laporan tetap mikrobiologi umum isolasi.docx

Upload: ernita-nurliani

Post on 20-Feb-2018

225 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    1/12

    LAPORAN TETAP

    PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI UMUM

    TEKNIK ISOLASI DAN PEMURNIAN MIKROBA

    Oleh :

    Ernita Nurliani

    05031!1"1#0#1

    PROGRAM STUDI TEKNOLOGI $ASIL PERTANIAN

    %URUSAN TEKNOLOGI PERTANIAN

    &AKULTAS PERTANIAN

    UNI'ERSITAS SRI(I%A)A

    015BAB 1

    PENDA$ULUAN

    1*1* Latar Bela+an,

    Biakan murni bakteri adalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri

    yang ditumbuhkan dalam medium buatan. Teknik biakan murni untuk suatu

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    2/12

    spesies dikenal dengan beberapa cara yaitu cara penggoresan, cara penuangan,

    cara pengenceran. Cara penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut

    ekonomi dan waktu, tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan.

    Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah tetapi

    kelemahan dari cara ini adalah bakteri-bakteri anareob tidak dapat tumbuh. Cara

    ini terbagi menjadi 4 yaitu, goresan T, goresan kuadran, goresan radian, goresan

    sinambang.

    Teknik biakan murni tidak hanya diperlukan untuk bagaimana

    memperoleh suatu biakan yang murni, tetapi juga bagaimana memelihara serta

    mencegah pencemaran dari luar. Media untuk membiakkan bakteri haruslah steril

    sebelum digunakan. Pencemaran terutama berasal dari udara yang mengandung

    banyak mikroorganisme. Pemindahan biakan mikroba yang dibiakkan harus

    sangat hati-hati dan mematuhi prosedur laboratorium agar tidak terjadi

    kontaminasi.

    ntuk mengelompokan bakteri gram positi! dan gram negati! dilakukan

    identi!ikasi mikrobia dengan teknik pewarnaan gram. Bakteri gram positi! akan

    mempertahankan "at warna kristal #iolet dan akan tampak berwarna ungu tua di

    bawah mikroskop. $dapun bakteri gram negati! akan kehilangan "at warna kristal

    #iolet setelah dicuci dengan alkohol, dan sewaktu diberi "at pewarna air !ucsin

    atau sa!ranin akan tampak berwarna merah

    1** Tu-uan

    Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mempelajari cara mengisolasi

    mikroorganisme dan mempelajari teknik penggoresan untuk memperoleh biakan

    murni.BAB

    TI%AUN PUSTAKA

    Pada dasarnya sendiri Biakan murni diperlukan dalam berbagai metode

    mikrobiologis, antara lain digunakan dalam mengidenti!ikasi mikroba. ntuk

    mengamati ciri-ciri kultural mor!ologi, !isiologi dan serologi dibutuhkan mikroba

    yang berasal dari satu spesies , sehingga akan diperoleh kultur murni atau biakan

    murni. %ultur murni sendiri merupakan kultur yang sel-sel mikrobanya berasal

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    3/12

    dari pembelahan dari satu sel tunggal yang bersi!at tunggal. &ering kali juga

    isolasi diartikan sebagai pemisahan suatu hal dari hal lain atau usaha untuk

    memencilkan manusia dari manusia lain' pengasingan' pemencilan' pengucilan

    ,keadaan terpencilnya satu wilayah karena jauh dari hubungan lalu

    lintas,penyekatan (pengham-batan atau penahanan) arus listrik oleh suatu bahan

    sehingga arus itu tidak dapat mengalir, pemisahan satu kelom-pok ikan dari

    kelompok ikan lain sehingga perkawinan antarkelompok dapat

    dihindari.Pemisahan dan pemurnian merupakan suatu cara yang dilakukan untuk

    memisahkan atau memurnikan suatu ssenyawa atau sekelompok senyawa yang

    mempunyai susunan kimia yang berkaitan dari suatu bahan, baik dalam skala

    laboratorium maupun skala industri. Pada prinsipnya, pemisahan dilakukan untuk

    memisahkan dua "at atau lebih yang saling bercampur, sedangkan pemurnian

    dilakukan untuk mendapatkan "at murni dari suatu "at yang telah tercemar oleh

    "at lain. Pemisahan dan pemurnian campuran memiliki man!aat yang sangat

    penting dalam ilmu kimia, industri maupun dalam kehidupan sehari-hari, dalam

    banyak kasus kita dapat menggunakan material tanpa pemurnian, baik material itu

    dari alam (misalnya minyak tanah) atau yang disintesis di laboratorium,

    Pemisahan atau pemurnian dengan metode tertentu perlu dilakukan. *emikian

    pula dalam pekerjaan di laboratorim maupun dalam proes industi banyak yang

    melibatkan pemisahan dan pemurnian. Misalnya pengolahan bijih dari

    pertambangan, pemisahan logam dari mineralnya, pengolahan minyak bumi,

    pengolahan air minum dan lain-lain. &edangkan contoh sederhana pemisahan dan

    pemurnian yang sering dilakukan dalam kehidupan sehari-hari misalnya

    pemisahan ampas kelapa dengan santannya yang dilakukan dengan metode

    penyaringan .*alam melakukan pemisahan dan pemurnian diperlukanpengetahuan dan keterampilan, terutama jika harus memisahkan komponen

