laporan akhir biokim 3

Upload: hapsari

Post on 19-Feb-2018

270 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    1/19

    HIDROLISIS PATI ENZIMATIS

    Hapsari Purwitaningrum 23011014003

    !"#$mp$% 1& !"#as P"ri%anan A

    A'STRA!

    Karbohidrat merupakan sumber energi bagi aktivitas kehidupanmanusia disamping protein dan lemak. Pati merupakan bagian darikarbohidrat. Pati hanya disusun oleh satu jenis monosakarida yaitu D-glukosa. Polimerisasi dari glukosa pada pati membentuk dua jenispolimer yaitu amilosa dan amilopektin. Pati dihidrolisis oleh enzim

    amilase untuk membentuk molekul-molekul monosakarida atauoligosakarida yang lebih kecil lagi. Hidrolisis pati merupakan prosespemecahan molekul amilum menjadi bagian-bagian penyusunnyayang lebih sederhana seperti dekstrin, isomaltosa, maltosa danglukosa. Tujuan dari praktikum ini adalah dapat menganalisa aktitasenzim amilase dan !aktor-!aktor yang mempengaruhinya serta dapatmengetahui perubahan-perubahan pengamatan dan menguasaipenggunaan alat dan bahan. Peralatan dan bahan yang digunakanadalah gelas ukur, aluminium !oil, labu ukur, inkubator,spektro!otometer, pati, glukosa, K", "#, enzim amilase, reagen iodindan a$uades. Hasil nilai absorbansi yang didapatkan adalah -%,%#&

    untuk pH ' dan -%,%%( untuk pH ( dengan menggunakanspektro!otometer dan sampel menggunaka pati dengan tepungmaizena serta perlakuan suhu inkubasi ''%).

    Kata kunci: Karbohidrat, Pati, Enzim Amilase, Hidrolisis Pati,Spektrofotometer

    PENDAH(L(AN

    Karbohidrat merupakan sumber energi bagi aktivitas kehidupan

    manusia disamping protein dan lemak. Di "ndonesia kurang lebih &%-

    *%+ kebutuhan energi berasal dari karbohidrat, karena makanan

    pokok orang "ndonesia sebagian besar mengandung karbohidrat

    seperti beras, jagung, sagu, ketela pohon dll. Karbohidrat dapat

    dioksida menjadi energi, misalnya glukosa dalam sel jaringan manusia

    dan hean. Dalam tubuh, karbohidrat mengalami perubahan atau

    metabolisme yang menghasilkan antara lain glukosa yang terdapat

    dalam darah. edangkan karbohidrat yang disintesa dalam hati

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    2/19

    berupa glikogen digunakan oleh sel-sel pada jaringan otot sebagai

    sumber energi. Terdapat tiga golongan utama dari karbohidrat yaitu

    monosakarida, oligosakarida dan polisakarida. Pati merupakan bagian

    dari karbohidrat. Pati merupakan sumber utama penghasil energi dari

    pangan yang dikonsumsi oleh manusia. umber-sumber pati di dunia

    berasal dari tanaman sereal, legume, umbi-umbian, serta beberapa

    dari tanaman palm seperti sagu. (%-/%+ dari berat biji-bijian sereal

    mengandung pati dan menyediakan /%-&%+ kebutuhan kalori bagi

    penduduk dunia. 0lukosa adalah bagian dari kalori yang diperlukan

    tubuh untuk menghasilkan energi. Dengan menghidrolisis pati dengan

    bantuan enzimatis dapat menghasilkan glukosa sebagai kebutuhan

    energi makhluk hidup. 1aka dilakukanlah praktikum kali ini dengan

    tujuan untuk mengetahui dan menganalisa bagaimana kerja enzim

    amilase dalam hidrolisis pati ini dan !aktor-!aktor yang

    mempengaruhinya serta dapat mengamati perubahan pada

    perlakuan dan dapat menguasai penggunaan alat dan bahan

    laboratorium khususnya spektro!otometer.

