angka lempeng total1.docx

7/25/2019 angka lempeng total1.docx

1/25

LAPORAN PRAKTIKUM BAKTERIOLOGI

PEMERIKSAAN TOTAL PLATE COUNT (TPC)..

Disusun oleh :

A.A. Au Ti!"#$#!#

NIM P%&'%'*%*&

Se$es"e! III

Dis#$+#i,#n ,e+#-# :

Dosen Pe$i$in/ P!#,"i,u$ B#,"e!iolo/i

KEMENTERIAN KESE0ATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESE0ATAN DENPASAR

DIII 1URUSAN ANALIS KESE0ATAN

*%'

Pemeriksaan angka kuman pada tahu| 1


2/25

BAB I

PENDA0ULUAN

'.' L#"#! Bel#,#n/

Bahan makanan, selain merupakan sumber gizi bagi manusia, juga merupakan

sumber makanan bagi mikroorganisme.Pertumbuhan mikroorganisme dalam bahan

pangan dapat menyebabkan perubahan yang menguntungkan seperti perbaikan bahan

pangan secara gizi, daya cerna ataupun daya simpannya.Selain itu pertumbuham

mikroorganisme dalam bahan pangan juga dapat mengakibatkan perubahan fisik atau

kimia yang tidak diinginkan, sehingga bahan pangan tersebut tidak layak

dikomsumsi.Kejadian ini biasanya terjadi pada pembusukan bahan pangan.

Bahan pangan dapat bertindak sebagai perantara atau substrat untuk pertumbuhan

mikroorganisme patogenik dan organisme lain penyebab penyakit. Penyakit menular

yang cukup berbahaya seperti tifus, kolera, disentri, atau tbc, mudah tersebar melalui

bahan makanan. angguan!gangguan kesehatan, khususnya gagguan perut akibat

makanan disebabkan, antara lain oleh kebanyakan makan, alergi, kekurangan zat gizi,

keracunan langsung oleh bahan!bahan kimia, tanaman atau he"an beracun# toksintoksin

yang dihasilkan bakteri# mengkomsumsi pangan yan mengandung parasit!parasit he"an

dan mikroorganisme. angguan!gangguan ini sering dikelompokkan menjadi satu karena

memiliki gejala yang hampir sama atau sering tertukar dalam penentuan penyebabnya.$pabila terjadi kontaminasi makanan yang berlebihan di tengah % tengah

masyarakat secara otomatis gangguan kesehatan masarakat akan pula menigkat karena

adanya peningkatan kontaminasi makanan yang tinggi. &ntuk mencegah terjadinya

peningkatan kontaminasi makanan yang tinggi sebaiknya yang sangat utama adalah

kebersihan higiens dan sanitasi yang perlu di tingkatkan, karena dengan program tersebut

angka kontaminasi makanan yang ada dapat menurun. Banyaknya penjual makanan yang

instan serta pedagang makanan yang memerlukan bahan makanan yang tidak berstandar

taraf kesehatan, ini memicu juga angka kontaminasi makanan akan tinggi. 'al tersebut

yang melatar belakangi penulis untuk mengangkat permasalahan tersebut sebagai bahan

yang akan dibahas dalam laporan praktikum dengan judul2Penen"u#n An/,# Ku$#n

+#-# T#hu3.

(enghitung atau menentukan banyaknya mikroba dalam suatu bahan )makanan,

minuman, dan lain!lain* dilakukan untuk mengetahui sampai seberapa jauh bahan itu

tercemar oleh mikroba.+engan mengetahui jumlah mikroba, maka dapat diketahui

kualitas mikrobiologi dari bahan tersebut.Bahan yang dapat dikatakan baik jika jumlahmikroba yang terkandung dalam bahan tersebut masih di ba"ah jumlah standar yang

Pemeriksaan angka kuman pada tahu|


3/25

ditentukan oleh suatu lambaga.Kandungan mikroba pada suatu bahan juga sangat

menentukan tingkat kerusakannya, serta dapat ditentukan oleh tingkat kelayakan untuk

dikonsumsi.