    dengan kadar yang sangat kecil. ntuk tujuan itu, dalam ilmu kimia telah

    dikembangkan berbagai cara pemisahan dari pemisahan sederhana yang serig

    dilakukan sehari-hari sampai metode pemisahan dan pemurnian yang kompleks

    atau tidak sederhana. Maka dari itu, berdasarkan kebutuhan terhadap oksigen,

    bakteri dibedakan atas bakteri aerob dan bakteri anaerob. Bakteri aerob adalah

    bakteri yang membutuhkan oksigen untuk melakukan proses kehidupan.

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    4/12

    &edangkan bakteri anaerob adalah bakteri yang tidak membutuhkan oksigen

    bebeas untuk melaksanakan proses kehidupannya (*widjoseputro, +).

    *alam teknik pemeliharaan bakteri, sangat perlu diperhatikan dalam

    masalah pemenuhan nutrisi bagi bakteri dan mikroba lainnya agar dapat terus

    sur#i#e dan tumbuh optimal pada suatu lingkungan, sehingga perlu ditemukannya

    media yang cocok dan bagus untuk pertumbuhan bakteri. Media tersebut dikenal

    sebagai media agar. Media agar memungkinkan suatu bakteri tetap tumbuh

    dengan baik di koloni yang telah ada dan sejenis dengan diriya. &ehingga dalam

    kultur bekteri, satu koloni dianggap sebagai satu organisme yang sejenis. amun

    dalam isolasi dan pemurnian bekteri, perlu adanya teknik teknik yang dipelajari

    dan dikuasai. /akni teknik dilusi, teknik pour plate, serta teknik streak plate.

    *alam isolasi kultur murni bakteri, perlu diperhatikan komponen komponen yang

    dibutuhkan untuuk menunjang kehidupan bakteri itu sendiri. Biakan murni bakteri

    adalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri yang ditumbuhkan dalam

    medium buatan. Teknik biakan murni untuk suatu spesies dikenal dengan

    beberapa cara yaitu cara penggoresan, cara penuangan, cara pengenceran. Cara

    penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu,

    tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan. Penggoresan yang

    sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah tetapi kelemahan dari cara ini

    adalah bakteri-bakteri anareob tidak dapat tumbuh. Cara ini terbagi menjadi 4

    yaitu, goresan T, goresan kuadran, goresan radian, goresan sinambang (0aluyo,

    +1).

    BAB 3

    PELAKSANAAN PRAKTIKUM

    3*1* (a+tu .an Te/at

    Praktikum ini dilaksanakan pada hari &elasa tanggal 4 o#ember +2

    pukul 3. 0B sampai dengan pukul 3. 0B di 5aboraturium %imia 6asil

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    5/12

    Pertanian (%6P), 7urusan Teknologi Pertanian 8akultas Pertanian ni#ersitas

    &riwijaya.

    3** Alat Dan Bahan

    $lat yang digunakan dalam praktikum ini yaitu9 ) Bunsen +) Cawan petri, 3)

    7arum ose, 4) Tabung reaksi.

    Bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu9 ) $lkohol, +)

    $:uadest, 3) Biakan hasil isolasi, 4) 5arutan kristal #iolet.

    3*3* ara Ker-a

    Cara kerja dalam praktikum teknik isolasi dan pemurnian mikrobia adalah9

    . *isiapkan cawan petri yang berisi media padat (jenis media tertentu)

    +. &atu koloni mikroorganisme dari biakan yang dipilih diambil dengan jarum

    ose steril berukuran + mm.

    3. 7arum ose digoreskan pada media padat secara hati-hati.

    4. &etiap berpindah dari ke-+, ke-3 dan seterusnya jarus ose harus dibakar di

    atas Bunsen.

    2. Cawan petri di inkubasi kemudian dilakukan pemurnian dengan cara diambil

    koloni dari cawan petri dengan menggunakan jarum ose steril berukuran +

    mm.;. *isiapkan tabung reaksi berisi agar miring lalu jarum ose tadi digoreskan di

    permukaan agar miring dengan hati-hati dan diletakkan dalam incubator.

