12/20/2011

1

Antiseptik kulitTangan dengan sabun

Lengan tanpaperlakuan Lengan denganperlakuan pemberian

povidon iodine danalkohol 70%

Tangan tanpaperlakuan

Morfologi koloni bakteri Koloni halus

E.coli Vibrio sp. Staphylococcus sp. Salmonela sp. Shigella sp.

Koloni kasar : Bacillus subtilis Koloni menyebar : Proteus sp. Koloni webbing : Bacillus mycoides Koloni mukoid : Klebsiella sp.

12/20/2011

2

1. Staphylococcusepidermidis

2. Staphylococcus citreus3. Staphylococcus aureus4. Serratia marcescens5. Chromobacterium

violaceum6. Pseudomonas aeruginosa

1 2 3 4 5 6

Koloni yang berpigmentasi

Pewarnaan gram:Gram positif

streptococci dalam rantai pendek

Streptococcus sp.

12/20/2011

3

5

Alpha-haemolytic StreptococciKoloni dikelilingi oleh area dimana terjadi hemolisis parsialdan warna hijau kecoklatan (hemoglobin yang tereduksi)

Sangat umum pada kulit dan sitem integumen, berperansebagai flora normal, S.viridans

Tidak dipengaruhi oleh lempeng / tablet optochin

6

Streptococcus pneumoniae (Pneumococcus)Tes optosin (ethyl hydrocupreine) merupakan tespresumptif (dugaan) utk mengidentifikasi S.pneumoniaeyang tidak resisten terhadap optosin, sebuah wilayahhambatan akan terbentuk disekitar lempeng dimanabakteri telah lisis

Koloninya sensitif terhadap 10 g optochin Zona ini biasanya >14mm

12/20/2011

4

7

Beta-haemolytic Streptococci (1)

Kolonisasi dikelilingi oleh wilayah dimana hemolisis sempurna dengandekolorisasi hemoglobinGrup A adalah - haemolytic Streptococci yang dikenal sebagaiS.pyogenes yang sensitif terhadap lampeng/tablet basitrasin,sehingga area hambtan akan terbentuk di sekitar lempeng

8

Beta-haemolytic Streptococci (2)konfirmasi serologik masing2 kelompok diperoleh denganmenggunakan antiserum spesifik : grup -hemolyticstreptococci lancefield

12/20/2011

5

9

Beta-haemolytic Streptococci (3)pengelompokkan berdasarkan antigen karbohidratpermukaan

Streptococcus pyogenesGroup-A

Streptococcus -haemolyticNon Group-A

10

Staphylococcus aureus

Pewarnaan Gram:Kokus gram positif dengan ukuran seragam, yangsecara khusus dalam kelompok tetapi juga dapat

berbentuk tunggal dan berpasangan

12/20/2011

6

11

Staphylococcus aureusMenghasilkan warna kuning hingga krim atauterkadang putih pada agar darah

12

Staphylococcus epidermidisKoloni biasanya bersifat non-haemolytic

12/20/2011

7

13

Mannitol Salt Agar (MSA) (1)MSA adalah medium indikator yang selektif, mengandung1%mannitol, 7,5% NaCl dan 0,0025% fenol merah dalamagar nutrien

14

Mannitol Salt Agar (MSA) (2)Sebagian besar strain S.aureus menfermentasikan mannitoldan terbentuk koloni yang dikelilingi oleh zona kuningkarena produksi asam, sementara staphylococcus laingagal menfermentasikan manitol dan terbentuk kolonidengan zona merah atau ungu

12/20/2011

8

MRSA u/ mengenali staphylococci yang resistenterhadap metisilin, tes lempeng cefoxitin lebihdigunakan dalam mendeteksi resistensidibandingkan penggunaan lempeng metisilin,oxasilin, atau nafsilin

Lempeng cefoxitin 30 g harus digunakanuntuk mengetes resistensi metisilin/oxasilin

Area batasan lempeng cefoxitin terbentuksetelah inkubasi semalaman

Tes katalase Tes ini digunakan untuk membedakan bakteri-bakteri yang memproduksi enzim katalase,seperti Staphylococci, dari bakteri streptococciyang tidak memproduksi katalase

Prinsip :katalase berperan sebagai katalisator yangmemecah hidrogen peroksida menjadi air danoksigen

12/20/2011

9

Tes katalase Organisme yg dites untuk menilai produksi katalase dengan

memasukkannya ke dalam hidrogen peroksida (3% H2O2).Gelembung oksigen dihasilkan jika organisme merupakanpenghasil katalase.

