lap_analisis instrument ii
Post on 18-Feb-2018
220 Views
Preview:
TRANSCRIPT
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 1/16
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 2/16
PENENTUAN SPEKTRUM ABSORPSI DAN PEMBUATAN KURVA
STANDAR PADA ANALISIS SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
I. A. Tujuan Praktikum
Tujuan dari percobaan ini adalah :
a. Agar mahasiswa mengetahui teknik dan cara penentuan panjang gelombang
( λ ) maksimum dan pembuatan kurva standar
b. Agar mahasiswa mengetahui sifat baik dan tidak baik untuk analisis dengan
instrument Spektrofotometer v!"is.
B. Prinsip Pr!"#aan
#enentuan panjang gelombang maksimum dengan analisis
Spektrofotometer v!"is$ dimana pada analisis ini$ warna merupakan salah satu
kriteria untuk mengidentifikasi suatu komponen serta pembuatan kurva standarn%a
berdasarkan hukum &abert ! 'eer
II. T"ri
solasi dan identifikasi sen%awa aktif antimakan dari batang brotowali
(Tinospora tuberculata '*) telah dilakukan. Seban%ak + kg serbuk kering
batang brotowali diekstraksi secara maserasi dengan pelarut metanol$ selanjutn%a
ekstrak metanol dipartisi secara berulang!ulang dengan n!heksana sehingga diperoleh
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 3/16
ekstrak metanol dan ekstrak n!heksana. ,edua ekstrak diuapkan dengan penguap
putar vakum sehingga diperoleh ekstrak kental metanol dan ekstrak kental n!heksana
%ang selanjutn%a diuji aktivitas antimakan. kstrak %ang lebih aktif dilakukan
pemisahan dengan kromatografi lapis tipis kemudian dilanjutkan dengan
kromatografi kolom menggunakan fase diam silika gel - dan fase gerak %ang terbaik
dari hasil kromatografi lapis tipis. /raksi %ang didapat diuji aktivitas antimakan.
Selanjutn%a ekstrak %ang lebih aktif diuji kemurniann%a dan diidentifikasi dengan uji
fitokimia dan spektrofotometer "!vis dan inframerah.
,adar vanilin dalam panili olahan %ang lama pen%impanan dua tahun telah
dianalisis dengan ekstraksi menggunakan emulsi membran cair$ spektrofotometri "!
"S dan kromatografi cair kinerja tinggi (,0,T). 1asil analisis dengan
spektrofotometri "!"S lebih tinggi dari pada ,0,T. Analisis %ang dilengkapi
dengan teknik emulsi membran cair memberikan hasil %ang jauh lebih tinggi dari
pada tanpa membran cair.
1al %ang telah dilakukan suatu metode 2ptimasi penentuan garam %odium
dengan Spektrofotomer v!"is. ,ondisi!kondisi reaksi optimum dan parameter
analisis penting lainn%a telah diselediki. #enelitian dilakukan oleh oksidasi %odium
dan iodida menjadi iodat$ mengurangi %ang iodat menjadi iodida kemudian iodida
oleh natrium nitrit. odium bebas hasil oksidasi oleh ekstrak kloforom adalah agar
terbentuk dari kondensasi dari memeras ungu dan diukur oleh absorbansi dengan
spekrofotometer v!"is. 1asil penelitian %ang panjang gelombang maksimum 3+$3
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 4/16
nm$ oksidasi %ang baik terhadap oksidasi iodida menjadi iodat adalah ,*n24. p1
optimum diperoleh papa p1 5. ntuk asam optimal menggunakan 15S24 kompleks
optimum Sekitar dan sispengukuran waktu adalah menit (segera diukur). ni metode
%ang akurasi dan presisi %ang baik. Sembilan sampel n%ata dianalisis mengandung
%odium$ tapi memasak dengan garam ini memenuhi standar. Sekitar 33$3 6 dan
sisan%a 44$3 6 dibawah sasaran.
*enurut smono (+78+)$ langkah!langkah %ang harus kita lakukan dalam
analisis suatu 9at dengan menggunakan spektrofotometer v!"is adalah:
+. #embentukan larutan %ang dapat men%erap sinar nampak
&angkah %ang harus dilkukan bila larutan %ang dianalisis tidak melakukan
pen%erapan pada daerah sinar tampak$ maka larutan tersebut harus diubah
menjadi larutan %ang dapat men%erap pada sinar tampak dengan mereaksikan
dengan pereaksi tertentu.
5. #emeilihan panjang gelombang tertentu
'ila tidak ada 9at!9at lain %ang mengganggu$ maka panjang gelombang %ang
digunakan untuk keperluan analisis kuantitatif secara spektrifitimeter adalah
panjang gelombang %ang sesuai dengan absorpsi maksimum sehingga akan
diperoleh analisis %ang maksimum pula.