'.* Ru$us#n M#s#l#h

+ari latar belakang yang dipaparkan di atas, rumusan masalah dalam praktikum dan

penulisan laporanpraktikum ini adalah sebagai berikut -

1. Bagaimana prosedur pengolahan sampel untuk pemeriksaan angka kuman pada

tahu

. $pa saja yang perlu diperhatikan dalam pengolahan sampel tahu untuk

pemeriksaan angka kuman

/. Bagaimana teknik isolasi bakteri menggunakan media P0$ untuk pemeriksaan

angka kuman pada sampel tahu

. $pa saja yang perlu diperhatikan dalam penanaman bakteri menggunakan media

P0$ untuk pemeriksaan angka kuman pada sampel tahu

2. $pakah ada koloni yang tumbuh pada media P0$ yang digunakan sebagai kontrol

dan penanaman sampel untuk pemeriksaan angka kuman pada sampel tahu

3. 4ika ada, bagaimana ciri!ciri koloni bakteri yang tumbuh pada media P0$ dalam

pemeriksaan angka kuman pada sampel tahu

5. Berapa jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media P0$ dalam pemeriksaan

angka kuman pada sampel tahu

6. $pa saja yang perlu diperhatikan dalam perhitungan angka kuman sampel bahan

makanan7. Berdasarkan hasil pemeriksaan angka kuman pada sampel tahu, apakah sampel

tahu yang diperoleh memenuhi kualitas higienitas bahan makanan secara

bakteriologis

'. Tu4u#n

+ari rumusan masalah di atas, tujuan dalam praktikumdan penulisan laporan

praktikum ini adalah sebagai berikut -

1. &ntuk mengetahui prosedur pengolahan sampel untuk pemeriksaan angka kumanpada tahu.

. &ntuk mengetahui hal!hal yang perlu diperhatikan dalam pengolahan sampel tahu

untuk pemeriksaan angka kuman.

/. &ntuk mengetahui teknik isolasi bakteri menggunakan media P0$ untuk

pemeriksaan angka kuman pada sampel tahu.

. &ntuk mengetahui hal!hal yang perlu diperhatikan dalam penanaman bakteri

menggunakan media P0$ untuk pemeriksaan angka kuman pada sampel tahu.

2. &ntuk mengetahui ada8tidaknya koloni yang tumbuh pada media P0$ yang

digunakan sebagai kontrol dan penanaman sampel untuk pemeriksaan angka

kuman pada sampel tahu.

Pemeriksaan angka kuman pada tahu| /


4/25

3. &ntuk mengetahui ciri!ciri koloni bakteri yang tumbuh pada media P0$ dalam


5. &ntuk mengetahui jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media P0$ dalam


6. &ntuk mengetahui hal!hal yang perlu diperhatikan dalam perhitungan angka

kuman sampel bahan makanan.

7. &ntuk mengetahui kualitas bahan makanan )tahu* secara bakteriologis.

'. M#n5##"

(anfaat dari praktikum yang telah dilakukan dan penulisan laporan praktikum ini

adalah sebagai berikut.

1. Bagi (ahasis"a -

9aporan praktikum ini dapat menambah "a"asan mahasis"a tentang

Pemeriksaan $ngka Kuman, sehingga dapat mengatahui prosedur pemeriksaan

angka kuman pada makanan dan minuman, dan dapat mengoalh sampel, serta

dapat menghitung angka kuman pada makanan dan minuman.

. Bagi +osen Pembimbing -

9aporan praktikum ini dapat dijadikan sebagai bahan e:aluasi dalam

proses perkulihan dan dapat dijadikan acuan dalam memberikan penilaian serta

laporan ini dapat digunakan sebagai bahan ajar.

Pemeriksaan angka kuman pada tahu|


5/25

BAB II

TIN1AUAN PUSTAKA

*.' 6#,"o!75#,"o! #n/ $e$+en/#!uhi hi/ieni"#s #h#n $#,#n#n

Setiap bahan pangan selalu mengandung mikroba yang jumlah dan jenisnya

berbeda.Pencemaran mikroba pada bahan pangan merupakan hasil kontaminasi langsung

atau tidak langsung dengan sumber!sumber pencemar mikroba, seperti tanah, air, debu,

saluran pencernaan dan pernafasan manusia atau he"an.+alam batas!batas tertentu

kandungan mikroba pada bahan pangan tidak banyak berpengaruh terhadap ketahanan

bahan pangan tersebut. $kan tetapi, apabila kondisi lingkungan memungkinkan mikroba

untuk tumbuh dan berkembang lebih cepat, maka bahan pangan akan rusak karenanya

)+"idjoseputro ;;2*. (enurut inarno );;* menyebutkan bah"a setiap penurunan suhu 6?0 akan membuat

kecepatan reaksi berkurang menjadi setengahnya. )* bila suhu naik hingga diatas

suhu maksimal atau turun diba"ah suhu minimal, maka pertumbuhan mungkin akan

terhenti, komponen sel menjadi tidak aktif dan sel!sel mengalami kematian.

