laporan praktikum fitokimia iv

7/24/2019 Laporan Praktikum Fitokimia IV

1/17

LAPORAN PRAKTIKUM FITOKIMIA I

PERCOBAAN IV

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT)

OLEH :

NAMA : NASARA MUHIMI

NIM : F1F1 13 038

KELAS : A

KELOMPOK : III (TIGA)

ASISTEN : RAHMI ARDANI

LABORATORIUM FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS HALU OLEO

KENDARI

2016


2/17

PERCOBAAN IV

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT)

A. TUUAN

Tujuan dari percobaan ini yaitu :

1. Mengetahui prinsip dasar Kromatografi Lapis Tipis.

2. Melakukan Kromatografi Lapis Tipis komponen kimia dari bahan alam.

B. LANDASAN TEORI

Ekstrak dapat dibagi dalam dua katagori yaitu ekstrak kasar dan ekstrakmurni. Ekstrak kasar artinya ekstrak yang mengandung semua bahan yang tersari

dengan menggunakan pelarut organik sedangkan ekstrak murni adalah ekstrak

kasar yang telah dimurnikan dari senya!asenya!a inert melalui proses

penghilangan lemak penyaringan menggunakan resin atau adsorben. Ekstrak

murni lebih disukai karena mempunyai bahan aktif atau komponen kimia yang

jauh lebih tinggi dibandingkan ekstrak kasar sebagai contoh kandungan senya!a

aktif dalam ekstrak kasar 2"# setelah dimurnikan senya!a aktif akan meningkat

menjadi $" # %.

&ambu mete 'Anacardium occidentale Linn.( yang berasal dari )ra*il

tenggara ini sering dimanfaatkan biji buah daun akar dan kulit batangnya oleh

masyarakat. +sam anakardat yang berfungsi sebagai antimikroba antiinflamasi

antimulosidalantioksidan dan menghambat akti,itas beberapa en*im seperti

-anthin oksidase lipooksigenase siklooksigenase dan lainlain terdapat pada kulit

batang tanaman suku +nacardiaceae. /ada tanaman Anacardium occidentale

keberadaan asam anakardat selain pada kulit batang juga terdapat pada biji dan

getahnya $.

Kulit batangAnacardium occidentale L. mengandung berbagaimacam

*at diantaranya ialah alkaloid fla,onoid tanin dan saponin. 0ampai saat ini


3/17

belum ada penelitian ilmiah yangsecara jelas menyebutkan bah!a kulitbatang

Anacardium occidentale L. dapatmenurunkan kadar glukosa darah 1.

ntuk mengetahui kandungan senya!a kimia dalam suatu tanaman

dapat digunakan metode KLT 'kromatografi lapis tipis(. Kromatografi lapis tipis

dapat dipakai dengan tujuan sebagai metode untuk mencapai hasil kualitatif

'letak !arna bentuk dan ukuran suatu bercak( dan kuantitatif 'kuantitas

senya!a yang terdapat dalam suatu bercak( .

Kromatografi adalah suatu metoda untuk separasi yang menyangkut

komponen suatu contoh di mana komponen dibagibagikan antara dua tahap

salah satu yang mana adalah keperluan selagi gerak yang lain. 3i dalam gas

chromatography adalah gas mengangsur suatu cairan atau tahap keperluan padat.

3i dalam cairan chromatography adalah campuran cairan pindah gerakkan

melalui cairan yang lain suatu padat atau suatu 4gel4 agar. Mekanisme separasi

komponen mungkin adalah adsorpsi daya larut diferensial ione-change

penyebaran5perembesan atau mekanisme lain 2.

Kromatografi lapis tipis 'KLT( adalah suatu tehnik yang sederhana dan

banyak digunakan. Metode ini menggunakan lempeng kaca atau lembaran

plastik yang ditutupi penyerap untuk lapisan tipis dan kering bentuk silika gel

alomina selulosa dan polianida. ntuk menotolkan larutan cuplikan pada

lempeng kaca pada dasarnya dgunakan mikro pipet5 pipa kapiler. 0etelah itu

bagian ba!ah dari lempeng dicelup dalam larutan pengulsi di dalam !adah yang

tertutup '6hamber( 7.


