mikrotom makalah

Upload: dyah-deviyanti

Post on 11-Feb-2018

1.375 views

Category:

Documents


108 download

TRANSCRIPT

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    1/8

    JURUSAN BIOLOGI

    FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

    UNIVERSITAS SRIWIJAYA

    2013

    BAB I

    PENDAHULUAN

    1.1 Latar B!a"a#$

    Mikroteknik merupakan ilmu kajian yang banyak digunakan dalam bidang pendidikan,

    kesehatan dan penelitian. Masing- masing bidang memiliki peranan sesuai dengan hal- hal yang

    dibahas di bidangnya. Pengetahuan dasar mikroteknik diperlukan guna menghasilkan suatu

    kajian- kajian yang bersifat membantu dan mengembangkan keahlian dalam penemuan hal- hal

    penting yang berhubungan dengan peran pendidikan, kesehatan dan penelitian dalam

    pengetahuan histologi.

    mikroteknik yakni teknik pembuatan sediaan atau preparat secara mikroskopis, tentunya

    pendekatan teoritis tidaklah memadai untuk memahami secara menyeluruh mengenai

    mikroteknik, sebab yang namanya teknik lebih menekankan pemahaman pada wilayah

    aplikatifnya meskipun pada dasarnya landasan teoritis juga diperlukan dalam rangka

    memberikan beberapa petunjuk yang harus dilalui agar proses pembuatan sediaan sesuai denganprosedural kerja dan alasan penggunaan ataupun pemilihan bahan yang akan digunakan dalam

    pembuatan sediaan mikroskopis. Penelaahan umumnya dilakukan dengan bantuan mikroskop,

    karena struktur jaringan secara terperinci pada galibnya terlalu kecil untuk dapat dilihat dengan

    mata telanjang. Ruang lingkup yang mencakup materi mikroteknik dapat diperoleh dari sejumlah

    definisi dan peristilahan yang bisa dipakai, hanya saja sebaiknya kita mencamkan dalam pikiran

    kita bahwa suatu spesimen mikroteknik dapat merupakan sebagian atau seluruhan dari struktur

    yang ditetapkan.

    Mikrotom adalah Instrumen Ilmiah yang memotong iris tipis sesuatu untuk pemeriksaan

    mikroskopis. Alat untuk membuat bagian yang sangat tipis untuk pemeriksaan mikroskopis. Alat

    mekanis yang digunakan untuk memotong spesimen biologi menjadi bagian tipis transparan

    untuk pemeriksaan mikroskopis. Mikrotom menggunakan baja, kaca atau berlian pisau

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    2/8

    tergantung pada spesimen yang sedang diiris dan ketebalan yang diinginkan dari bagian yang

    dipotong.

    1.1 R%&%'a# Ma'a!a(

    . Apakah yang dimaksud dengan mikrotom !

    ". Apa saja jenis-jenis mikrotom!#. $agaimana kegunaan dan mekanisme kerja mikrotom !

    1.2 T%)%a# Ma"a!a(

    Makalah ini dibuat bertujuan untuk mengetahui jenis, mekanisme kerja serta kegunaan

    mikrotom.

    1.* Ma#+aat Ma"a!a(

    Makalah ini diharapkan mampu memberikan informasi mengenai mikrotom dan jenisnya.

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    3/8

    BAB II

    PEMBAHASAN

    2.1 P#$rt,a# M,"r-t-&

    Pada awal kemunculan mikroskop cahaya, bagian dari tanaman dan hewan yang secara

    manual disayat dengan menggunakan pisau cukur. %imbul suatu masalah dimana hasil sayatan

    yang dihasilkan sering mendapatkan sayatan yang beragam ketebalannya sehingga mengganggu

    penglihatan di bawah mikroskop. Maka hasil yang didapat juga kurang akurat. &elanjutnya

    masalah ini dapat dipecahkan dengan kehadirannya mikrotom sebagai alat berpresisi tinggi yang

    dapat menyayat jaringan dengan ketebalan yang diatur sesuai dengan keinginan. Perkembangan

    terbaru selanjutnya adalah mikrotom laser, yang memotong denganlaser

    femtoseconddusamping pisau mekanis. Metode ini adalah kontak-bebas dan tidak

    memerlukan teknik persiapan sampel teknik. Mikrotom laser memiliki kemampuan untuk

    mengiris hampir setiap jaringan di tubuh hewan aslinya. %ergantung pada materi yang sedang

    diproses, ketebalan irisan dari ' sampai '' (m.