/. @ilai p'



6/25

Setiap organisme memiliki kisaran p' tertentu yang masih memungkinkan

bagi pertumbuhannya dan juga mempunyai p' optimum. Pada umumnya,

mikroorganisme dapat tumbuh pada kisaran suhu 3,3!6,; dan nilai p' luar pada

kisaran ,;!1,; sydah bersifat merusak )Buckle 1765*. (ikroorganisme juga

memerlukan p' tertentu untuk pertumbuhannya, namun pada umumnya bakteri

memiliki kisaran p' yang sempit, yaitu sekitar p' 3,2!5,2 atau pada p' netral.

. $ktifitas $ir

4umlah air yang terkandung didalam bahan makanan atau larutan disebut

sebagai akti:itas air )"ater acti:ity*. 4enis mikroorganisme yang berbeda

membutuhnkan jumlah air yang berbeda pula untuk pertumbuhannya. Bakteri

umumnya memerlukan media yang memiliki nilai a" tinggi );,71*, khamir

membutuhkan nilai a" ;,65!;,71 sedangkan kapang membutuhkan nilai a" yanglebih rendah lagi, yaitu ;,6;!;,65 )Buckle 1765*.

2. Ketersediaan Aksigen

(asing!masing organisme membutuhkan jumlah oksigen yang berbeda untuk

metabolismenya. $da organisme yang tidak membutuhkan oksigen sama sekali untuk

pertumbuhannya )anaerob*, ada yang membutuhkan sedikit oksigen )mikroaerofil*

dan ada yang dapat tumbuh dan berkembang biak pada kondisi lingkungan yang

cukup oksigen maupun tidak ada oksigen sama sekali )anaerob fakultatif*.

3. Senya"a penghambat

Pertumbuhan bakteri juga dipengaruhi oleh senya"a!senya"a dalam bahan

makanan yang bersifat antimikroba yang secara ilmiah ada didalam bahan makanan

tersebut maupun yang sengaja ditambahkan seperti asam benzoat dan asam sorbat.

5. >aktu

(enurut


7/25

sangat berpengaruh terhadap kehidupan mikroba.(ikroba memerlukan potensial

redoks positif )teroksidasi*, sedangkan pada mikroba anaerob memerlukan potensial

redoks negatif )tereduksi*.

7. Struktur Biologi

Struktur biologi seperti kulit pada telur, kulit kacang!kacangan dan kulit buah

berperan mencegah masuknya mikroba ke dalam bahan pangan tersebut.

1;.


8/25

*. Te,ni, isol#si #,"e!i un"u, +e!hi"un/#n #n/,# ,u$#n s#$+el +#-#" (#h#n

$#,#n#n)

'. Te,ni, +!e+#!#si s#$+el +#-#" -en/#n 8#!# +en/en8e!#n (Dilution)

Salah satu jenis preparasi sampel adalah dengan caramaseration )pengancuran*,

sampel yang berbentuk padat dapat ditumbuk dengan mortar dan pestle sehingga

mikroba yang ada dipermukaan atau di dalam dapat terlepas kemudian dilarutkan ke

dalam air.Dujuan dari teknik ini pada prinsipnya adalah melarutkan atau melepaskan

mikroba dari substratnya ke dalam air sehingga lebih mudah penanganannya.

0ontoh sampelnya antar lain bakso, tahu, biji, dll. Perbandingan antar berat sampel

dengan pengenceran pertama adalah 1 - 7 )"8:*.

Deknik dilusi sangat penting dalam analisa

mikrobiologi karena hampir semua metode penelitian danperhitungan jumlah sel mikroba menggunakan teknik ini,

seperti DP0 )Dotal Plate 0ount*.

Pada proses dilusi dapat dilakukan teknik pengenceran

bertingkat. Dujuan dari pengenceran bertingkat yaitu memperkecil atau mengurangi

jumlah mikroba yang tersuspensi dalam cairan.Penentuan besarnya atau banyaknya

tingkat pengenceran tergantung kepada perkiraan jumlah mikroba dalam sampel.

+igunakan perbandingan 1 - 7 untuk sampel dan pengenceran pertama dan

selanjutnya, sehingga pengenceran berikutnya mengandung 181; sel mikroorganisma

dari pengenceran sebelumnya.

