media dan kultivasii

7/22/2019 Media Dan Kultivasii

1/55

NUTRISI DAN KULTIVASI

MIKROORGANISME


2/55


3/55


4/55


5/55


6/55


7/55


8/55


9/55


10/55


11/55


12/55


13/55


14/55


15/55


16/55

MEDIA PEMBIAKAN BAKTERI

Proses isolasi bakteri dari alam (udara, air, tanah, organisme) ke

dalam laboratorium membutuhkan media biakan yang sesuai.

Tujuan pemilihan dan penentuan media adalah untuk menjaminketersedian nutrien (unsur hara) yang diperlukan oleh bakteri

untuk aktivitas perkembangbiakan dan pertumbuhannya.

Pengelompokan Media Biakan bakteri :

1. Berdasarkan Karakteristik Fungsinya2. Berdasarkan Bentuknya


17/55

1. MEDIA DEFERENSIAL

Digunakan untuk membedakan berbagai kelompokbakteri berdasarkan sifat tertentu terhadap media

Contoh : Media Agar Darah (Sifat Lisis Eritrosit bakteri)

2. MEDIA SELEKTIF

Selektif dalam komposisi nutrien, digunakan untuk

menumbuhkan bakteri tertentu dan menghambat bakterilain (Isolasi Bakteri)

Contoh : Media TCBS untuk Vibrio harveyi

BERDASARKANKARAKTERISTIK

FUNGSINYA


18/55


19/55

3. MEDIA SELEKTIF DAN DEFERENSIAL

Bersifat selektif terhadap bakteri tertentu dan mampumemberikan respon tertentu terhadap pertumbuhan

bakteri tertentu.

Biasanya digunakan dalam kegiatan identifikasi bakteri.

4. MEDIA DIPERKAYA (Enr ichment Medium)Diperkaya dengan kandungan nutrien tertentu dalam

rangka mengoptimasi pertumbuhan bakteri tertentu.

Selain nutrien, bisa juga ditambahkan :

1) Bahan Penghambat Bakteri lain

2) Indikator Selektivitas


20/55


21/55


22/55

1. MEDIA CAIR

= Media Broth (kaldu)

Media Pembiakan bakteri dalam bentuk cair (kaldu)

BERDASARKANBENTUKNYA

Broth Medium


23/55

2. MEDIA PADAT

= Media AgarMedia Pembiakan bakteri dalam bentuk padat (kental)

dengan penambahan bahan pemadat berupa gelatin

atau agar.

Serbuk Agar

Plate Agar Medium


24/55

BAHAN-BAHAN YANG DITAMBAHKAN DALAM MEDIA PEMBIAKAN BAKTERI

ZAT HARA BENTUK BAHAN

Nitrogen NH4Cl, NaNO3 (Anorganik),

Pepton (Organik)

Karbon Gula (laktosa, sukrosa, maltosa), Pati

dan Glikogen

Vitamin dan Faktor Pertumbuhan Thiamine, Riboflavin, Biotin,

Beta alanine, Purin dan Pirimidin

Garam Mineral Sulfur (NH4SO4), Posphat (K2HPO4),

Kalium, Magnesium, Mangaan,Ferum, dan Calsium

Air Aqua Destilata (Aquades)


25/55

PERSIAPAN PEMBIAKAN BAKTERI

Sterilisasi merupakan proses mematikan semua mikroorganisme

yang hidup.

Dalam proses pembiakan bakteri, sterilisasi mutlak diperlukan

untuk menghindari kontaminasi bakteri non-target atau

mikroorganisme lain (jamur atau virus)

Secara Umum meliputi :

1. Sterilisasi Media

2. Sterilisasi Alat

STERILISASI


26/55

1. Sterilisasi Media

Meliputi :

2. Sterilisasi Alat

Sterilisasi Kering menggunakan oven pada temperatur

160-170 0C selama 2-3 jam.

Tyndal l isasi

Mendidihkan medium dengan uap selama beberapa menit,

kemudian didiamkan selama 1 hari, kemudian didihkan lagi

hingga 3 kali ulangan.

Autoclaving

Menggunakan Autoclave (Tangki Sterilisasi), selama 15-20

menit pada suhu 121 0C, tekanan 1 atm/ cm2 (15 lb/ inchi2).

Filtrasi

Menggunakan saringan porselain atau tanah diatom dengan

pore tertentu.


27/55

Autoclave


28/55


29/55


30/55


31/55


32/55

Secara umum Teknik Penanaman (Inokulasi) Bakteri dapat

dilakukan dengan metode :

1. Biakan Agar Lempeng (Plate Agar Culture)

2. Biakan Agar Miring

3. Biakan Tusukan

4. Biakan Adukan (Pour Plate Culture)

TEKNIKINOKULASI

BAKTERI


33/55

Menggunakan lempeng agar untuk membiakan bakteri melalui

metode gores, oles atau spray

1

BIAKAN AGAR LEMPENG (PLATE AGAR CULTURE)

Metode Gores Metode Oles/ Spray

Plate Agar Cultur e


34/55

Menggunakan medium agar yang diletakkan miring pada tabung

biakan

2

BIAKAN AGAR MIRING

Biakan Agar Miring


35/55

Diperoleh dengan cara menusukkan ujung kawat yang membawa

bakteri lurus ke dalam medium melalui tengah-tengah medium.

Bakteri aerob akan tumbuh di dekat permukaan medium.

3

BIAKAN TUSUKAN

Biakan Tusukan

Bakteri Aerob


36/55

Meletakkan biakan bakteri di tengah cawan petri kemudian

dituangkan gelatin atau agar yang belum memadat.

4

BIAKAN ADUKAN (POUR PLATE CULTURE)

Pour Plate Culture

BACK TO MENU


37/55

Biakan Campuran (Mixed Culture)

Biakan yang masih terdiri lebih dari satu spesies bakteri,

biasanya didapatkan pada awal penanaman (inokulasi)


38/55

Biakan Murni (Pure Culture)

Biakan yang sudah terdiri dari satu spesies bakteri saja,

yang didapatkan dari pemurnian Biakan Campuran

(Mixed Culture)

Mixed Culture

Primary Culture

Sub-cultureBACK TO MENU


39/55

TEKNIK PEMBIAKAN MURNI

Teknik Pemisahan koloni murni dari koloni campuran,

secara umum dapat dilakukan dengan 3 metode :

1. Pengenceran

2. Penuangan

3. Penggesekan


40/55

PENGENCERAN

Pertama kali diperkenalkan oleh Lister (1865)

Dengan cara melakukan pengenceran berseri koloni awal(campuran)

10 -1

10 -2

10 -3

MIXED CULTURE


41/55


42/55

PENUANGAN

Pertama kali diperkenalkan oleh Robert Koch (1843-1905)

Menggunakan metode Biakan Adukan

PENGGESEKAN

Menggunakan Metode Agar Lempeng dengan Teknik Gores

BACK TO MENU


43/55


44/55


45/55


46/55


47/55


48/55


49/55


50/55


51/55


52/55


53/55


54/55


55/55

TERIMA KASIH

media dan kultivasii

Documents