haemophilia journal reading sekar pratiwi

7/23/2019 haemophilia Journal reading Sekar Pratiwi

http://slidepdf.com/reader/full/haemophilia-journal-reading-sekar-pratiwi 1/17

Asal Mutasi pada Kasus Sporadik Haemophilia Adisadur dari jurnal : Origin of mutation in sporadic cases of haemophilia A.

Oleh Rolf C. R. Ljung dan Elsy Sjoè Rin.Departments of aediatrics and Coagulation Disorders!

"ni#ersity of Lund! "ni#ersity $ospital! %almo&! S'eden.Dalam (ritish )ournal of $aematology! *+++! *,-! /,0/1

Disadur oleh : Sekar Pratiwi 160421140009

Pembimbing : DR !riska Ri"anti# Drg# S$ %&'

PPD&S (%&' )ni*ersitasPadjadjaran 2014



Abstr

ak

+ujuan : menemukan asal mutasi $ada

kasus s$oradis hemo,lia ' berat

Penelitian $ada -1 keluarga dengankasus s$oradis hemo,lia ' berat di

Pusat hemo,lia .almoe

Dari 29 $robands # / arrier mutasi deno*o# sedangkan ibu $roband ituditemukan sebagai arrier mutasi

membawa mutasi di 21 keluargaDari 21 ibu carrier # 16 memiliki mutaside no*o




Hemoflia A

• Disebabkan oleh kekurangan atau kelainanungsional aktor koagulasi ((( 3(((5

• Seara klinis digolongkan ke dalam kelom$ok :

berat 3 ((( 7 1 8 dari normal5

sedang 3 ((( 1 4 8 5 ringan 3 ((( 2 8 5

• &en aktor ((( adalah salah 1 gen manusia "angberukuran besar# terda$at $ada $ita ;<2/ $ada

akhir telomeri lengan $anjang dari kromosom ;#memiliki 26 ekson "ang mengcoding $roteinuntuk ((( "ang terdiri dari 2--2 asam amino




• 608 dari kasus baru di Swedia$robandn"a adalah satu=satun"a "angterkena kelainan dalam keluarga

S$ora

diase

(bu $roband non arrier

(bu $robandarrier dengan

orang tua genoti$ normal

(bu arrier "g mewarisi mutasidari ibun"a 3nenek $roband5




• 'ntonarakis et al 31995 : $ada 968 kasuss$oradis# ibu $roband juga seorang arriergen "ang mengalami in*ersi

• >eker et al 319965 : /28 dari ibu $adakasus s$oradis adalah arrier

• Pada $enelitian ini# $eneliti menemukansebagian besar $roband kasus s$oradismengalami mutasi de no*o# bahkan dalamkeluarga dengan in*ersi




Bahan dan metode

• Sub"ek $enelitian terdiri dari -1 keluargaSwedia dengan kasus s$oradis hemo,lia 'berat# dengan ibu# dan bila tersedia#

kakek=nenek dari keluarga ibu $ada kasusindeks

• Sub"ek terdiri dari semua keluarga dengankasus s$oradis hemo,lia berat "ang

terdatar di Pusat ?emo,lia .almoe




Pengumpulan sampel darah

• Plasma "ang telah disitrasi disim$an $adasuhu @0oA sam$ai di$eriksa

• Darah "ang telah diberi antikoagulan !D+'

segera diekstraksi untuk menda$atkanRB' dan DB' atau disim$an di suhu 40oAsam$ai di$erlukan




@ mg DB' dierna dengan 0unit >l( semalam $ada suhu

0oA # dan dielektrooresis $ada0# 8 agarose gel $ada 40

selama 22=24 jam

&el kemudian didepurinated

selama 1 menit dengan 0#2 .?Al # didenaturasi $ada 0#4 .BaO? selama 2 jam 1 menit

dan

dia$us ke ,lter ?"bond BC

3'mersham5 menggunakan tinta*akum 3?"baid5 dan 0#4 . BaO?selama 1 jam # kemudian diuidengan 0# . +ris # $? @#2 # 1#