    BAB "

    $ASIL DAN PEMBA$ASAN

    "*1* $a2il

    Tabel . solasi dan Pemurnian Bakteri

    %elompok Bakteri Bentuk Margin (Tepi)

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    6/12

    thypsti

    Tabel +. >ambar

    o %eterangan >ambar

    . Biakan awal dalam tabung reaksi

    Staphylococcus aureus

    Salmonella thypsti

    +. Biakan gores cawan petri

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    7/12

    3. Biakan lurus tabung reaksi

    Staphylococcus aureus

    Salmonella thypsti

    "** Pe/aha2an

    Praktikum isolasi dan pemurnian mikrobia ini menggunakan bakteri

    Lactobacillus plantarium. Bakteri ini merupakan bakteri gram positi!. Pemisahan

    dan pemurnian merupakan suatu cara yang dilakukan untuk memisahkan atau

    memurnikan biakan murni dari sampel yang digunakan. Biakan murni bakteriadalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri yang ditumbuhkan dalam

    medium buatan.

    Pemurnian biakan murni dapat dilakukan dengan metode gores. Cara

    penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu,

    tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan. Penggoresan yang

    sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah, tetapi kelemahan dari cara ini

    adalah bakteri-bakteri anareob tidak dapat tumbuh.

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    8/12

    Pada praktikum kali ini penggoresan dilakukan dengan metode penggoresan

    berbentuk ?. Penggoresan ini ber!ungsi untuk memperluas permukaan dari

    medium agar. &ehingga, mikroba memiliki tempat tumbuh yang lebih besar.

    Media agar memungkinkan suatu bakteri tetap tumbuh dengan baik di koloni yang

    telah ada dan sejenis dengan diriya. &ehingga dalam kultur bekteri, satu koloni

    dianggap sebagai satu organisme yang sejenis. amun dalam isolasi dan

    pemurnian bekteri, perlu adanya teknik teknik yang dipelajari dan dikuasai.

    Pada praktikum kali, untuk menggores agar sebagai medium mikroba,

    digunakan sebuah alat yang bernama jarum ose. 7arum ose sebelum digunakan

    dibakar terlebih dahulu pada Bunsen sehingga tercipta kondisi aseptis, dimana

    menghindari adanya bakteri kontaminan. Praktikum kali ini menggunakan dua

    teknik penggoresan, yaitu teknik gores pada media padat dan teknik gores pada

    media miring. Teknik gores pada media padat dilakukan penggoresan dengan

    menyerupai huru! ? sebanyak empat kali, sedangkan pada teknik gores pada

    media miring jarum ose hanya dimasukkan sekali saja ke dalam tabung reaksi.

    Penggunaan teknik ini akan menghasilkan koloni mikroba yang terpisah.

    $kan tetapi dari hasil yang didapatkan, tidak semua koloni terpisah sempurna. 6al

    ini bisa disebabkan karena penggoresan yang kurang sempurna, sehingga

    menyebabkan tidak terpisahnya koloni. $danya kontaminan lain juga bisa

    menyebabkan tidak sempurnanya pemisahan koloni pada mikroba.

    BAB "KESIMPULAN

    %esimpulan dari praktikum ini adalah 9

    . BakteriLactobacillus planetarium merupakan bakteri gram positi!.

    +. Biakan murni bakteri adalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri

    yang ditumbuhkan dalam medium buatan.

    3. Praktikum kali ini menggunakan dua teknik penggoresan, yaitu teknik

    gores pada media padat dan teknik gores pada media miring.Pemurnian

    biakan murni dapat dilakukan dengan metode gores.

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    9/12

    4. Cara penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi

    dan waktu, tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan.

    2. Penggunaan teknik gores akan menghasilkan koloni mikroba yang

    terpisah. $kan tetapi dari hasil yang didapatkan, tidak semua koloni

    terpisah sempurna.

    DA&TAR PUSTAKA

    *wiesaputro, M.7. +.Dasar-dasar Mikrobiologi. ni#ersitas ndonesia. Press9

    7akarta.

    @usdimin.+2.Praktek Mikrobiologi Dasar.7akarta9 >ramedia.

    &utardja, anang. +A. Penuntun Pratikum Mikrobiologi Umum. Bandung9

    P$*.

    0ahab, 5. +2.Mikrobiologi Umum. MM Press9 Malang.

    0ahyuningsih. +=. Pengecetan Gram. ni#ersitas 7enderal &oedirman.

    8akultas Pertanian9 Purwokerto.

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    10/12

    0aluyo. ud. +=. Tehnik Metode Dasar Mikrobiologi. ni#ersitas

    Muhamadiyah Malang, Malang.

    LAMPIRAN

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    11/12

  • 7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx

    12/12