senyawa yang diambil dari inang bakteri yaitu dari

kelompol Stretomyces. Antibiotik tetrasiklin kini dijadikan obat modern untuk

membantu dalam menekan pertumbuhan dan penyebaran bakteri didalam tubuh.

Cara kerja dari antibiotik tetrasiklin ini adalah dengan menghambat proses sintesis

protein dari bakteri yang menyerang dalam tubuh. Akibatnya bakteri tidak dapat

tumbuh dan berkembang didalam tubuh. Ini menyebabkan pola destruktif

terhadap bakteri tersebut ( Anne Ahira, 2009).

Prinsip dasar metode ini adalah dengan cara memberikan bakteri / kuman

uji dengan kepadatan tertentu kepada bahan antibakteri yang akan diuji pada

konsentrasi yang semakin kecil.Kepekaan bahan uji terhadap bahan anti-bakteri

ditentukan dengan pengamatan secara makroskopis setelah masa inkubasi
http://um.ac.id/http://um.ac.id/http://um.ac.id/http://um.ac.id/


4/22

berakhir yaitu dengan melihat ada tidaknya pertumbuhan koloni kuman / bakteri

uji dalam tabung ( medium cair ) yang ditandai keruhnya medium cair yang

dipakai (Pelczar, 1988).

Konsentrasi minimun penghambatan atau lebih dikenal dengan MIC

(Minimum Inhibitory Concentration) adalah konsentrasi terendah dari antibiotika

atau antimikrobial yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba tertentu. Nilai

MIC adalah spesifik untuk tiap-tiap kombinasi dari antibiotika dan mikroba. MIC

dari sebuah antibiotika terhadap mikroba digunakan untuk mengetahui sensitivitas

dari mikroba terhadap antibiotika. Nilai MIC berlawanan dengan sensitivitas

mikroba yang diuji. Semakin rendah nilai MIC dari sebuah antibiotika, sensitivitas

dari bakteri akan semakin besar (Jawetz et al.,1996).

Secara umum untuk penentuan MIC, pengenceran antimikroba dilakukan

dengan penurunan konsentrasi setengahnya misalnya mulai dari 16, 8, 4, 2, 1, 0,5,

0,25 g/ml konsentrasi terendah yang menunjukan hambatan pertumbuhan

dengan jelas baik dilihat secara visual atau alat semiotomatis dan otomatis,

disebut dengan konsentrasi daya hambat minimum/MIC (Unila, 2015).

MIC dari sebuah antibiotika terhadap mikroba digunakan untuk

mengetahui sensitivitas dari mikroba terhadap antibiotika. Nilai MIC berlawanan

dengan sensitivitas mikroba yang diuji. Semakin rendah nilai MIC dari sebuah

antibiotika, sensitivitas dari bakteri akan semakin besar. MIC dari sebuah

antibiotika terhadap spesies mikroba adalah rata-rata MIC terhadap seluruh strain

dari spesies tersebut. Strain dari beberapa spesies mikroba adalah sangat berbeda

dalam hal sensitivitasnya (Greenwood, 1995).

Beberapa faktor yang dapat mempengaruhi ukuran zona penghambatan dan harus

dikontrol adalah :

a.

Konsentrasi mikroba pada permukaan medium. Semakin tinggi konsentrasi

mikroba maka zona penghambatan akan semakin kecil.

b.

Kedalaman medium pada cawan petri. Semakin tebal medium pada cawan

petri maka zona penghambatan akan semakin kecil.

c. Nilai pH dari medium. Beberapa antibiotika bekerja dengan baik pada kondisi

asam dan beberapa basa kondisi alkali/basa.


5/22

d.

Kondisi aerob/anaerob. Beberapa antibakterial kerja terbaiknya pada kondisi

aerob dan yang lainnya pada kondisi aerob (Greenwood, 1995)

Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram Positif, tidak bergerak,

tidak berspora dan mampu membentuk kapsul, berbentuk kokus dan tersusun seperti buah

anggur. Ukuran Staphylococcus berbeda-beda tergantung pada media

pertumbuhannya. Apabila ditumbuhkan pada media agar,

Staphylococcus memiliki diameter 0,5-1,0 mm dengan koloni berwarna kuning.