Kultur tidak boleh lebih dari 24 jamStaphylococcus sp.Catalase positive

Streptococcus sp.Catalase negative

Tes koagulase untuk Staphylococci (1) Tes ini digunakan untuk membedakan Staphylococcus

aureus yang memproduksi enzim koagulase dariStaphylococcus epidermidis dan Staphylococcussaphrophyticus yang tidak memproduksi koagulase

Prinsip : Strain S.aureus yang memproduksi koagulase membentuk

gumpalan ketika tumbuh di dalam plasma. Koagulasebebas mengubah plasma sitrat menjadi gel yang keras danikatan koagulase (faktor penggumpal) yangmengaglutinisasi kokus

Koagulase bebas dideteksi dengan hadirnya gumpalanfibrin dalam tabung tes

12/20/2011

10

19

Coagulase Test for Staphylococci (2)Staphylococcus aureusCoagulase positive

Staphylococcus epidermidisCoagulase negative

20

Coagulase Test for Staphylococci (3)

12/20/2011

11

Kerentanan terhadap antibiotik Metode langsung mengukur aktivitas satuatau lebih agen antimikrobial melawan bakteriyang diisolasi

Metode mendeteksi kehadiran mekanismeresistensi spesifik dalam isolasi bakteri

Metode khusus mengukur interaksiantimikroba-organisme yg kompleks

CLSI : komponen yang distandarisasi dandikontrol :

Ukuran inokulum bakterial Medium pertumbuhan (lebih seringmenggunakan basis Mueller-Hinton)

pH, konsentras kation, darah dan serumsupplemen, thymidine content Lingkungan inkubasi Suhu inkubasi Lama inkubasi Konsentrasi antimikroba yang diuji

12/20/2011

12

Inokulasi dan inkubasi Inokulasi menggunakan kapas usap yang telahdimasukkan ke dalam suspensi bakterial (0,5Mc Farland = 1,5 x 108 CFU/ml)

Dalam 15 menit inokulasi, lempeng diletakkandan wadah dibalikkan utk inkubasi utkmenghindarkan jumlah kelembaban

Utk kebanyakan MH, inkubasi pada suhu 35oCdalam udara, CO2 utk bakteri tertentu

Masa inkubasi : 18-24 jam

Dispenser disc

12/20/2011

13

Reading the results NCCLS

Mueller Hinton Agar

Blood Agar

26.Membaca dan menginterpretasikanhasil

piring diperiksa :- untuk mengkonfirmasi bahwa sebuah halaman konfluen(=a confluent lawn?) dari pertumbuhan yang bagus telahdiperoleh (kyak ni gak bisa diterjemahin deh.. :p)- untuk kemurnian

gunakan latar belakang gelap dan cahaya yang dipantulkan,piring terletak sedemikian rupa sehingga penggaris (ruler)atau caliper dapat digunakan untuk mengukur diameterzona inhibisi Swarming(=dipenuhi?) organisms : the swarming haze(=kabut?) diabaikan dan zona diukur pada titik di manapertumbuhan terhambat jelas

12/20/2011

14

27.Definisi Kategori InterpretasiKerentanan Pengujian (CLSI)

Susceptible (rentan)Agen antimikroba mungkin merupakanpilihan yang tepat untuk mengobatiinfeksi yang disebabkan oleh bakteriisolasi yg diuji

28Intermediate, kemungkinan: Utilitas potensial dari agen antimikroba di situstubuh dimana ia mungkin terkonsentrasi (misalnyaInfeksi Sluran Kemih) atau jika digunakan obat dgnkonsentrasi tinggi. Agen (antimikroba) mungkin masih efektif terhadapbakteri isolasi yg diuji tapi mungkin kurangdibandingkan bakteri yg sudah rentan. Sebagai margin keamanan interpretatif untukmencegah perubahan yang relatif kecil dari hasil tesdari yang mengarah ke perubahan besar dalamkategori interpretatif.