4/17

C. ALAT DAN BAHAN

!. A"!#

+lat yang digunakan pada percobaan ini yaitu:

a. )atang pengadukb. )otol 8ial

c. 6a!an porselin

d. 6orong

e. 6orong pisahf. 6hamber KLT

g. 9elas ukur

h. Lampu 8 275%$$i. Magnetic stiner

j. /enyemprot KLT

k. /ipa kapilerl. /ipet tetes

m. ak tabung reaksi

n. Tabung reaksio. Timbangan analitik

$. B!%!&

)ahan yang digunakan pada percobaan ini yaitu:

a. +;uadest

b. +lumunium foil

c. +sam sulfat

d. Ekstrak kental sampel 'kulit batang jambu mete(

e. Etanol


5/17

g. Kertas saring

h. =he-an

i. /lat KLT 9> 27

j. 0erium

k. Tissue

D. URAIAN TANAMAN

K"!'*!' ')adan /om 2""?(

3i,isi : 0permatophyta


6/17

0ub di,isi : +ngiospermae

Kelas : 3icotyledoneae

)angsa : 0apindales

0uku : +nacardiaceae

Marga : +nacardium

&enis :Anacardium occidentale L.

D+'*,-'

@abitus berupa pohon dengan tinggi A12 m. )atang berkayu bentuk

bulat bergetah ber!arna putih kotor. 3aunnya tunggal ber!arna hijau

berbentuk bulat telur dengan tepi rata dan pangkal runcing. jung daun

membulat dengan pertulangan menyirip panjang daun ?22 cm dan lebar

71% cm. )unga majemuk bentuk malai terletak di ketiak daun dan di

ujung cabang mempunyai daun pelindung berbentuk bulat telur dengan

panjang 71" mm dan ber!arna hijau. Kelopak bunga berambut dengan

panjang 7 mm dan ber!arna hijau muda. Mahkota bunga berbentuk

runcing saat masih muda ber!arna putih setelah tua ber!arna merah.


7/17

Tipe buah berupa buah batu keras melengkung panjangnya A% cm

ber!arna hijau kecoklatan. )iji berbentuk bulat panjang melengkung

pipih dan ber!arna putih. +karnya berupa akar tunggang dan ber!arna

coklat.


8/17

E. PROSEDUR KERA

!. P+$/!#!& +"/+

$. P+"!& '!-+"

Eluen dibuat dengan cara :

Eluen dibuat dengan perbandingan ? : 2

=heksan sebanyak 2 mL dan etil asetat sebanyak 2

mL

3imasukkan kedalam chamber berukuran 1" cm

dan ditutup.Eluen siap digunakan

/lat KLT ditandai dengan garis menggunakan pensil

3itotolkan dengan menggunakan pipa kapiler

3imasukkan ke dalam chamber yang berisi eluen

/lat KLT tadi dikeluarkan dan sebelum dikeringkan dengan

menggunakan o,en dioleskan dengan serium


9/17

F. HASIL PENGAMATAN!. T!$+" -+&!!#!& :

F,!*' !,!* #+-/%

'+&!!

(4)

!,!* #+-/%

!'+ +,!*

(4)

N"! R

=heksan 1 1? 2% dan

2< cm

cm "%7 "7 "7B

"B%

Etil asetat 1B dan 1? cm cm "% "7

Etanol 12 cm cm "%

F,!*' G!$!,

>raksi =heksan

etil asetat dan etanol

=oda tadi dilihat diba!ah sinar ultra,iolet

=oda yang terlihat ditandai menggunakan pensil

@asil3ihitung nilai f


10/17

$. P+,%#/&!& R (R+#+,5!#& F!4#,)

umus :

=ilai f Cjarak yang ditempuhsenyawa

jarak tempuh fase gerak

&adi :

1. /erhitungan f fraksi nheksan

=ilai f Cjarakyangditempuhsenyawa

jaraktempuhfasegerak

f1 C1,4

4 C "%7 cm

f2 C1,8

4 C "7 cm

f1nheksan

f2nheksanf1etil asetat

f%nheksanf2etil asetat

fnheksanf1etanol


11/17

f% C2,3

4 C "7B cm

f C2,9

4 C "B% cm

2. /erhitungan f fraksi etil asetat

f1 C1,7

4 C "% cm

f2 C1,8

4 C"7 cm

%. /erhitungan f fraksi etanol

f1 C1,2

4 C "% cm


12/17

G. PEMBAHASAN

Kromatografi lapis tipis adalah suatu teknik atau metode untuk

memisahkan suatu campuran yang terdiri dari beberapa komponen senya!a

kimia yang menggunakan sistem distribusi secara kontinyu di antara 2 fase. >ase

yang satu bergerak pada fase yang lain. Kedua fase tersebut adalah fase diam

'stationary phase( dan fase gerak 'mobile phase(. >ase diam yang digunakan

adalah *at padat dan fase gerak yang digunakan adalah *at cair. Metode

pemisahan cara ini dilakukan dengan cara menotolkan larutan sampel yang

terdiri dari beberapa komponen senya!a kimia pada lempeng penyerap atau

adsorben yaitu lapisan tipis adsorben yang dibuat pada permukaan pelat kaca

atau bahan lain yang netral kemudian dilakukan dalam pelarut sebagai

pengembang yang dapat memba!a atau memisahkan komponen senya!a

tersebut.