Dinding selnya mengandung asam teikoat, yaitu sekitar 40% dari berat kering dinding selnya.

Asam teikoat adalah beberapa kelompok antigen dari Staphylococcus. Asam teikoat

mengandung aglutinogen dan N-asetilglukosa (Todar, 2002).

Suhu optimum untuk pertumbuhan staphylococcus aureus adalah 35037 0

C dengan suhu minimum 6,7 0 C dan suhu maksimum 45,40C. Bakteri ini dapat tumbuh pada

pH 4,0 9,8 dengan pH optimum 7,0 7,5. Staphylococcus aureus hidup sebagai

saprofit di dalam saluran-saluran pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan

hewan-hewan seperti hidung, mulut dan tenggorokan dan dapat dikeluarkan pada waktu

batuk atau bersin. Bakteri ini juga sering terdapat pada pori-pori dan permukaan

kulit, kelenjar keringat dan saluran usus. Selain dapat menyebabkan intoksikasi, S. aureus

juga dapat menyebabkan bermacam-macam infeksi seperti jerawat, bisul,

meningitis, osteomielitis, pneumonia dan mastitis pada manusia dan hewan

(Rahayu, 2007).

IV. Alat dan Bahan

Alat

1. Cawan petri

2. Inkubator

3.

Labu ukur 100 ml

4. Mortir dan stamfer

5.

Ose dan pembakar spirtus

6. Rak tabung

7. Tabung reaksi besar dan kecil


6/22

8.

Volume pipet berukuran 1 ml dan 10 ml

Bahan

1.

Air suling

2. Berbagai suspensi bakteri Gram positif maupun Gram negative

3. Pelarut sediaan uji

4. Sediaan uji

5. Nutrient Agar (NA)

6.

Nutrient Broth (NB) double strength

7. Nutrient Broth (NB)

Gambar Alat

Cawan Petri Inkubator Labu Ukur

Mortir dan Stamper Ose Pembakar spritus


7/22

Rak Tabung Tabung Reaksi

Volume Pipet

V. Prosedur

Metode cair

Dimasukkan sediaan uji ke dalam labu ukur, dilarutkan dengan sedikit pelarutnya.

Kemudian ditambahkan air suling steril sampai tanda batas. Jika sediaan uji

berbentuk padat, gerus dahulu dalam mortir, sebelum dimasukan dalam labu ukur.

Direncanakan pengenceran dan hitung konsentrasi campuran pada masing-

masing tabung besar dan tabung-tabung kecil. Dibuat pengenceran bertingkat

larutan sediaan uji dengan air suling steril dalam tabung-tabung reaksi besar. Diisi

tabung reaksi kecil pertama dengan 1 ml NB double strength, sedangkan tabung-

tabung reaksi selanjutnya dengan 1 ml NB biasa. Dipipet 1 ml hasil pengenceran

terakhir ke dalam tabung 1 berisi NB double strength, kocok sampai homogen.

Dipipet1 ml campuran dari tabung 1 ke tabung 2, kocok sampai homogen.

Diulangi langkah tersebut sampai tabung terakhir. Dibuang 1 ml campuran dari


8/22

tabung terakhir. Ditambahkan 1 ose bakteri ke dalam masing-masing tabung kecil,

dikocok sampai homogen. Dibuat1 kontrol postif dan 1 kontrol negatif. Kontrol

positif terdiri dari 1 ml NB dan 1 ose bakteri. Kontrol negatif hanya berisi 1 ml

NB. Diinkubasikan semua tabung kecil pada suhu 37 C selama 18-24 jam,

diamati kekeruhan yang terjadi, dibandingkan dengan kontrol positif dan negative.

Ditentukan dimana MIC nya. MIC terletak pada tabung bening yang terakhir, atau

sebelum tabung keruh pertama.