. #embuatan kurva kalibrasi
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 5/16
ntuk keperluan itu dibuat larutan standar dengan berbagai konsentrasi %ang
diketahui. Serapan larutan standar kemudian diukur pada panjang gelombang
maksimum dan dibuat grafik absorbansi terhadap konsentrasi (Anwar$ 5;).
Spektrum elektronik sen%awa dalam fase uap kadang!kadang menunjukkan
struktur halus dimana sumbangan vibrasi individu dapat teramati$ namun dalam fase
mampat$ tingkat energi molekul demikian terganggu oleh tetangga dekatn%a. Semua
molekul dapat mengabsorpsi radiasi dalam " tampak karena mereka mengandung
elektron$ baik sekutu maupun men%endiri %ang dapat dieksitasikan ketingkat energi
%ang labih tinggi. #anjang gelombang dimana absorpsi itu terjadi$ bergantung pada
berapa kuat elektron itu terikat dalam molekul itu. Sebuah spektrofotometer adalah
suatu instrumen untuk mengukur transmitas atau absorbans suatu sampel sebagai
fungsi panjang gelombang pengukuran terhadap sederetan sampel pada suatu panjang
gelombang tunggal dapat pula dilakukan (<a%$ 55).
III. Mt"$ Praktikum
%. A&at $an Ba'an
Alat %angdigunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut :
• &abu takar 53 m& 5 buah
• &abu takar 3 m& + buah
• #ipet volume 53 m& 5 buah
• #ipet tetes buah
• =elas kimia 3 m& + buah
• nstrumen Spektrometer v!"is
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 6/16
'ahan %ang digunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut
• &arutan baku /e>
+ ppm
• &arutan Amonium Tiosianat + *
• &arutan Asam ?itrit 4 *
• A@uadest
(. Pr"s$ur Krja
Penentuan Panjang Gelombang ( λ ) Maksimum
dimasukkan kedalam labu takar 3 m&
ditambahkan 5 m& 1?2 4 ? dan 8 m& ?14S0? 4
*
diencerkan dengan a@uadest hingga batas tera
didiamkan beberapa saat sampai terbentuk warna
kuning kemerah!merahan
diukur panjang absorpsin%a pada panjang
gelombang (4!-) nm
dibuatkan kurva kalibrasi panjang gelombang terhadap
absorbansi
ditentukan panjang gelombang maksimum
ditentukan panjang gelombang maksimum
3 m& larutan /e>
4 nm $38
- nm $+8
() maks 48 nm
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 7/16
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 8/16
ditentukan persamaan regresin%a
C $4-4 D E
$5+4
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 9/16
IV. )asi& $an Pm#a'asan
%. Data )asi& Pn*ukuran
#enentuan #anjang =elombang *aksimum
N". Panjan* +&"m#an* ,λ ,nm A#s"r#ansi
+. 4 $38
5. 45 $;;
. 44 $74
4. 4- $+3
3. 48 $++5-. 3 $+-
;. 35 $8;
8. 34 $-;+
7. 3- $48
+. 38 $-
++. - $+8
Penentuan Konsentrasi Fe3+ pada panjang gelombang maksimum yaitu pada
panjang gelombang !" nm
N". V"&um ,mL A#s"r#ansi
+. $
5. $3 $-5
. + $8+
4. +$3 $++3
3. 5$ $44
-. 5$3 $7
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 10/16
(. Pr'itun*an
#$ Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
N". Panjan* +&"m#an* , λ A#s"r#ansi ,nm
+. 4 $38
5. 45 $;;
. 44 $74
4. 4- $+3
3. 48 $++5
-. 3 $+-
;. 35 $8;
8. 34 $-;+
7. 3- $48+. 38 $-
++. - $+8
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 11/16
%$& Penentuan Kurva Standar dan Penentuan Kurva Konsentrasi Ion Fe3+ Pada
panjang gelombang maksimum !" nm
V% ,L M% ,ppm V( ,L M( ,ppm A#s"r#ansi
+ $53
$3 + $53 $5 $-5
$+ + $53 $4 $8+
$+3 + $53 $- $++3
$5 + $53 $8 $44
$53 + $53 + $7
<ari kurva kalibrasi diatas$ dapat ditentukan nilai a dan b
% bD > a
% $4-4 D E $5+4
*aka: b $4-4
a !$5+4
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 12/16
%$ Penentuan konsentrasi dalam sampel 'Fe3+ $
D+ :4-4$.
).5+4$.(. −−
D+ :4-4$.
.5+4$.
D+ $-5
D5 :4-4$.
).5+4$.(.-5$. −−
D5 :4-4$.
.8:4$.
D5 $54
D :4-4$.
).5+4$.(.8+$. −−
D :4-4$.
+.54$.
D $57
D4 :4-4$.
