lap_analisis instrument ii

7/23/2019 Lap_analisis Instrument II

http://slidepdf.com/reader/full/lapanalisis-instrument-ii 1/16



PENENTUAN SPEKTRUM ABSORPSI DAN PEMBUATAN KURVA

STANDAR PADA ANALISIS SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

I. A. Tujuan Praktikum

Tujuan dari percobaan ini adalah :

a. Agar mahasiswa mengetahui teknik dan cara penentuan panjang gelombang

( λ ) maksimum dan pembuatan kurva standar

b. Agar mahasiswa mengetahui sifat baik dan tidak baik untuk analisis dengan

instrument Spektrofotometer v!"is.

B. Prinsip Pr!"#aan

#enentuan panjang gelombang maksimum dengan analisis

Spektrofotometer v!"is$ dimana pada analisis ini$ warna merupakan salah satu

kriteria untuk mengidentifikasi suatu komponen serta pembuatan kurva standarn%a

berdasarkan hukum &abert ! 'eer

II. T"ri

solasi dan identifikasi sen%awa aktif antimakan dari batang brotowali

(Tinospora tuberculata '*) telah dilakukan. Seban%ak + kg serbuk kering

batang brotowali diekstraksi secara maserasi dengan pelarut metanol$ selanjutn%a

ekstrak metanol dipartisi secara berulang!ulang dengan n!heksana sehingga diperoleh



ekstrak metanol dan ekstrak n!heksana. ,edua ekstrak diuapkan dengan penguap

putar vakum sehingga diperoleh ekstrak kental metanol dan ekstrak kental n!heksana

%ang selanjutn%a diuji aktivitas antimakan. kstrak %ang lebih aktif dilakukan

pemisahan dengan kromatografi lapis tipis kemudian dilanjutkan dengan

kromatografi kolom menggunakan fase diam silika gel - dan fase gerak %ang terbaik

dari hasil kromatografi lapis tipis. /raksi %ang didapat diuji aktivitas antimakan.

Selanjutn%a ekstrak %ang lebih aktif diuji kemurniann%a dan diidentifikasi dengan uji

fitokimia dan spektrofotometer "!vis dan inframerah.

,adar vanilin dalam panili olahan %ang lama pen%impanan dua tahun telah

dianalisis dengan ekstraksi menggunakan emulsi membran cair$ spektrofotometri "!

"S dan kromatografi cair kinerja tinggi (,0,T). 1asil analisis dengan

spektrofotometri "!"S lebih tinggi dari pada ,0,T. Analisis %ang dilengkapi

dengan teknik emulsi membran cair memberikan hasil %ang jauh lebih tinggi dari

pada tanpa membran cair.

1al %ang telah dilakukan suatu metode 2ptimasi penentuan garam %odium

dengan Spektrofotomer v!"is. ,ondisi!kondisi reaksi optimum dan parameter

analisis penting lainn%a telah diselediki. #enelitian dilakukan oleh oksidasi %odium

dan iodida menjadi iodat$ mengurangi %ang iodat menjadi iodida kemudian iodida

oleh natrium nitrit. odium bebas hasil oksidasi oleh ekstrak kloforom adalah agar

terbentuk dari kondensasi dari memeras ungu dan diukur oleh absorbansi dengan

spekrofotometer v!"is. 1asil penelitian %ang panjang gelombang maksimum 3+$3



nm$ oksidasi %ang baik terhadap oksidasi iodida menjadi iodat adalah ,*n24. p1

optimum diperoleh papa p1 5. ntuk asam optimal menggunakan 15S24 kompleks

optimum Sekitar dan sispengukuran waktu adalah menit (segera diukur). ni metode

%ang akurasi dan presisi %ang baik. Sembilan sampel n%ata dianalisis mengandung

%odium$ tapi memasak dengan garam ini memenuhi standar. Sekitar 33$3 6 dan

sisan%a 44$3 6 dibawah sasaran.

*enurut smono (+78+)$ langkah!langkah %ang harus kita lakukan dalam

analisis suatu 9at dengan menggunakan spektrofotometer v!"is adalah:

+. #embentukan larutan %ang dapat men%erap sinar nampak

&angkah %ang harus dilkukan bila larutan %ang dianalisis tidak melakukan

pen%erapan pada daerah sinar tampak$ maka larutan tersebut harus diubah

menjadi larutan %ang dapat men%erap pada sinar tampak dengan mereaksikan

dengan pereaksi tertentu.

5. #emeilihan panjang gelombang tertentu

'ila tidak ada 9at!9at lain %ang mengganggu$ maka panjang gelombang %ang

digunakan untuk keperluan analisis kuantitatif secara spektrifitimeter adalah

panjang gelombang %ang sesuai dengan absorpsi maksimum sehingga akan

diperoleh analisis %ang maksimum pula.