Metode Padat

Dimasukkan sediaan uji ke dalam labu ukur, dilarutkan dengan sedikit pelarutnya.

Kemudian ditambahkan air suling steril sampai tanda batas. Jika sediaan uji

berbentuk padat, gerus dahulu dalam mortir, sebelum dimasukkan dalam labu

ukur. Direncanakan pengenceran dan hitung konsentnsi campuran pada masing-

masing tabung besar dan cawan-cawan petri. Dibuat pengenceran bertingkat

larutan sediaan uji dengan air suling dalam tabung-tabung reaksi besar. Dibagi

permukaan dasar cawan menjadi area-area sama besar. Diberi label nama bakteri

yang akan digunakan pada setiap area. Dipipet 1 ml masing-masing pengenceran

ke dalam cawan-cawan petri. Ditambahkan 19 ml NA cair bersuhu 40-500 C,

digoyangkan beberapa saat, lalu diamkan sampai membeku. Digoreskan masing-

masing bakteri pada area yang terpisah dengan menggunakan ose. Dibuat Kontrol

positif yang terdiri dari 20 ml NA dalam cawan petri, yang digores oleh bakteri-

bakteri yang digunakan di area yang terpisah. Diinkubasikan semua cawan petri

pada suhu 37 C selama 18-24 jam. Diamati pertumbuhan bakteri dari koloni-

koloni yang tampak. Dibandingkan morfologi koloni-koloni tersebut dengan

kontrol positif. Ditentukan dimana MIC nya. MIC terletak pada cawan petri

terakhir yang tidak tampak koloni bakteri.


9/22

VI. Data Pengamatan

TETRASIKLIN

Kadar awal = 2500

Pengenceran dengan 3 konsentrasi (500

; 250

; 125

)

Dilakukan pada tempat tabung besar

1.

Konsentrasi : 500

Ket : - antibiotik 2 ml

-8 ml aquadest

2. Konsentrasi : 250


-2 ml aquadest

3.

Konsentrasi : 125


10/22


-2 ml aquadest

Dilakukan Tabung kecil

Dari hasil pengenceran terakhir dilakukan kembali pengenceran berantai

Konsentrasi terakhir : 125

Pengenceran berantai dilakukan dengan cara pengambilan 1 ml dari tabung

sebelumnya

1. Tabung A

2.

Tabung B


11/22

3.

Tabung C

4. Tabung D

5.

Tabung E

6.

Tabung F


12/22

TABEL PENGAMATAN

1.

Metode cair

Ket: DS = double strength

SS = singel strength

No. TABUNG KONSENTRASI HASIL GAMBAR

1. DS bening

2. SS bening

3. SS bening


13/22

4. SS bening

5. SS bening

6. SS bening

2. Metode padat

CAWAN KONSENTRASI HASIL GAMBAR

1. Tidak ada pertumbuhan

bakteri


14/22

Kontrol negative (-)

2. Tidak ada pertumbuhan

bakteri

3.

Tidak ada pertumbuhan

bakteri


15/22

Kontrol positive (+)

VII. Pembahasan

Pada praktikum kali ini bertujuan untuk mengetahui minimum inhibitory

concentration (MIC) dari suatu sediaan uji yang berpotensi sebagai antibiotik.

MIC adalah konsentrasi terendah dari antibiotika atau antimikrobial yang dapat

menghambat pertumbuhan mikroba tertentu. Tujuan praktikum kali ini adalah

untuk mengetahui sensitivitas dari mikroba terhadap antibiotika. Bakteri yang

digunakan kali ini adalah Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus (S.

aureus) adalah bakteri gram positif yang menghasilkan pigmen kuning, bersifat

aerob fakultatif, tidak menghasilkan spora dan tidak motil, umumnya tumbuh

berpasangan maupun berkelompok, dengan diameter sekitar 0,8-1,0 m.