G#$#! "e,ni, +en/en8e!#n e!"in/,#"



9/25

*. Te,ni,Pour Plate(#/#! "u#n/)

Deknik penanaman ini merupakan lajutan dari pengenceran

bertingkat.Pengambilan suspensi dapat diambil dari pengenceran mana saja tapi

biasanya untuk tujuan isolasi )mendapatkan koloni tunggal* diambil beberapa tabung

pengenceran terakhir, sedangkan pada perhitungan angka kuman suatu bahan

makanan, suspensi diambil dari setiap sampel pada tabung pengenceran.

Deknik ini memerlukan agar yang belum padat )E2o0* untuk dituang bersama

suspensi bakteri ke dalam ca"an petri lalu kemudian dihomogenkan dan dibiarkan

memadat. 'al ini akan menyebarkan sel!sel bakteri tidak hanya pada permukaan agar

saja melainkan sel terendam agar )di dalam agar* sehingga terdapat sel yang tumbuh

dipermukaan agar yang kaya A dan ada yang tumbuh di dalam agar yang tidak banyak

begitu banyak mengandung oksigen.G#$#! "e,ni, isol#si #,"e!i -en/#n $e"o-e +ou! +l#"e

+alam pour plate, ca"an petri yang telah berisi campuran media dan sampel

tersebut kemudian diputar dengan lembut untuk memastikan bah"a media dan sampel

bercampur secara merata.

G#$#! +e!e-##n "e,ni, s+!e#- +l#"e -en/#n "e,ni, +ou! +l#"e

Spread plateadalah teknik menanam dengan menyebarkan suspensi bakteri di

permukaan agar yang telah memadat, sedangkan pada metode pour plate suspensi

bakteri dicampurkan terlebih dahulu pada media yang belum memadat sebelum

dituangkan ke ca"an petri.

$lasan diteteskannya bakteri sebanyak ;,1 m9 untuk spread platedan 1 m9

untuk pour platekarena spread plate ditujukan untuk menumbuhkan bakteri hanya

pada permukaan media saja, sedangkan pour platedigunakan untuk menumbuhkan



10/25

bakteri pada permukaan dan bagian tengah media sehingga membutuhkan ruang yang

lebih luas untuk penyebarannya maka diberikan lebih banyak suspensi sampel

daripadaspread plate.

*.* C#!# Men/hi"un/ 1u$l#h Mi,!o# -#n Pen/#!uh 6#,"o! Pen/en8e!#n

Pada teknik isolasi dengan pour plate memungkinkan mikroorganisme untuk

tumbuh baik di permukaan dan di dalam media. Sebagian besar dari koloni tumbuh dalam

media dan dalam ukuran kecil dan mungkin konfluen. Beberapa daerah koloni yang

tumbuh di permukaan dapat berupa ukuran yang sama.

Suspensi bakteri yang telah ditanam pada media agar )P0$F Plate Count Agar*,

setelah inkubasi pada suhu /5?0 selama !6 jam dihitung jumlah koloni yang tumbuh.Satuan perhitungan jumlah mikroba dikenal dengan istilah Colony Forming Units)0


11/25

BAB III

METODE

.' 9#,"u -#n Te$+#"

Praktikum pemeriksaan DP08angka kuman makanan dan minuman ini dilakukan pada -

a* 'ari, tanggal - Kamis, 1/ 4uni ;1/

b* Dempat - 9aboratorium Bakteriologi

4urusan $nalis Kesehatan

Politeknik Kesehatan +enpasar

.* Al#" -#n B#h#n

A. ALAT

1. (ortir steril. Dabung reaksi

/. ak tabung reaksi

. elas ukur 2; ml

2. Pipet ukur 1 ml, 1; ml

3. Bola hisap

5. Petridish steril

6. @eraca analitik

7. Hrlenmeyer 1;;, 2;, 2;; ml

1;. $pi spiritus8Bunsen11. Pinset

1. Cnkubator

1/. Kertas label

1. Spatel

12. Batang pengaduk

13. Kompor listrik

15. Benang pulung8 tali

16. Botol semprot

B. BA0AN C. MEDIAREAGENSIA

1. Kristal @a0l 1. 9arutan garam fisiologis8Pz

. Serbuk media P0$ . (edia P0$

/. $Iuades steril

. Kapas berlemak

2. $luminium foil

3. Dahu



12/25

. C#!# Ke!4#

..' P!e+#!#si s#$+el +#-#" ("#hu)

1. Sampel tahu dihancurkan dengan blender, apabila tidak ada blender bisa

dengan mortir steril.

. (emasukkan 1; g sampel tersebut ke dalam labu erlenmeyer8botol steril.