. #embuatan kurva kalibrasi



ntuk keperluan itu dibuat larutan standar dengan berbagai konsentrasi %ang

diketahui. Serapan larutan standar kemudian diukur pada panjang gelombang

maksimum dan dibuat grafik absorbansi terhadap konsentrasi (Anwar$ 5;).

Spektrum elektronik sen%awa dalam fase uap kadang!kadang menunjukkan

struktur halus dimana sumbangan vibrasi individu dapat teramati$ namun dalam fase

mampat$ tingkat energi molekul demikian terganggu oleh tetangga dekatn%a. Semua

molekul dapat mengabsorpsi radiasi dalam " tampak karena mereka mengandung

elektron$ baik sekutu maupun men%endiri %ang dapat dieksitasikan ketingkat energi

%ang labih tinggi. #anjang gelombang dimana absorpsi itu terjadi$ bergantung pada

berapa kuat elektron itu terikat dalam molekul itu. Sebuah spektrofotometer adalah

suatu instrumen untuk mengukur transmitas atau absorbans suatu sampel sebagai

fungsi panjang gelombang pengukuran terhadap sederetan sampel pada suatu panjang

gelombang tunggal dapat pula dilakukan (<a%$ 55).

III. Mt"$ Praktikum

%. A&at $an Ba'an

Alat %angdigunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut :

• &abu takar 53 m& 5 buah

• &abu takar 3 m& + buah

• #ipet volume 53 m& 5 buah

• #ipet tetes buah

• =elas kimia 3 m& + buah

• nstrumen Spektrometer v!"is



'ahan %ang digunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut

• &arutan baku /e>

+ ppm

• &arutan Amonium Tiosianat + *

• &arutan Asam ?itrit 4 *

• A@uadest

(. Pr"s$ur Krja

Penentuan Panjang Gelombang ( λ ) Maksimum

dimasukkan kedalam labu takar 3 m&

ditambahkan 5 m& 1?2 4 ? dan 8 m& ?14S0? 4

*

diencerkan dengan a@uadest hingga batas tera

didiamkan beberapa saat sampai terbentuk warna

kuning kemerah!merahan

diukur panjang absorpsin%a pada panjang

gelombang (4!-) nm

dibuatkan kurva kalibrasi panjang gelombang terhadap

absorbansi

ditentukan panjang gelombang maksimum

ditentukan panjang gelombang maksimum

3 m& larutan /e>

4 nm $38

- nm $+8

() maks 48 nm



ditentukan persamaan regresin%a

C $4-4 D E

$5+4



IV. )asi& $an Pm#a'asan

%. Data )asi& Pn*ukuran

#enentuan #anjang =elombang *aksimum

N". Panjan* +&"m#an* ,λ ,nm A#s"r#ansi

+. 4 $38

5. 45 $;;

. 44 $74

4. 4- $+3

3. 48 $++5-. 3 $+-

;. 35 $8;

8. 34 $-;+

7. 3- $48

+. 38 $-

++. - $+8

Penentuan Konsentrasi Fe3+ pada panjang gelombang maksimum yaitu pada

panjang gelombang !" nm

N". V"&um ,mL A#s"r#ansi

+. $

5. $3 $-5

. + $8+

4. +$3 $++3

3. 5$ $44

-. 5$3 $7



(. Pr'itun*an

#$ Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

N". Panjan* +&"m#an* , λ A#s"r#ansi ,nm

+. 4 $38

5. 45 $;;

. 44 $74

4. 4- $+3

3. 48 $++5

-. 3 $+-

;. 35 $8;

8. 34 $-;+

7. 3- $48+. 38 $-

++. - $+8



%$& Penentuan Kurva Standar dan Penentuan Kurva Konsentrasi Ion Fe3+ Pada

panjang gelombang maksimum !" nm

V% ,L M% ,ppm V( ,L M( ,ppm A#s"r#ansi

+ $53

$3 + $53 $5 $-5

$+ + $53 $4 $8+

$+3 + $53 $- $++3

$5 + $53 $8 $44

$53 + $53 + $7

<ari kurva kalibrasi diatas$ dapat ditentukan nilai a dan b

% bD > a

% $4-4 D E $5+4

*aka: b $4-4

a !$5+4



%$ Penentuan konsentrasi dalam sampel 'Fe3+ $

D+ :4-4$.

).5+4$.(. −−

D+ :4-4$.

.5+4$.

D+ $-5

D5 :4-4$.

).5+4$.(.-5$. −−

D5 :4-4$.

.8:4$.

D5 $54

D :4-4$.

).5+4$.(.8+$. −−

D :4-4$.

+.54$.

D $57

D4 :4-4$.