Sedangkan antibiotik yang digunakan adalah tetrasiklin, tetrasiklin banyak

digunakan untuk pengobatan infeksi yang disebaban oleh beberapa jenis bakteri

gram positif dan gram negatif. atau merupakan salah satu obat antibakteri yang

menghambat sintesis protein mikroba

Pada praktikum kali ini ada dua metode yang digunakan untuk penentuan

konsentrasi terendah pertumbuhan bakteri, yaitu metode MIC cair dan metode


16/22

MIC padat. Metode MIC cair adalah pengujian MIC dengan menggunakan media

yang cair, pada praktikum kali ini media yang digunakan adalah NB (Nutrient

Broth) merupakan medium yang berwarna coklat dengan bahan dasar adalah

ekstrak beef dan peptone yang memiliki konsistensi yang cair dimana medium ini

berasal dari sintetik dan memiliki kegunaan sebagai medium untuk menumbuhkan

bakteri. Metode MIC padat adalah pengujian MIC dengan menggunakan media

yang padat, pada praktikum kali ini media yang digunakan adalah NA (Nutrient

Agar) yang merupakan suatu medium yang berbentuk padat, yang merupakan

perpaduan antara bahan alamiah dan senyawa-senyawa kimia. NA dibuat dari

campuran ekstrak daging dan peptone dengan menggunakan agar sebagai

pemadat. Dalam hal ini agar digunakan sebagai pemadat, karena sifatnya yang

mudah membeku dan mengandung karbohidrat yang berupa galaktam sehingga

tidak mudah diuraikan oleh mikroorganisme.

Sebelum melakukan percobaan ini, semua peralatan percobaan harus

disterilisasikan untuk memastikan peralatan benar-benar bersih dan hasil

percobaan tidak dipengaruhi oleh mikroba yang mungkin terdapat di atas

permukaan peralatan.

Pada kedua metode ini, dilakukan pengenceran tetrasiklin sebanyak 3 kali.

Tetrasiklin yang digunakan untuk pengenceran pada awalnya memiliki

konsentrasi 2500 g/ml, dan akan dilakukan pengenceran sebanyak 3 kali dari

konsentrasi 500 g/ml, 250 g/ml, dan 125 g/ml. Setelah dilakukan perhitungan

dan rencana pengenceran, pada pengenceran pertama dicampurkan 2 ml larutan

tetrasiklin lalu ditambahkan 8 ml aquadest pada tabung reaksi besar maka

konsentrasi hasil pengenceran pertama adalah 500 g/ml. Dari hasil rencana

pengenceran, pengenceran kedua dibuat konsentrasi 250 g/ml maka diambil 2 ml

tetrasiklin hasil pengenceran pertama lalu ditambahkan 2 ml aquadest pada tabung

reaksi besar. Setelah itu dilakukan pengenceran ketiga, dengan mencampurkan 2

ml tetrasiklin hasil pengenceran kedua ditambahkan 2 ml aquadest maka hasil

pengenceran ke tiga konsentrasinya adalah 125 g/ml.