/. (enuangkan 7; ml aIuades steril ke dalamnya.

. Bahan dengan pengencer tersebut siap digunakan untuk pemeriksaan angka

kuman, (P@ dan pemeriksaan biakan.

..* Pe$e!i,s##n #n/,# ,u$#n

1. (enyiapkan 3 buah tabung reaksi steril, disusun dalam rak tabung. (asing!

masing tabung secara berurutan diberi tanda 1;!1,1;!,1;!/,1;!, 1;!2, 1;!3dan

seterusnya sebagai kode pengenceran.

. (enyiapkan 5 buah petridish steril, pada 3 buah petridish diberi tanda pada

bagian belakangnya sesuai dengan kode pengenceran dan tanggal pemeriksaan

seperti butir a, satu petridish diberi tanda control./. Pada tabung kedua sampai enam diisi 7 ml larutan garam fisiologis atau

aIuades steril atau larutan buffer phosfat. &ntuk pemeriksaan Bacillus cereus

harus menggunakan buffer phosfat.

. (engocok bahan di atas sampai homogen )J2 kali* kemudian ambil 1; ml

dimasukkan pada tabung ke satu.

2. (emindahkan 1 ml bahan dari tabung kesatu ke tabung kedua dengan pipet

kemudian dikocok hingga homogen.

3. (emindahkan 1 ml bahan dari tabung kedua ke tabung ketiga dengan pipet

kemudian mengocok hingga homogen.

5. +emikian selanjutnya dilakukan hal yang sama sampai tabung keenam

sehingga diperoleh pengenceran tabung 1;!1,1;!,1;!/,1;!, 1;!2, 1;!3 atau sesuai

dengan kode pengenceran yang telah dibuat sebelumnya. +ari masing!masing

tabung di atas, dimulai dari tabung keenam diambil 1 ml. +engan pipet steril

dimasukkan ke dalam masing!masing petridish steril sesuai dengan kode

pengenceran yang sama.

6. Kemudian ke dalam masing!masing petridish ini dituangi media plat count agar)P0$* yang telah dipanaskan dalam "aterbath 2;0 sebanyak 12!; ml. +an

masing!masing petridish digoyang perlahan!lahan sehingga tercampur merata

kemudian dibiarkan dingin dan membeku.

7. (emasukkan ke dalam inkubator suhu /5;0 selama !6 jam dalam posisi

terbalik.

1;. Kontrol media dibuat dengan media P0$ tanpa diberi sampel. Kontrol ruangan

dibuat dengan memakai P0$ dengan cara membuka tutup petridish selama 2

menit.11. Pembacaan dilakukan setelah 16! jam dengan cara menghitung jumlah

koloni yang tumbuh pada setiap petridish.


13/25

.. Pe$e!i,s##n h#sil -#n +el#+o!#n

A. Pe$#8##n 0#sil

1. (enghitung koloni yang tumbuh pada masing!masing petridish.

. Koloni!koloni yang bergabung menjadi satu atau membentuk satu

deretan8koloni yang terlekat sebagai garis tebal atau jumlah koloni yang

meragukan, dihitung sebagai satu koloni kuman./. (enghitung jumlah koloni yang tumbuh pada petridish control. $pabila

jumlah koloni pada petridish control lebih besar dari 1;, maka

pemeriksaan harus menggunakan P0$ dari pembuatan yang lain.

B. Pel#+o!#n

Pelaporan hanya dilakukan pada petridish yang menghasilkan jumlah

koloni antara /;!/;; koloni serta apabila jumlah pada petridish kontrol

kurang dari 1; koloni, jumlah koloni pada masing!masing petridish ini harus

dikurangi terlebih dahulu dengan jumlah koloni pada petridish kontrol.


14/25

BAB I;

PEMBA0ASAN

.' 0#sil +en/#$#"#n +!e+#!#si s#$+el "#hu

G#$#! Ke"e!#n/#n

Sebelumnya tahu ditimbang

terlebih dahulu dengan neraca

analitik sebanyak 1; gram lalu

di hancurkan sampai halus

dengan pestle dalam mortir

steril dalam keadaan steril

dengan cara bekerja didekat

api bunsen.

9arutan Pz yang telah

disterilisasi di takar dengan

labu ukur sebanyak 7; ml.

Pengerjaan selalu dalam

keadaan steril yaitu di daerah

api bunsen yang menyala.

Setelah bahan halus

dituangkan sedikit demi sedikit

larutan pz steril yang telah

ditakar ke dalam mortir.