).5+4$.(++3$. −−
D4 :4-4$.
+:-4$.
D4 $7
D3 :4-4$.
).5+4$.(:44$. −−
D3 :4-4$.
:-34$.
D3 +$3
D- :4-4$.
).5+4$.(:.7$. −−
D- :4-4$.
::.4$.
D- $73
D
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 13/16
$ (atas )eteksi
C Cb > Sb Cb nilai a pada kurva
Sb + ?
)D(D 5
−
−∑−
Sb
+ ?)D(D)D(D)D(D)D(D)D(D)D(D
5
-
5
3
5
4
5
:
5
5
5
+
−
−+−+−+−+−+−−−−−−−
Sb
+-
)47;$.(.$73)47;$.(+$.3)47;$.(.$:7
)47;$.(.$57)47;$.(.$54)47;$.(.$.-5
555
555
−
−+−+−+
−+−+−
Sb
3
(.$43:)(.$33:)(.$+.;)
(!.$5.;)(!.$53;))4:3$.(
555
555
+++
++−
Sb
3
5.35.7$.:.38.7$..++447$.
.45847$..--.47$.$+8753.(
++
+++
Sb 3
85.-+3$.
Sb +-4+5:$.
Sb $43
% !$5+4 > ($43)
+$+7-
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 14/16
*$ Sensitivitas 'kemiringan$
Sensitivitas nilai a pada kurva$ %aitu !$5+4
(. Pm#a'asan
#ada penentuan spektrum absorpsi dan pembuatan kurva standar pada analisis
Spektrofotometer v!"is$ selalu memakai metode relatif %ang biasan%a disebut
dengan standar. ,ita harus mempun%ai standar$ ,arena bekerja dengan menggunakan
instrumen harus ada standarn%a. Standar %ang dimaksud disini %aitu pada panjang
gelombang berapa kita harus bekerja. ntuk mengetahui itu semua$ kita
menggunakan larutan standar %aitu /e> %ang konsentrasin%a + ppm. &arutan /e> ini
akan ditambahkan dengan 1?2 4 * dan ?14S0? + *. <ari masing!masing larutan
ini diambil 3 m& /e
>
$ 5 m& 1?2 dan 8 m& ?14S0?. #enambahan 1?2 disini
berfungsi untuk mengikat logam besi$ sedangkan penambahan ?14S0? berfungsi
untuk membentuk kompleks pada larutan tersebut. Setelah larutan tersebut
bercampur$ larutan tersebut berubah warna menjadi kuning kemerah!merahan. Farna
tersebut merupakan warna dari kompleks /e(?14)5(S24)5. &arutan tersebut kita ukur
dengan spektrofotometer v!"is sehingga didapatkan absorpsi %ang maksimum$
%aitu pada panjang gelombang 48 nm. =unan%a kita perlu mengetahui panjang
gelombang %ang absorbann%a maksimum$ %aitu untuk mencari panjang gelombang
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 15/16
maksimum agar metode %ang kita gunakan sensitif sehingga dapat memberikan
respon %ang paling tinggi sehingga %ang berada dibawah standar dapat terukur.
#ada pembuatan kurva standar dan penentuan konsentrasi sampel (/e>)
terlebih dahulu kita mencari absorbansi sampel (/e>) pada panjag gelombang 48 nm
dengan konsentrasi %ang sudah ditentukan %akni ppmB $5 ppmB $4 ppmB $- ppmB
$8 ppmB dan + ppm. Setelah mengetahui absorbansi sampel dengan konsentrasin
%ang berbeda!beda$ kita membuat kurva standarGkurva kalibrasi %ang diperoleh
setelah mengukur absorbans dari sederetan konsentrasi larutan sampel tersebut. <ari
kurva kalibrasi %ang dibuat$ didapatkan persamaan regresinn%a %aitu % $4-4 D E
$5+4. dimana % disini adalah absorbansi$ dan D adalah konsentrasi. Angka $4-4
menunjukkan kemiringan. <ari persamaan regresi diatas$ kita dapat menentukan
konsentrasi rata!rata %aitu ....... ppm.
". Simpulan
+. penentuan panjang gelombang maksimum /e ditentukan dengan mengukur
absorbansi makksimum dari larutan kompleks besi dengan interval panjang
gelombang %ang digunakan 5 nm$ sehingga diperoleh serapan maksimum
larutan besi (/e) pada daerah panjang gelombang 48 nm. Sedang pembuatan
kurfa standarn%a standar /e dibuat dengan mengukur absorbansi larutan /e
dengan variasi konsentrasi$....$....$....$.....$ ppm pada gelombang kerja 48 nm.
7/23/2019 Lap_analisis Instrument II
http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 16/16
DAFTAR PUSTAKA
Anwar. 5;. ara,ara -ptik dalam .nalisis Kimia. T'. 'andung
top related