- Metode cair


17/22

Setelah dilakukan pengenceran, disiapkan 6 tabung reaksi kecil untuk

media pertumbuhan bakteri yang akan diuji. Dalam masing-masing tabung reaksi

kecil tersebut diisi dengan Nutrient Broth 2 ml sebagai nutrisi pertumbuhan

bakteri. Nutrient Broth yang digunakan adalah Nutrient Broth biasa dengan

Nutrient Broth double strength. Perbedaan Nutrient Broth biasa dengan Nutrient

Broth double strength adalah konsentrasi dariNutrient Broth. Pada tabung 1 diisi

dengan Nutrient Broth double strength agar pertumbuhan bakteri di tabung ini

sangat banyak sehingga saat dipindahkan ke tabung 2 dan seterusnya bakteri tetap

tumbuh dengan baik. Pada tabung reaksi kecil 2 hingga 6 diisi dengan Nutrient

Brothbiasa. Perlakukan seperti ini bertujuan untuk membuat konsentrasiNutrient

Broth dari tabung 1 hingga tabung 6 sama. Setelah itu dimsukan 1 ml tetrasiklin

hasil pengenceran ketiga kedalam tabung reaksi kecil 1 yang sudah diisi Nutrient

Broth double strength terlebih dahulu lalu dikocok agar Nutrient Broth double

strength dengan larutan tetrasiklin homogen. Selanjutnya dari tabung pertama

diambil 1 ml dan dimasukkan ketabung 2 yang telah lebih dahulu diisi Nutrient

Brothbiasa. Perlakuan ini dilakukan hingga tabung ke 6 dan 1 ml dari tabung ke 6

dibuang ke larutan desinfektan agar konsentrasi tabung 1 hingga tabung 6 sama.

Setelah itu masukkan bakteri dengan menggunakan kawat ose yang telah di

fiksasi. Kawat ose yang telah di fiksasi dimasukkan kedalam suspense bakteri lalu

dimasukkan kedalam media pertumbuhan bakteri yang telah di tambah antibiotik

tetrasiklin. Pada praktikum kali ini pekerjaan harus aseptis agar tidak ada

kontaminasi dari luar. Setelah pengolesan bakteri tabung reaksi di simpan di

incubator selama 18 24 jam.

Setelah diinkubasi selama 18

24 jam dapat dilihat bahwa pada tabung 1

hingga tabung 6 tidak tumbuh bakteri, hal ini di sebabkan karena konsentrasi

tetrasiklin dalam tabung 1 adalah 62,5 g/ml, tabung 2 adalah 31,25 g/ml,

tabung 3 adalah 15,625 g/ml, tabung 4 adalah 7,8125 g/ml, tabung 5 adalah

3,9062 g/ml dan tabung 6 adalah 1,9531 g/ml. Sedangkan konsentrasi

minimum tetrasiklin terhadap mikroba adalah 0,24 g/ml.

- Metode padat


18/22

Disiapkan 3 buah cawan petri yang telah disterilisasi sebagai alat untuk

penyimpanan media yaitu Nutrient Agar. Tetrasiklin yang telah diencerkan dalam

3 tabung besar dituangkan kedalam 3 cawan petri masing-masing 1 ml, kemudian

kedalam cawan perti tersebut ditambahkan 20 ml Nutrient Agar cair bersuhu 400-

500C karena jika dibawah suhu tersebut, nutrien agar akan membeku dan tidak

bisa dituang. Cawan petri tersebut digoyang-goyangkan sampai nutrient agar

tersebar rata dan bercampur dengan antibiotic, medium ini harus tercampur

sempurna, agar pertumbuhan pada bakteri yang dapat tumbuhdapat tersebar

merata. Lalu mendiamkannya sampai terbentuk agar padat, saat menunggu

nutrient agar menjadi agar padat harus didiamkan dalam keadaan aseptis.

Penggunaan cawan petri tidak boleh dibiarkan terbuka lebar, karena ditakutkan

cawan akan terkontaminasi oleh udara luar jika dibiarkan terbuka. Setelah nutrien

agar membeku, bakteri digoreskan pada cawan petri menggunakan ose yang telah

difiksasi sebelumnya suspense bakteri dikocok terlebih dahulu agar bakteri yang

diambil benar-benar baterinya bukan hanya pelarutnya saja. Percobaan harus

dilakukan secara aseptis yaitu bekerja dekat api, hal ini bertujuan agar bakteri uji

yang digunakan tidak terkontaminasi dengan bakteri yang lain.

Penggoresan harus dilakukan secara hati-hati, supaya medium padat tidak

rusak, karena dapat mempengaruhi pertumbuhan bakteri yang dapat tumbuh.

Setelah itu, cawan petri inidiinkubasi pada suhu 37 C selama 18-24 jam. Proses

inkubasi dilakukan untuk menciptakan suasana ideal dalam proses pembiakan

bakteri sehingga proses dapat berlangsung maksimal. Waktu 18-24 jam ditentukan

karena pada rentang waktu tersebut bakteri berada pada fase perkembangbiakan

optimal atau fase logaritma.