    Enzim adalah satu atau beberapa gugus polipeptida (protein) yang

    berfungsi sebagai katalis (senyawa yang mempercepat proses reaksi tanpa habis

    bereaksi) dalam suatu reaksi kimia. Enzim bekerja dengan cara menempel pada

    permukaan molekul zat-zat yang bereaksi dan dengan demikian mempercepat proses

    reaksi. Percepatan terjadi karena enzim menurunkan energy pengaktifan yang dengan

    sendirinya akan mempermudah terjadinya reaksi. Sebagian besar enzim bekerja secara

    khas yang artinya setiap jenis enzim hanya dapat bekerja pada satu macam senyawa

    atau reaksi kimia. !al ini disebabkan perbedaan struktur kimia tiap enzim yang bersifat

    tetap. Sebagai contoh enzim "-amilase hanya dapat digunakan pada proses perombakan

    pati menjadi glukosa.

    !ar)$*i+rat

    Karbohidrat adalah polihidroksil aldehid atau keton atau

    senyaa-senyaa lainnya yang menghasilkan senyaa-senyaa ini

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    3/19

    bila dihidrolisa. Terdapat tiga golongan utama dari karbohidrat yaitu

    monosakarida, oligosakarida dan polisakarida.

    M$n$sa%ari+a

    1onosakarida adalah karbohidrat yang paling sederhana

    susunan molekulnya. 1onosakarida biasa juga disebut gula sederhana

    yang terdiri dari satu unit polihidroksil aldehida atau keton. Dalam

    tubuh monosakarida langsung diserap oleh dinding usus halus,

    kemudian masuk ke dalam aliran darah. 1onosakarida adalah hasil

    akhir pemecahan sempurna dari karbohidrat yang lebih komplek

    susunannya dalam proses pencernaan. 1onosakarida yang penting

    yaitu glukosa, !ruktosa dan galaktosa. 0lukosa disebut juga dekstrosa,

    banyak terdapat dalam buah-buahan dan sayuran. emua karbohidrat

    dalam tubuh akhirnya akan dirubah menjadi glukosa.

    O#ig$sa%ari+a

    2ligosakarida 3oligo dalam bahasa 4unani 2ligos yang artinya

    sedikit5 terdiri dari rantai pendek monosakarida yang bergabung.

    6agian dari oligosakarida yaitu disakarida 3dua unit monosakarida

    yang saling berikatan5 contohnya sukrosa 3ikatan antara glukosa dan

    !ruktosa5, maltose 3dua unit glukosa yang saling berikatan5, dan

    laktosa 3ikatan antara galaktosa dan glukosa5. 2ligosakarida yang

    memiliki tiga atau lebih unit monosakarida tidak terdapat secara

    bebas di alam.

    P$#isa%ari+a

    Polisakarida yaitu rantai panjang yang terdiri dari ratusan

    bahkan ribuan unit monomer sakarida. )ontoh polisakarida yang

    banyak terdapat di alam yaitu selulosa dan pati. Polisakarida terdiri

    dari monosakarida yang membentuk rantai polimer dengan ikatan

    glikosidik. Polisakarida akan membentuk gelatin7perekat7pembentuk

    ikatan, sehingga butiran yang terbentuk akan menjadi granula dan

    pada permukaannya akan terbentuk serat dietary ber yang akan

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    4/19

    sangat berman!aat untuk pencernaan 3metabolisme5. Dietary ber

    banyak terkandung dalam tumbuhan. Polisakarida dalam bahan

    makanan ber!ungsi sebagai penguat tekstur 3selulosa, hemi selulosa,

    pectin, lignin5, sumber energi 3pati, dekstrin, glikogen5. Polisakarida

    penguat tekstur ini tidak dapat dicerna oleh tubuh, tetapi merupakan

    serat-serat 3dietary ber5 yang dapat menstimulasi enzim-enzim

    pencernaan.

