biokimia asam amino dan protein

7/23/2019 BIOKIMIA ASAM AMINO DAN PROTEIN

1/30

PERCOBAAN 3

Asam amino dan Protein


2/30

Tujuan

1. Membuktikan adanya ikatan peptida

2. Memahami reaksi xantoproteat dan uji biuretterhadap bermacam-macam kandungan dariprotein

3. Memahami kelarutan dan sifat amfoter dari

asam amino


3/30

Landasan TeoriAsam amino adalah sembarang senyawa organik yangmemiliki gugus fungsional karboksil (-COOH) dan

amina (basanya -NH2). Dalam biokimia seringkali

pengeriannnya dipersempi yang keduanya erika pada

sau aom karbon (C) yang sama (disebu aom C alfa).

(!oed"iadi# $%%&)

Asam amino merupakan sauan yang menyusunpepida dan proein. Dari demikian banyak ragam

srukur yang dapa di"umpai# hanya 2' asam amino sa"a

yang pening dalam proein (!ine e al# $%)


4/30

Asam amino yang diperoleh dari hidrolisis

proein adalah asam amino. arinya# gugus aminoberbeda pada aom karbon # yaiu di sebelah gugus

karboksil. Asam amino dikenal dengan nama umum.

*asing-masing memiliki singkaan iga-huruf

berdasarkan namanya# yang digunakan bila kiamenulis rumus pepide# dan singkaan sau-huruf

yang digunakan unuk men"elaskan uruan asam

amino dalam suau proein (Har e al.# 2''+)


5/30

Alat dan Bahan

,ahan

1. Asam Nitrat pekat

2. Asam aspartat3. ar. !u"#$$. ar. Na#%

&. 'asein

(. )rea*. Albumin

+. ,lisin

. AgN#31.%g!l211./bi

12.'acang 0anah


6/30

Cara Kerja*emanaskan '. gram

urea dalam abung

reaksi hingga imbul

padaan dan

mendinginkannya

dalam + ml a/uades dan

menyaringnya

*enambahkan 0ilra

urea# 1asein air# laruansampel daging sapi

dengan $ml NaOH dan +

ees !u"#$

Diamaiapa yang

er"adi3

A. 456 ,64789


7/30

HNO+peka

!anaskan

: NaOH

8kses

Diamai

ees

Cara Kerja,. 456 ;AN9O!7O98A9


8/30

AgNO

+

9ees demi ees

Diamai

Albumin $ ml

=ampel daging

=api $ ml

Cara KerjaC. 4"i !engendapan dengan 6on >ogam ,era


9/30

HgCl2

9ees demi ees

Diamai

Albumin $ ml

=ampel daging

=api $ ml

Cara KerjaC. 4"i !engendapan dengan 6on >ogam ,era


10/30

DATA PENGAMATAN


11/30

UJI BIURET

No

.

Sampel Reagen Pengamatan Ket Gambar

$. 4rea NaOH :Cu=O&

dikook,iru birukeunguan

:

2. 1aseinCair

NaOH :Cu=O&

!uih keruh keunguan:


12/30

+. =ampeldaging sapi

NaOH :Cu=O&

1uning keruh adaendapan ungu +


13/30

Uji Xantoroteat

No

.


$. aruan yang awalnyabening diambahkanHNO+ p.a kemudian

dipanaskan endapanhilang

9erdapa endapan puihpada dasar abung danwarna laruan bening

-

2. 1asein HNO+ :dipanaskan: NaOHekses

!uih

kuning

9erdapa 2 lapisanlaruan warna pada dasarabung berwarna kuningmuda keruh# diaasnya

kuning peka.


14/30

+. AsamAspara

HNO+ :

dipanaskan

: NaOHekses

9idak ada perubahanwarna eap bening#erdapa gelembunglonaan gas9eap bening

-

&. =ampeldaging sapi

HNO+ :

dipanaskan

: NaOHekses

1uning ada 2 lapiswarna pada bagian bawah

bening# diaasnya kuningkeruh.9erdapa + lapis warnapada bg.bawah bening#diaasnya kuning# dandiaasnya kuning peka

:


15/30

LO!A#No

.


1. Albumin AgN#3 Mula-mula

bening

kemudian ada

endapan putih

keruh

2. Albumin %g!2 ening agakkeruh


16/30

3. "ampel

daging

sapi

AgN#3 'uninglebih

bening ada

endapan

+

$. "ampel

daging

sapi

%g!2 'uning

sedikit bening

ada endapan


17/30

Pem$ahasan

Uji Biuret

Rea%en $iuret ini di%una&an untu& men%uji

adan'a i&atan etida ada samel uji( Uji inimen%%una&an larutan NAO) dan Cu*O+se$a%ai

rea%en( Adan'a i&atan etida ,rea&si ositi-.ditunju&&an den%an eru$ahan /arna larutan'an% semula $enin% menjadi /arna un%u(

Penam$ahan NaO) ada larutan roteinterse$ut 'aitu se$a%ai &atalis 'an% $er-un%siuntu& men%han0ur&an atau meme0ah&anrotein(