Setelah diinkubasi selama 18-24 jam dapat diamati dari hasil goresan

bakteri dan dibandingkan dengan control negative dan control positif, tidak

terdapat tanda-tanda pertumbuhan bakteri pada goresan tersebut, baik dari cawan

yang berisi antibiotic dengan konsentrasi 500 g/ml, 250 g/ml, dan 125 g/ml

yang menandakan bakteri tidak dapat tumbuh pada konsentrasi tersebut, dengan

demikian tidak terdapat MIC dari tetrasiklin tidak dapat dilakukan pada


19/22

konsentrasi tersebut. Karena dalam farmakope Indonesia pun, konsentrasi

terendah (MIC) dari tetrasiklin adalah 0,24 g/ml.


20/22

VIII. Simpulan

Berdasarkan hasil pengamatan dalam penentuan MIC menggunakan

larutan antibiotik tetrasiklin dan bakteri Staphylococcus aureus menggunakan

media cair nutrien broth dan media padat nutrien agar dihasilkan MIC 0,24 g/ml

dikarenakan pada konsentrasi 62,5 g/ml sampai 1,9531 g/ml tidak didapatkan

pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan tidak adanya kekeruhan untuk metode

cair..


21/22

DAFTAR PUSTAKA

Anne Ahira. 2009. Antibiotika Tetrasiklin. Tersedia online di

http://www.anneahira.com/antibiotictetrasiklin.html[ diakses pada 09

Oktober 2015].

Anton, W. 2008. Mikrobiologi Umum. Malang : Universitas Brawijaya

Boyd, Robert F., 1988. General Microbiology. Second Edition. Times

Mirror/Mosby College Publishing.

Greenwood. 1995. Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial and

Chemoteraphy.USA : McGraw Hill Company.

Jawetz et. al. 1996.Mikrobiologi Kedokteran. Edisi 20. Jakarta : EGC.

Koolman J, Roehm KH. 2005. Color atlas of biochemistry 2nd ed. New York :

Thieme.

Lay. B. W. 1994. Analisis Mikrobiologi da Laboraorium. Raja Grafindo Persada:

Jakarta

Pelczar, Michael, J., dan E.C.S. Chan. 1986.Dasar-dasar Mikrobiologi I.

UI Press, Jakarta.

Rahayu, I. D. 2007. The sensitivity of Staphylococcus aureus as Mastitis Pathogen

Bacteria.Jurnal Protein, Vol 14, No 1, pp : 31-36.

Sacher, R. A., McPherson, R. A., Campos, J. M., & Widmann, F. K.

2000.Widmann's clinical interpretation of laboratory tests. FA Davis.

Schlegel HG dan Schmidt K. 1994. Mikrobiologi Umum Edisi ke kenam. Alih

Bahasa: Baskoro T. UGM-Press: Yogyakarta.

Soleha, Tri Umiana. 2015.Uji Kepekaan terhadap Antibiotik. Juke Unila. Vol 5

No. 9.

Todar, K. 2002. Staphylococcus. Available online athttp://www.bact.wisc.edu/ .

[Diakses pada tanggal 10 Oktober 2015].
http://www.anneahira.com/antibiotictetrasiklin.htmlhttp://www.anneahira.com/antibiotictetrasiklin.htmlhttp://www.bact.wisc.edu/http://www.bact.wisc.edu/http://www.bact.wisc.edu/http://www.bact.wisc.edu/http://www.bact.wisc.edu/http://www.bact.wisc.edu/http://www.anneahira.com/antibiotictetrasiklin.html


22/22

Wahyuni, AETH., Wibawan, WT dan Wibowo, MH., 2005. Karakterisasi Hemaglutinin

Streptococcus agalactiae dan Staphylococcus aureus Penyebab Mastitis

Subklinis Pada Sapi Perah.J. Sain Vet. Vol 2.

78-83_minimum inhibitory concentration

Documents