    0ambar. 8umus bangun karbohidrat

    Pati

    Pati merupakan bagian dari karbohidrat. Pati merupakan

    sumber utama penghasil energi dari pangan yang dikonsumsi oleh

    manusia. Pati merupakan homopolisakarida yang artinya hanya

    terdapat satu jenis monosakarida yang saling berikatan membentuk

    rantai panjang polimer. Pati hanya disusun oleh satu jenis

    monosakarida yaitu D-glukosa. Pati hanya terdapat pada tanaman

    yang berbentuk gumpalan atau granula. Pati sangat mudah

    dihidrolisis oleh enzim amilase untuk membentuk molekul-molekul

    monosakarida atau oligosakarida yang lebih kecil lagi, sedangkan

    selulosa tidak dapat dicernah oleh amilase, hal inilah yang

    menyebabkan beberapa hean dan manusia tidak dapat mencerna

    selulosa karena tidak memiliki enzim amilase dalam tubuhnya.

    Polimerisasi dari glukosa pada pati membentuk dua jenis polimer

    yaitu amilosa dan amilopektin. 9milosa merupakan polimer penting

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    5/19

    dalam pati yang membentuk rantai lurus oleh ikatan glikosida : ;,alker dan >helan dalam

    ?ogarty, ;*&@5. )ara kerja enzim 0-amilase terjadi melalui dua tahap,

    yaitu pertama, degradasi amilosa menjadi maltosa dan amltrotriosa

    yang terjadi secara acak. Degradasi ini terjadi sangat cepat dan

    diikuti dengan menurunnya viskositas yang cepat pula. Kedua, relati!

    sangat lambat yaitu pembentukan glukosa dan maltosa sebagai hasil

    akhir dan caranya tidak acak. Keduanya merupakan kerja enzim 0-

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    6/19

    amilase pada molekul amilosa saja 3>inarno, ;*&@5. Kerja 0-amilase

    pada amilopektin akan menghasilkan glukosa, maltosa dan berbagai

    jenis 0-limit dekstrin, yaitu oligosakarida yang terdiri dari cepat atau

    lebih residu gula yang semuanya mengandung ikatan 0-;,( 3>inarno,

    ;*&@5. 9ktivitas optimal dari enzim dipengaruhi oleh berbagai !aktor.

    ?aktor-!aktor penting yang berpengaruh di antaranya adalah pH dan

    suhu. Anzim 0-amilase merupakan enzim yang digolongkan sebagai

    enzim hidrolase. Benis ikatan polimer pada amilosa lebih mudah

    dipotong oleh enzim 0-amilase daripada jenis ikatan polimer yang

    amilopektin. Kerja enzim 0-amilose dalam menghidrolisis pati adalah

    dengan memotong ikatan 0-amilase C ;,

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    7/19

    memiliki alat pengurai seperti prisma yang dapat menyeleksi panjang

    gelombang dari sinar putih. Pada !otometer terdapat lter dari

    berbagai arna yang memiliki spesikasi meleatkan trayek panjang

    gelombang tertentu. pektro!otometer merupakan suatu

    alat7instrument yang dilengkapi dengan sumber cahaya 3gelombang

    elektromagnetik5, baik cahaya =E 3ultra-violet5 atau pun cahaya

    nampak 3visible5. pektro!otometer mampu membaca7mengukur

    kepekatan arna dari sampel tertentu dengan panjang gelombang

    tertentu pula. 9lat ini digunakan untuk mengukur konsentrasi

    beberapa molekul seperti DF97 8F9 3=E light, #(% nm5, protein 3=E,

    #&% nm5, kultur sel bakteri, ragi7 yeast 3Eis light, (%% nm5, dan lain-

    lain. inar =E digunakan untuk mengukur bahan 3larutan5 yang

    terbaca dengan panjang gelombang di baah

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    8/19

    blanko dan suatu alat untuk mengukur perbedaan absorbsi antara

    sampel dan blanko ataupun pembanding.