12/20/2011

15

29 Resisten:Antimikroba mungkin bukan pilihan yangtepat untuk mengobati infeksi yangdisebabkan oleh bakteri isolasi yang diuji, baikkarena organisme tidak dihambat oleh serum-level yg dicapai obat atau karena hasil tes yangsangat berkorelasi dengan mekanismeresistensi yang membuat keberhasilanpengobatan diragukan

30

30. Mycobacterium tuberculosisMicroscopy :Tidak berspora, tidak-berkapsul, lurus atausedikit melengkung,batangOrganismemempertahankan warnamerah dn merupakanAcid Fast Bacteria(AFB)

12/20/2011

16

31

Medium Lowenstein-Jensen

Digunakan untukpertumbuhanMycobacterium

tuberculosis di dalambotol

Mc-cartney

32

Mycobacterium tuberculocisDi Lowenstein-Jensen Agar

M. tuberculosismemproduksi koloniyang terangkat ,kering, krim yang

berwarna kuning tua

12/20/2011

17

33

Mycobacterium leprae

Microscopy :Basil merah padat atauembun-embun (manik-manik) , terfragmentasi,bentuk granular, terjadisendiri atau di massaglobi (AFB)

Candida albicansdi Sabourauds agar

Morfologi Koloni:Koloni bertumbuh cepat, halus, lunak(lembut), berkilau, danmemiliki warna yang lembut, disertai bau ragi / jamur yang

khas

12/20/2011

18

Candida albicansdengan pewarnaan gram

Karakteristik mikroskopik : Sel-sel Jamur Gram positif; 4-6 m, berdinding tipis ,selnya oval Direproduksi oleh tunas

Candida albicansDengan pewarnaan Lactophenol cotton Blue (LPCB

Karakteristik mikroskop : Sel-sel jamur, Blastospora yang memiliki spora yangtebal Sel tunas ( sel budding)

Blastospora

12/20/2011

19

Aspergillus sp.di Sabourauds agar

Morfologi koloni:Koloni mempunyai penampilan yang kabur atau berbulu yang mana

adalah miselium.

Microsporum gypseum

Macroconidia

Microconidia

Karakteristik/ciri mikroskopik:Macroconidia berlimpah, berbentuk gelendong dengan ujung bulat (tidak runcing

seperti pada M. canis); Dinding cukup tebal, echinulate, terdiri dari 4-6 sel Microconidia yang berkelompok dan biasanya sesil (melekat pada dasar/sebagai

lawan dari menggantung atau bertangkai) di sepanjang hifa

12/20/2011

20

Microsporum canis

Microconidia

Macroconidia dengan ujung melengkungatau bengkok

Karakteristik/ciri mikroskopis:Macroconidia berlimpah, besar, terdiri dari 6-15 sel, berbentukgelendong/spindel, dengan ujung melengkung atau bengkok dan dindingtebal dan kasar (verrucose)Microconidia yang jarang, berbentuk club, berdinding halus dan biasanyasesil di sepanjang hifa

Trichophyton mentagrophytes

Macroconidia

Microconidia

Hifa spiral yangmelingkar

Karakteristik/ciri Mikroskopis :

Macroconidia adalah berbentukseperti cerutu dan berdinding tipis,memiliki keterikatan yang sempitdengan hifa, dan mengandung 1-6 sel

Microconidia dalam kultur tepungsangat bulat dan berkerumun dicabang, konidiofor atau, dalam strainbulu, lebih kecil, lebih sedikitjumlahnya, dan berbentuk air mata

Hifa spiral yang melingkar seringterlihat

12/20/2011

21

Epidermophyton floccosum

Karakteristik/ciri Mikroskopis :Macroconidia yang halus, tipis-sampai sedikit berdinding tebal, danberbentuk seperti pemukul/pentungan dengan ujung bundar, berisi 2-6 sel,dan ditemukan sendiri-sendiri atau dalam kelompok.Tidak ada Microconidia yang diproduksiHifa bersepta (memiliki sekat-sekat pemisah)

Macroconidia

Trichophyton rubrum

Karakteristik/ciri Mikroskopis :

Macroconidia sempit danberdinding tipis, dengan sisi yangparalel dan 4-10 sel. Merekamungkin berlimpah, langka atautidak ada

Microconidia yang berbentuk airmata sangat tipis, langka,berkelompok dan biasanyaterbentuk sendiri sepanjang sisi hifa

Hifa bersepta

Macroconidia

Microconidia

12/20/2011

22

Malassezia furfur

Pemeriksaan mikroskopis langsung:kelupasan/kerokan kulit menunjukkan bentuk bulat, tunas sel-sel ragi berdiameter

sampai 8 m, bersama dengan fragmen hifa yang kadang-kadang bercabang denganpanjang bervariasi.

Pemeriksaan langsung dengan mengerok kulit yang terinfeksi, kalium hidroksida 10-20%