).5+4$.(++3$. −−

D4 :4-4$.

+:-4$.

D4 $7

D3 :4-4$.

).5+4$.(:44$. −−

D3 :4-4$.

:-34$.

D3 +$3

D- :4-4$.

).5+4$.(:.7$. −−

D- :4-4$.

::.4$.

D- $73

D



$ (atas )eteksi

C Cb > Sb Cb nilai a pada kurva

Sb + ?

)D(D 5

−

−∑−

Sb

+ ?)D(D)D(D)D(D)D(D)D(D)D(D

5

-

5

3

5

4

5

:

5

5

5

+

−

−+−+−+−+−+−−−−−−−

Sb

+-

)47;$.(.$73)47;$.(+$.3)47;$.(.$:7

)47;$.(.$57)47;$.(.$54)47;$.(.$.-5

555

555

−

−+−+−+

−+−+−

Sb

3

(.$43:)(.$33:)(.$+.;)

(!.$5.;)(!.$53;))4:3$.(

555

555

+++

++−

Sb

3

5.35.7$.:.38.7$..++447$.

.45847$..--.47$.$+8753.(

++

+++

Sb 3

85.-+3$.

Sb +-4+5:$.

Sb $43

% !$5+4 > ($43)

+$+7-



*$ Sensitivitas 'kemiringan$

Sensitivitas nilai a pada kurva$ %aitu !$5+4

(. Pm#a'asan

#ada penentuan spektrum absorpsi dan pembuatan kurva standar pada analisis

Spektrofotometer v!"is$ selalu memakai metode relatif %ang biasan%a disebut

dengan standar. ,ita harus mempun%ai standar$ ,arena bekerja dengan menggunakan

instrumen harus ada standarn%a. Standar %ang dimaksud disini %aitu pada panjang

gelombang berapa kita harus bekerja. ntuk mengetahui itu semua$ kita

menggunakan larutan standar %aitu /e> %ang konsentrasin%a + ppm. &arutan /e> ini

akan ditambahkan dengan 1?2 4 * dan ?14S0? + *. <ari masing!masing larutan

ini diambil 3 m& /e

>

$ 5 m& 1?2 dan 8 m& ?14S0?. #enambahan 1?2 disini

berfungsi untuk mengikat logam besi$ sedangkan penambahan ?14S0? berfungsi

untuk membentuk kompleks pada larutan tersebut. Setelah larutan tersebut

bercampur$ larutan tersebut berubah warna menjadi kuning kemerah!merahan. Farna

tersebut merupakan warna dari kompleks /e(?14)5(S24)5. &arutan tersebut kita ukur

dengan spektrofotometer v!"is sehingga didapatkan absorpsi %ang maksimum$

%aitu pada panjang gelombang 48 nm. =unan%a kita perlu mengetahui panjang

gelombang %ang absorbann%a maksimum$ %aitu untuk mencari panjang gelombang



maksimum agar metode %ang kita gunakan sensitif sehingga dapat memberikan

respon %ang paling tinggi sehingga %ang berada dibawah standar dapat terukur.

#ada pembuatan kurva standar dan penentuan konsentrasi sampel (/e>)

terlebih dahulu kita mencari absorbansi sampel (/e>) pada panjag gelombang 48 nm

dengan konsentrasi %ang sudah ditentukan %akni ppmB $5 ppmB $4 ppmB $- ppmB

$8 ppmB dan + ppm. Setelah mengetahui absorbansi sampel dengan konsentrasin

%ang berbeda!beda$ kita membuat kurva standarGkurva kalibrasi %ang diperoleh

setelah mengukur absorbans dari sederetan konsentrasi larutan sampel tersebut. <ari

kurva kalibrasi %ang dibuat$ didapatkan persamaan regresinn%a %aitu % $4-4 D E

$5+4. dimana % disini adalah absorbansi$ dan D adalah konsentrasi. Angka $4-4

menunjukkan kemiringan. <ari persamaan regresi diatas$ kita dapat menentukan

konsentrasi rata!rata %aitu ....... ppm.

". Simpulan

+. penentuan panjang gelombang maksimum /e ditentukan dengan mengukur

absorbansi makksimum dari larutan kompleks besi dengan interval panjang

gelombang %ang digunakan 5 nm$ sehingga diperoleh serapan maksimum

larutan besi (/e) pada daerah panjang gelombang 48 nm. Sedang pembuatan

kurfa standarn%a standar /e dibuat dengan mengukur absorbansi larutan /e

dengan variasi konsentrasi$....$....$....$.....$ ppm pada gelombang kerja 48 nm.



DAFTAR PUSTAKA

Anwar. 5;. ara,ara -ptik dalam .nalisis Kimia. T'. 'andung

lap_analisis instrument ii

Documents