    Mikrotom adalah mesin untuk mengiris spesimenbiologimenjadi bagian yang sangat

    tipis untuk pemeriksaanmikroskop. $eberapa mikrotom menggunakan pisaubajadan digunakan

    untuk mempersiapkan sayatan jaringan hewanatau tumbuhandalam histologi.

    komponen mikrotom yang paling berperan dalam produksi sayatan yang sempurna adalah

    pisau yang digunakan untuk menyayat. )leh karena itu untuk dapat berkerja optimal maka

    terdapat tipe dan struktur pisau mikrotom pabrikan yang sama dengan pabrikan mikrotom. %iga

    tipe pisau mikrotom, yaitu * Pisau Plane-adge +siple wedge raor*, biasanya digunakan untuk

    senyatan beku dan blok paraffin. "* Pisau bikonkaf +flat or half-groud raor*, digunakan untuk

    senyatan blok celoidin dan plastik. #* Pisau bikonkaf +hollow-groud raor*, digunakan untuk

    menyayat blok paraffin.

    Pemanfaatan mikroteknik dalam bidang penelitian tidaklah asing lagi bagi para ahli- ahli

    yang ingin melakukan suatu percobaan mengenai suatu sel dan jaringan tertentu sesuai tujuan

    dan keperluan yang diharapkan. $ahkan bisa dikatakan menjadi hal yang penting untuk

    memudahkan pengamatan mengenai fungsi fisiologis sel seperti siklus sel, pembelahan sel, dan

    http://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Light_microscope&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhir2i8owmXH74OvnPd9R2OBaKjTsQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Laser_microtome&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhj-09yNaP6Iqm_ZJmQXk3I2YOlRdAhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Femtosecond_laser&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh6fxaCkJanMsqo3M4smqPpFdGdWghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Femtosecond_laser&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh6fxaCkJanMsqo3M4smqPpFdGdWghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Femtosecond_laser&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh6fxaCkJanMsqo3M4smqPpFdGdWghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Femtosecond_laser&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh6fxaCkJanMsqo3M4smqPpFdGdWghttp://id.wikipedia.org/wiki/Biologihttp://id.wikipedia.org/wiki/Biologihttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroskophttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroskophttp://id.wikipedia.org/wiki/Bajahttp://id.wikipedia.org/wiki/Bajahttp://id.wikipedia.org/wiki/Hewanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Tumbuhanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Histologihttp://id.wikipedia.org/wiki/Histologihttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Laser_microtome&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhj-09yNaP6Iqm_ZJmQXk3I2YOlRdAhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Femtosecond_laser&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh6fxaCkJanMsqo3M4smqPpFdGdWghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Femtosecond_laser&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh6fxaCkJanMsqo3M4smqPpFdGdWghttp://id.wikipedia.org/wiki/Biologihttp://id.wikipedia.org/wiki/Mikroskophttp://id.wikipedia.org/wiki/Bajahttp://id.wikipedia.org/wiki/Hewanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Tumbuhanhttp://id.wikipedia.org/wiki/Histologihttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&langpair=en%7Cid&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Light_microscope&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhir2i8owmXH74OvnPd9R2OBaKjTsQ
  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    4/8

    lain- lain.ntuk itu perlu pengetahuan dan keterampilan yang memadai tentang pembuatan

    sediaan histologi.

    ntuk mempelajari sifat- sifat sel dan membedakan sel- sel yang mengalami perlakuan

    atau tidak mengalami perlakuan dalam percobaan tertentu maka sangat diperlukan penelitian

    yang lebih spesifik untuk tujuan diagnose, pewarnaan biologis, dan prosedur pewarnaan di dalam

    hubungannya dengan cahaya mikroskopis yang telah menjadi alat utama dalam pengamatan

    kondisi histologis organ yang diamati yang tentunya telah diambil dan dibuat dalam bentuk

    preparat histologi.