13/17

/rinsip kerjanya adalah berdasarkan adsorpsi dan partisi dimana sampel

akan berpisah berdasarkan perbedaan kepolaran antara sampel dengan pelarut

yang digunakan. Teknik ini biasanya menggunakan fase diam dari bentukplat

silikadan fase geraknya disesuaikan dengan jenis sampel yang ingin dipisahkan.

0emakin dekat kepolaran antara sampel dengan eluen maka sampel akan

semakin terba!a oleh fase gerak tersebut.

>ase diam 'adsorben( contohnya silika gel 'asam silikat( alumina

'aluminium oksida( kieslguhr 'diatomeous earth( dan selulosa. 3ari keempat

jenis adsorben tersebut yang paling banyak dipakai ialah silika gel dan masing

masing terdiri dari beberapa jenis yang mempunyai nama perdagangan

bermacammacam. 0ilika gel ini menghasilkan perbedaan dalam efek pemisahan

yang tergantung kepada cara pembuatannya. 0elain itu harus diingat bah!a

penyerap yang berpengaruh nyata terhadap daya pemisahnya.

>ase gerak 'mobile( meliputi beberapa ,ariasi eluen. Eluen yang

digunakan untuk proses elusi terdapat dua jenis yaitu eluen yang lebih polar dan

eluen yang kurang polar. /enggunaan eluen yang kurang polar dimaksudkan

untuk mengelusi ekstrak heksan dan ekstrak metanol sedangkan eluen yang

lebih polar untuk mengelusi ekstrak nbutanol jenuh air dan ekstrak metanol.

Eluen yang digunakan merupakan kombinasi dari dua macam pelarut @al ini

dimaksudkan untuk mencapai semua tingkat kepolaran sehingga eluen ini dapat

mengangkat noda yang tingkat kepolarannya berbedabeda. /erbandingan

jumlah eluen yang digunakan berdasarkan pengalaman dapat menarik komponen

kimia yang maksimal.

+da beberapa keuntungan dari metode kromatografi lapis tipis yaitu

prosedurnya lebih sederhana dengan !aktu yang relatif singkat dapat digunakan

untuk memisahkan sampel yang sangat kecil sampai 2" nanogram pemisahan

lebih sempurna untuk senya!a kompleks dalam larutan mudah dideteksi dan

lebih sensitif. /ada pengujian kandungan senya!a kimia menggunakan

kromatografi lapis tipis mulamula sampel yang akan dianalisis dilarutkan
http://id.wikipedia.org/wiki/Pelaruthttp://id.wikipedia.org/wiki/Fasehttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Plat&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Silika&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Fasehttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Plat&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Silika&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Pelarut


14/17

terlebih dahulu. /ercobaan ini menggunakan tiga jenis fraksi yakni fraksi n

heksana fraksi etil asetat dan fraksi tak larut etil asetat. Eluen yang digunakan

terdiri dari campuran antara nheksana dan etil asetat dengan perbandingan ? : 2

dan 2 : ? dalam ,olume 2 ml.

Eluen yang digunakan adalah =heksan : etil asetat '? : 2( dimasukkan ke

dalam chamber yang telah dijenuhkan dengan kertas saring. Kemudian

dimasukkan plat KLT yang telah ditotolkan sampel fraksi =heksan etil asetat

dan etanol. 0ampel yang sudah dielusi kemudian diangkat lalu dilihat nodanya

disinar 8 lalu dikeringkan dengan o,en sebelum dikeringkan dioleskan

menggunakan serium agar noda terlihat jelas. 0ebelum lempeng yang dielusi

dengan sampel dimasukkan kertas saring. 6hamber yang berisi eluen akan

merambat keluar melalui kertas saring. +lasan mengapa eluen harus dijenuhkan

yaitu agar tekanan dalam chamber sama agar noda yang dihasilkan sesuai dengan

diinginkan.