18/30

Reaksi pada reagen biuret


19/30

Struktur asam aminodalam uji biuret

478A


20/30

Rea&si ositi- terjadi ada semua samel( Untu& samel urea$u&an merua&an rotein1 namun &arena urea men%andun%%u%us 2N),amin. 'an% memun'ai &esamaan den%an %u%us

rotein sehin%%a mem$entu& /arna un%u se$a%ai hasil re&siantara Cu4 den%an 5N)1 dimana ion Cu oleh &arena itu ureamem$eri&an hasil ositi- ada uji $iuret( Pada emanasan ureater$entu& %elem$un% %as dan men%eluar&an $au amonia 'an%san%at men'en%at( mole&ul urea ada suhu tin%%i$er%a$un% atau $erolimerisasi mem$entu& sen'a/a $iuret(

Pada &asein 0air dan da%in% sai terjadi eru$ahan /arna dariutih &eruh menjadi utih &eruh &eun%uan( )al inimenunju&&an adan'a rea&si antara ion Cudan i&atan etidadalam larutan

Intensitas /arna un%u ada masin%2masin% ta$un% $er$eda1dimana intensitas /arna 'an% le$ih tin%%i menunju&&an i&atanetida dalam rotein le$ih $an'a&(


21/30

I&atan etida merua&an i&atan 'an% ter$entu&&eti&a atom &ar$on dari %u%us &ar$o&sil suatu

mole&ul $eri&atan den%an atom nitro%en dari %u%usamina mole&ul lain( Rea&si terse$ut mela&u&anmole&ul air sehin%%a dise$ut rea&si &ondensasi(


22/30

4"i ;anoproea

!rinsip dari u"i ini yaiu nirasi ini ben?ene oleh asam nira

peka# sehingga menghasilkan reaksi berwarna kuning dan "uga

orange seelah penambahan alkali.

7eaksi @anoproea ini posiif unuk proein yang mengandung

irosin# fenil alanin dan ripofan. 1arena bersifa aromaik dan

keika direaksikan dengan asam nira peka# inin aromaik

akan menghasilkan senyawa niro yang berwarna kuning dalam

suasana basa (membenuk ini ben?ene).


23/30

Struktur

Asam Amino

Pada

Xantoproteat

Asam Aspara


24/30

Reaksi yang terjadi

7eaksi posiif diun"ukkan oleh kasein# dan sampel

daging. Dari hasil pengamaan ersebu

mengidenifikasikan adanya gugus aromaik pada

srukur molekul kasein# dan sampel dagingmengandung nirofenil.


25/30

!roein yang mengandung asama amino# "ika diambahkan

asam nira peka akan mengendap dengan endapan berwarnapuih yang dapa berubah men"adi kuning sewaku dipanaskan.

=enyawa niro yang erbenuk dalam suasana basa (adanya

penambahan NaOH) akan erionisasi dan warnanya akan

berubah men"adi lebih ua aau "ingga.


26/30

Uji Pen%endaan den%an Ion Lo%am Berat

Per0o$aan ini dima&sud&an untu&

men%identi6&asi rotein $erdasar&an si-at roteinterhada lo%am $erat( Pada er0o$aan ini rea%en'an% di%una&an adalah A%NO3dan )%Cl(


27/30

Dasar reaksi pengendapan oleh logam bera adalah

peneralan muaan. !engendapan dapa er"adi apabila proeinberada dalam benuk isoelekrik yang bermuaan negaif.

Dengan adanya muaan posiif dari logam bera akan er"adi

reaksi neralisasi dari proein dan !ada semua sampel

erbenuk endapan puih yang menun"ukkan bahwa laruan

posif membenuk endapan logam proeina. 6kaan yang

erbenuk ama kua dan akan memuuskan "embaan garam#

sehingga proein mengalami denaurasi.


28/30

5umlah endapan yang erbenuk dipengaruhi oleh kereakifan logam

bera yang diambahkan. 7eaksi anara logam bera dengan proein

menyebabkan puusnya ranai samping pada proein sehinggaproein idak akif. 8ndapan puih yang dihasilkan merupakan hasil

dari reaksi peneralan anara ion logam sebagai kaion dengan

molekul-molekul proein sebagai anion# dihasilkan garam neral

yang mengendap. anion-anion dari AgNO+ dan HgCl2 akan

menyebabkan suasana laruan men"adi sediki asam# sehingga

proein akan mengkondisikan diri sebagai basa dan sebagian

erdapa sebagai anion. Anion dari proein inilah yang bereaksi

dengan ion logam bera membenuk garam proeina yang idak

laru dalam air.


29/30

*imulan

"ari hasil er0o$aan uji &ar$ohidrat daatdisimul&an7

8( Rea&si ositi- uji adan'a i&atan etida adasamel1 terjadi /arna un%u 'an% tama& setlahsamel direa&si&an den%an NaO) dan Cu*O+(

( Rea&si 'an% terjadi ada 9antoroteat adalahnitrasi ada inti $en:ene 'an% terdaat ada

mole&ul rotein( *edan%&an rea&si uji $iuretditandai den%an ter$entu&n'a &omle&s un%u&arena teri&atn'a asam amino den%an asamamino 'an% lain oleh Cu4


30/30

"A;TAR PU*TAKA0essenden. $%%.Kimia Organik Ke-3. 5akara 8rlangga

>ehninger. $%2.Dasar-Dasar Biokimia Jilid I. 5akara 8rlangga!oed"adi# A. $%%&.Dasar-Dasar Biokimia.5akara !enerbi 46

!ress.

=oeharsono. $%%&.Biokimia Jilid I. ogyakara

biokimia asam amino dan protein

Documents