    Sara %&%&/ '%at% &,"r-t-& &&,!", a$,a#a$,a# tr#t,#$ 'a$a, r,"%t

    . &kala pengatur ketebalan sayatan biasanya terdapat di bagian kanan atas badan mikrotom,

    skala ini dapat digeser ke kiri dan ke kanan sesuai dengan ketebalan sayatan yang diinginkan.

    ". Pisau mikrotom, merupaka komponen yang bisa menentukan kualitas sayatan.

    #. Pegangan blok jaringan, merupakan komponen yang menghubungkan mikrotom dengan blok

    jaringan yang hendak disayat.

    /. Pengatur jarak berfungsi untuk mengatur blok jaringan dengan mata pisau.

    2.2 J#,' M,"r-t-&

    0enis mikrotom yang paling umum digunakan adalah1

    M,"r-t-& %tar 4r-tar5 &,r-t-&6

    2isebut juga mikrotom spencer,jenis mikrotom ini paling umum digunakan di

    laboratorium ,tersedia baik untuk sayatan paraffin maupun teknik kriostat.khusus untuk

    keperluan pembuatan sayatan dengan teknik kriostat,mikritom ini dibuat tahan karat.

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    5/8

    M,"r-t-& $'r 4'!,7,#$ &,r-t-&6

    %ersedia baik untuk sayatan nitrroselulose atau palstik.jenis ini bukan selalu merupakan

    alat yang paling praktis,lamnat dan mahal tetapi juga sering tidak bisa menhasilkan sayatan yang

    bagus untuk jaringan keras dan besar,sepeti mata,tulang dan kartilago.

    M,"r-t-& "!,#,' "% 4+r8,#$ &,r-t-&6

    0enis mikrotom ini banyak digunakan di laboratorium klinis untuuk keperluan diagnosis

    yang bersifat segera.mikrotom ini sangat murah dan dibutuhkan untuk berbagai proses yang

    ditujujukan untuk mendiagnosis komponen sel tertentu seperti lemak dan enim.

    M,"r-t-& 'a5ata# %!tra t,,' 4%!trat(,# &,r-t-&6

    Mikrotom ini biasa digunakan untuk menghasilkan sayatan dengan ketebalan 3m +untuk

    mikroskop elektron*,hanya untuk teknik khusus dan sangat jarang ditemukan idalam

    laboratorium dalam praktikum mahasiswa.

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    6/8

    M,"r-t-& a' '!7$

    4anya digunakan untuk teknik teknik tertentu saja dan sangat jarang ditemukan di

    laboratorium praktikum mahasiswa,biasa digunakan untuk menyayat jaringan dengan ukuran

    yang sangat besar seperti otak.

    M,"r-t-& +a%'t

    Instrument ini berukuran kecil sehingga biasa dtiempelkan diatas meja

    praktikum.ketipisan maksimum sayatan yang dihsilkan maksimum "53m.

    M,"r-t-& '&,t( 7a# Far9%(ar

    Instrument ini sering digunakan untuk menyayat jaringan segar +yang tidak difiksasi atau

    dibekukan* dengan tingkat kerusakan struktur halus dan kehilangan akti6itas enimatik yang

    sangat minimal.kisaran ketebalan sayatan yang dapat dihasilkan adalah 5 -"#' 3m dan dengan

    kecepatan antara 5' sampai "'' sayatan permenit.