    METODOLO.I

    Praktikum kali ini dilaksanakan di #aboratorium $!% di gedung dekanat

    $akultas Perikanan dan &lmu 'elautan niersitas Padjadjaran. *aktu praktikum pada

    hari Selasa +, oember ,+/ pukul +.0, *&1.%lat yang digunakan yaitu gelas ukur

    untuk mengukur larutan sampel gelas kimia untuk memanaskan a2uades spatula untuk

    mangaduk sampel ketika ditambahkan a2uades hot plate untuk memanaskan sampel

    tabung reaksi untuk mereaksikan sampel pipet tetes untuk mengambil atau

    memindahkan larutan spektrofotometer untuk mengukur nilai absorbasi larutan

    incubator untuk mengikubasi sampel.1ahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu

    pati dari tepung beras tepung maizena tepung aci tepung terigu glukosa akuades

    enzim amilase dan reagen iodine.

    PROSED(R !ER/A

    a. Penyiapan larutan pati ,3

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    9/19

    c. Pembuatan 'ura Standar

    HASIL DAN PEM'AHASAN

    4abel.+ 5ata !asil Pengamatan Pati

    K

    el

    o

    Sa

    mp

    el

    Vol

    (ml

    )

    Peman

    asan

    Iodi

    n

    (1Tet

    Enzim

    Amilase

    Inkubasi

    (20 menit)

    Pemanasa

    n

    Absorban

    si

    3 3 3 3

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    10/19

    m

    po

    es)Tetes Tetes Tetes Tetes

    Tete

    s

    Tet

    es

    Tet

    es

    Tete

    s

    6

    4ep

    ung

    %ci

    7

    1ening

    #arut

    8air

    *arn

    a jadi

    ungu

    *arn

    a jadi

    ungu

    mud

    a

    *arn

    a jadi

    benin

    g

    1enin

    g

    kekuni

    ngan

    1enin

    g

    kekun

    ingan

    4idak ada

    perubahan

    ,7

    0,/,

    +,

    4ep

    ung

    %ci

    /

    *arna

    bening

    laruttekstur

    kental

    bau aci

    *arn

    a

    ungu

    adaenda

    pan

    benin

    g

    *arn

    a jadibeni

    ng

    *arn

    a

    lebih

    cepatmenj

    adi

    benin

    g

    *arna

    bening

    kekuni

    ngan

    terdap

    atbanya

    k

    endapa

    n

    tekstur

    kental

    *arna

    benin

    g

    lebih

    kunin

    g

    terdap

    at

    sedikit

    endap

    an

    bau

    amilu

    m

    tekstu

    r

    kental

    4idak

    terjadi

    perubahan

    ,7

    ,09

    ++ 4ep

    ung

    :ai

    zen

    a

    7 *arna

    bening

    tekstur

    cair

    terdapa

    *arn

    a

    ungu

    pekat

    ada

    enda

    *arn

    a

    ungu

    mud

    a

    ada

    ;adi

    benin

    g

    ada

    enda

    pan

    *arna

    merah

    magen

    ta ada

    endapa

    n

    *arna

    benin

    g

    kekun

    ing-

    kunin

    'eduanya

    semakin

    bening

    ,+

    7

    ,+

    7

  • 7/23/2019 Laporan Akhir Biokim 3

    11/19

    t

    gumpa

    lan

    pan

    putih

    enda

    pan

    putih

    sedik

    it

    gan

    ada

    endap

    an

    +

    4ep

    ung

    :aizen

    a

    /

    *arna

    bening

    tekstur

    kental

    bau

    khas

    tepung

    *arn

    a

    ungu

    pekat ada

    enda

    pan

    *arn

    a

    ungu

    beni

    ng

    masi

    h

    enda

    pan

    putih

    *arn

    a jadi

    benin

    gkeku

    ninga

    n

    *arna

    bening

    kekuni

    ngan

    ada

    endapa

    n

    sedikit

    *arna

    benin

    g

    kekun

    ingan

    ada

    endap

    an

    (bany

    ak)

    'eduanya

    semakinbening

    ,+

    u

    m

    pa

    la

    n

    un

    gu

    be

    rk

    ur

    an

    g

    >um

    palan

    cokla

    t

    berku

    rang

    ,+

    ,