. BaAl dan 6SSA

ilter "ang di prehy2ridi3ed selama 4 jam# dihibridisasi

semalam $ada suhu 6oA dalam

larutan Denhardt itu dengan 0#9kb !oR( E Sa( ragmen dari

$lasmid $4/26 "ang digunakansebagai $robe

diberi radiolabelled dengan-2

Pmenggunakan heamers aak3'$$ligene5

ilter diui di SSA E 0#1 8 SDS

di 6o

A selama -0 menit#kemudian di 2 SSA E 0#1 8 SDSdi 6oA selama 2-0 menit # dan

akhirn"a di 1 SSA E 0#1 8 SDS di6oA selama -0 menit




Analisis mutasi

•%arakterisasi mutasi dalam keluarga tan$a in*ersiterjadi baik oleh direct se4uencing DB' genomikatau setelah screening segmen DB' dasarn"a

• .enggunakan $rimer oligonukleotida=(((

tertentu# dida$at DB' dalam em$at segmen• Segmen DB' diam$li,kasi oleh dua PAR

berturut=turut menggunakan dua set $rimer dandisaring untuk mutasi dengan metode deteksiam$li,kasi mismath 3'.D5

• Se<uening regio DB' dengan mismath "angtelah diidenti,kasi dilakukan denganmenggunakan metode dideoksi dimodi,kasi

• %arakter mutasi dikonrimasi $ada DB' genomPPD&S (%&' )ni*ersitas

Padjadjaran 2014



Hasil

• Fenis mutasi ditemukan dalam sub"ek seara keseluruhan 3 nG -1 5 (n*ersi Gsu2stantial rearrangement $ada lengan $anjang kromosom ; 'da bagian darikromosom ; "g terbalik# dengan satu break $oint $ada intron 22 dari gen ((( dan"ang lainn"a di salah satu dari dua $engulangan 3 ti$e 1 atau 2 5 dari bagian intron22 "ang terletak telomeri $ada gen Fenis -' mengau $ada break $oint lainn"a




Pedigree keluarga dengan kasus s$oradis hemo,lia ' .utasi # A 106- + #dibawa oleh $ro$ositus dan ibun"a %akek dan nenek maternal bukan carriermutasi 'nalisis segregasi RHP 3(cl * restriction site 5 menunjukkan bahwamutasi $ada ibu dibawa di kromosom ; "ang berasal dari a"ahn"a "angsehat 30#9 alel berasal dari a"ahn"a dan 1#2 dari ibun"a I $ro$ositus "angmembawa 0#9 alel5




• Dari 29 $robands # / 3 2@ 8 5 membawa mutasi de no*osedangkan ibu $roband ditemukan sebagai $embawamutasi dalam 21 dari 29 keluarga

• Dari 21 ibu arrier# 16 memiliki mutasi de no*o 3"aitu

kakek "ang $roband dan nenek "ang non = carrier 5# dalamsatu kasus nenek ibu adalah carrier # dan $ada em$at kasus"ang tersisa tidak dida$atkan sam$el dari kakek=nenek

• Pada 1 dari 21 mutasi# siatn"a $aternal# 1 dari 21 kasusbersiat maternal# dan dari 21 kasus tidak inormati

Dalam 2 dari -1 keluarga# mutasi itu tidak ditemukan Ikemungkinann"a tinggi 3 J 100 : 1 5 # berdasarkan tes$embekuan darah# dengan angka 1 mewakili siat$embawaan maternal




29 $roband

21 ibu carrier

16 mutasi deno*o

1 nenekmaternalarrier

4 tidaklengka$ darakakek nenek

/ mutasi de

no*o




21 ibuarrier

1 mutasi$aternal

1 mutasimaternal

tidaklengka$

data




Pembahasan

•

Pro,l mutasi dalam $enelitian ini adalah 4/8in*ersi# 268 delesi $arsial atau keil atauinsersi# 198 point mutation! 68 mutasi tidakdiketahui

•

(n*ersi terjadi lebih sering $ada keluargadengan kasus s$oradis 34/85 dari$ada dikeluarga dengan hemo,lia "g telah dikeehuisebelumn"a3-/85

•

ariasi dalam jenis mutasi antara $enelitian"ang berbeda mungkin karena sam$el bias dan$erbedaan dalam keteram$ilan laboratorium#serta *ariasi etnis




Simpulan

• Penelitian ini menunjukkan tingkat mutasi6 li$at lebih besar $ada laki=laki dari$ada$erem$uan# terle$as dari jenis mutasi

• %eban"aka ibu $ada kasus s$oradis adalahnon5carrier # anak laki=laki merekamembawa distribusi dari berbagai jenismutasi "ang berbeda

• %eban"akan mutasi $ada keluargas$oradis ditemukan telah terjadi dalamdua generasi terakhir


haemophilia journal reading sekar pratiwi

Documents