    Pra:ata# M,"r-t-&

    Mikrotom sebaiknya ditutup dengan plastik, atau dimasukkan ke kotaknya jika tidak sedang

    digunakan. 0angan memindahkan mikrotom dengan cara memegang bagian yang dapat bergerak,

    karena dapat menggangu akurasinya. &ebelum dan sesudah digunakan, sebaiknya mikrotom

    dibersihkan dari serpihan parafin dengan cara melap dengan kain lap yang telah dibasahi dengan

    7ilol. Mikrotom harus selalu diminyaki untuk mencegah keausan dan kemacetan.

    P#$$%#aa# M,"r-t-&

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    7/8

    $eberapa penggunaan mikrotom 1

    . ntuk mikroskop cahaya, material pertama-tama difiksasi dan dibekukan atau dibenamkan

    ke dalam parafin. $agian-bagian setebal # "' mm biasanya diiris dengan pisau baja.

    ". ntuk mikroskop elektron, fiksasi diikuti dengan pembenaman dalam resin seperti Araldine

    , bagian-bagian diiris dengan pisau gelas atau pisau intan ultramikrotom setebal " '' nm.

    2.3 M"a#,'& Kr)a M,"r-t-&

    Proses pemotongan blok preparat dengan menggunakan mikrotom. &ebelum melakukan

    pemotongan serangkaian persiapan yang harus dilakukan adalah 1

    . Persiapan pisau mikrotom Pisau mikrotom harus diasah sebelum dipakai agar jaringan dapat

    dipotong dengan baik dan tidak koyak sehingga didapatkan jaringan yang baik. Pisau mikrotom

    kemudian diletakan pada tempatnya di mikrotom dengan sudut tertentu. Rekatkan blok parafin

    pada holder dengan menggunakan spatula atau scalpel. 8etakkan tempat duduk blok parafin

    beserta blok preparat pada tempatnya pada mikrotom.

    ". Persiapan 9aca )bjek 9aca objek yang akan direkatkan preparat harus telah dicoated +disalut*

    dengan at perekat seperti albumin +putih telur*, gelatin atau tespa #. Persiapan :aterbath atau

    wadah berisi air hangat dengan temperatur #;-/''< /. Persiapan sengkelit atau kuas.

    %ehnik pemotongan parafin yang mengandung preparat adalah sebagai berikut1

    . Rekatkan blok parafin yang mengandung preparat pada tempat duduknya di mikrotom.

    %empat duduk blok parafin beserta blok parafinnya kemudian diletakkan pada pemegangnya

    +holder* pada mikrotom dan dikunci dengan kuat.

    ". 8etak pisau mikrotom pada tempatnya dan atur sudut kemiringannya. $iasanya sudut

    kemiringan berkisar "'-#' derajat.

    #. Atur ketebalan potongan yang diinginkan, biasanya dipakai ketebalan antara 5-; mikrometer.

    /. gerakkan blok preparat ke arah pisau sedekat mungkin dan potonglah blok preparat secara

    teratur dan ritmis. $uang pita-pita parafin yang awal tanpa jaringan hingga kita mendapatkan

    potongan yang mengandung preparat jaringan.

    5. Pita parafin yang mengandung jaringan lalu dipindahkan secara hati-hati menggunakan

    sengkelit atau kuas kedalam waterbath yang temperaturnya diatur #;-/'< dan biarkan beberapa

    saat hingga poita parafin tersebut mengembang.

  • 7/23/2019 Mikrotom makalah

    8/8

    =. &etelah pita parafin terkembang dengan baik, tempelkan pita parafin tersebut pada kaca objek

    yang telah dicoated dengan cara memasukkan kaca objek itu kedalam waterbath dan

    menggerakkannya ke arah pita parafin. 2engan menggunakan sengkelit atau kuas pita parafin

    ditempelkan pada kaca objek. &etelah melekat kaca objek digerakkan keluar dari waterbath

    dengan hati-hati agar pita parafin tidak melipat.

    ;. 8etakkan kaca objek yang berisi pita parafin di atas hotplate dengan temperatur /'-/5