0ampel yang telah dilarutkan kemudian dilakukan penotolan pada plat

KLT yang sebelumnya telah dibuat garis batas ba!ah serta titik untuk tempat

menotol dengan menggunakan pensil. /enotolan dilakukan dengan menggunakan

pipa kapiler yang kemudian dimasukkan kedalam chamber yang telah berisi

dengan eluen. 0etelah beberapa menit plat kemudian dikeluarkan dari chamber

dan sebelum dikeringkan dengan o,en sebelumnya disemprotkan dengan serium.

ji kemurnian dilakukan dengan KLT sampai tampak satu noda pada

minimal tiga sistem eluen. 0elain itu uji kemurnian juga dilakukan dengan KLT

dua dimensi yang apabila murni akan menampakkan satu noda. /emilihan eluen

dilakukan berdasarkan kepolarannya selain itu jika senya!a tersebut telah murni

akan memberikan noda tunggal dalam eluen sehingga terbentuk spotspot.Dleh

karena itu diperlukan suatu perhitungan tertentu untuk memastika spot 'noda(

yang terbentuk memiliki jarak yang sama !alaupun ukuran jarak platnya

berbeda. =ilai perhitungan tersebut adalah f. =ilai ini digunakan sebagai

perbandingan relatif antara sampel. =ilai f juga menyatakan derajat retensi


15/17

suatu komponen dalam fasa diam sehingga nilai f sering juga di sebut faktor

retensi.

=ilai f yang didapatkan pada pratikum kali ini adalah diperoleh jarak

yang ditempuh fase gerak cm. ntuk fraksi =heksan jarak tempuh senya!a

adalah 1 1? 2% dan 2< cm dan jarak tempuh fase gerak adalah cm dan

diperoleh nilai f "%7 "7 "7B "B%. >raksi etil asetat jarak tempuh sampel

adalah 1B dan 1? cm dan jarak tempuh fase gerak adalah cm dan nilai f yang

diperoleh adalah "% dan "7. 0edangkan untuk penotolan fraksi etanol 12 cm

dan jarak tempuh untuk pelarutnya adalah cm dan nilai f yang diperoleh

adalah "%.

H. KESIMPULAN

Kesimpulan yang dapat diperoleh dari laporan ini adalah sebagai berikut :

1. /rinsip dasar dari Kromatografi Lapis Tipis adalah berdasarkan adsorpsi dan

partisi dimana sampel akan berpisah berdasarkan perbedaan kepolaran

antara sampel dengan pelarut yang digunakan. Teknik ini biasanya

menggunakan fasediam dari bentukplatsilikadan fase geraknya disesuaikan

dengan jenis sampel yang ingin dipisahkan. 0emakin dekat kepolaran antara

sampel dengan eluen maka sampel akan semakin terba!a oleh fase gerak

tersebut.

2. ntuk fraksi =heksan jarak tempuh senya!a adalah 1 1? 2% dan 2raksi etil asetat jarak tempuh sampel adalah 1B dan 1?

cm dan jarak tempuh fase gerak adalah cm dan nilai f yang diperoleh

adalah "% dan "7. 0edangkan untuk penotolan fraksi etanol 12 cm dan

jarak tempuh untuk pelarutnya adalah cm dan nilai f yang diperoleh

adalah "%.
http://id.wikipedia.org/wiki/Pelaruthttp://id.wikipedia.org/wiki/Fasehttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Plat&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Silika&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Pelaruthttp://id.wikipedia.org/wiki/Fasehttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Plat&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Silika&action=edit&redlink=1


16/17

DAFTAR PUSTAKA

1. Carolus, F.P., Fatimawali., dan Defny, S.W., 2014, ji efekti,itas Ekstrak

Kulit )atang &ambu Mete (Anacardium Occidentale L.) terhadap penurunanKadar 9lukosa 3arah pada Tikus putih &antan 9alur istar 'Rattusnorvegicus( yang diinduksi +loksanJurnal Ilmiah armasi! V". 3 (3).

2. 3a,id 6. 2""1 "as #romatography Kogan /age London.

3. @ernani Tri M. dan 6hristina . 2""B /emilihan /elarut pada /emurnian

Ekstrak Lengkuas 'Alpinia galanga( secara EkstraksiJ.$ascapanen V". (1).

. engginasti +.3. dan +ryoko idodo. 2""? /emisahan senya!a minyak atsiri

rimpang lempuyang gajah 'Fingiber *erumbet( secara kromatografi lapis tipisdan akti,itasnya terhadap Malasse*ia furfur in ,itro +rtikel /enelitian Glmiah

>akultas Kedokteran ni,ersitas 3iponegoro 0emarang.

7. udiL. 2"1". /enuntun 3asar3asar /emisahan +nalitik. ni,ersitas @aluoleo.

Kendari.


17/17

$. 8eriony L. 0udarsono. dan +gung. E.=. 2"11 +kti,itas +ntiinflamasi

rebusan Kulit )atang &ambu Mete 'Anacardium occidentale L.( pada dema

kaki Tikus terinduksi Karagenin%a&alah Obat Tradisional! V". 16 (3).

laporan praktikum fitokimia iv

Documents