15/25

G#$#! Ke"e!#n/#n

Hrlenmeyer yang telah steril

tutupnya dibuka di daerah

steril yaitu di daerah api

bunsen agar kesterilannya

terjaga.

9arutan pz yang telah

bercampur dengan bahandituangkan ke dalam

Hrlenmeyer tadi. 9alu dibilas

sisa!sisa tahu dalam mortir

dengan larutan pz sampai

larutan pz yang telah ditakar

tadi habis.

Bahan telah siap digunakan

untuk pemeriksaan angka

kuman. 9alu diberi label 1;!1

sebagai tanda sampel a"al.


16/25

.* P!e+#!#si s#$+el "#hu -en/#n +en/en8e!#n e!"in/,#"

G#$#! Ke"e!#n/#n

Sampel a"al dengan label 1;!1

dipipet dengan pipet ukur

sebanyak 1 ml. Pengerjaan dari

a"al sampai akhir tetap

didaerah api bunsen agar tetap

steril.

9alu 1 ml larutan tadi

dimasukkan dalam tabung

dengan label 1;!yang

sebelumnya telah berisi larutan

pz steril sebanyak 7 ml.

Kemudian dikocok hingga

homogen.

9alu dipipet larutan dalam

tabung 1;!sebanyak 1 ml dan

dimasukkan dalam tabung 1;!/,

dikocok hingga homogen.

Begitu seterusnya sampai

tabung dengan label 1;!3. 'al

ini disebut dengan pengenceran

bertingkat.

Setelah dilakukan pengenceran

bertingkat terlihat bah"a dari

tabung dengan label 1;!1ke

tabung 1;!3larutannya semakin

jernih.


17/25

Setelah itu dipipet larutan dari

tabung 1;!3sebanyak 1 ml.

Kemudian larutan sebanyak 1

ml tadi dimasukkan dalam

petridish steril dengan label

1;!3 dengan tutup petridish

dibuka sedikit untuk menjaga

kesterilan.

9alu dipipet 1 ml larutan dari

tabung 1;!2kedalam petridish

dengan label 1;!2begitu

seterusnya sampai semua

petridish dari 1;!1sampai 1;!3

terisi larutan.

Kemudian petridish yang telah

terisi larutan tadi ditambahkandengan larutan media P0$

sampai merata sebanyak 12!;

ml. 9alu ditunggu hingga

membeku.

ambar disamping

menunjukkan keenam petridish

yang berisi label 1;!1 sampai

1;!3 berisi media yang telah

membeku. 9alu dimasukkan

dalam incubator suhu /5;0

selama !6 jam dalam

keadaan terbalik.

ambar disamping

menunjukkan kontrol mediayang dibuat dengan media


18/25

P0$ namun tanpa diberi

sampel lalu dimasukkan dalam

incubator dengan perlakuan

yang sama.

Setelah jam media

dikeluarkan dari inkubator.

&ntuk pemeriksaannya yang

pertama kali harus kita amati

dan dihitung jumlah koloninya

adalah kontrol media. Derapat 1

koloni bakteri dalam kontrol

media. Pemeriksaan dapat

dilanjutkan.

. G#$#! h#sil +e$e!i,s##n #n/,# ,u$#n +#-# s#$+el "#hu

G#$#! Ke"e!#n/#n

Pada petridish 1;!terdapat 1/

koloni bakteri.

Pada petridish 1;!/terdapat 1;

koloni bakteri.

Pada petridish 1;!terdapat 6

koloni bakteri.


19/25

Koloni bakteri

Pada petridsh 1;!2 terdapat 5

koloni bakteri.

Pada petridish 1;!3 terdapat 2

koloni bakteri. 'asilnya dicatat

dan dilakukan pelaporan jika

jumlah koloni antara /;!/;;

koloni bakteri. @amun dari

hasil praktikum ini tidak

terdapat jumlah koloni antara/;!/;; koloni bakteri.

. Pe$#h#s#n$en/en#i +!e+#!#si s#$+el "#hu

Sampel tahu termasuk ke dalam sampel padat, sehingga digunakan teknik preparasi

sampel dengan caramaseration )pengancuran*, saat sampel tahu yang berbentuk padat

ditumbuk hingga halus dengan menggunakan mortar dan pestle, kemudian dilakukan

proses dilution dengan menggunakan larutan P= )garam fisiologis* steril. Pada proses

dilution mikroba yang ada di permukaan atau di dalam sampel tahu dapat terlepas

kemudian akan tersuspensi pada larutan P= steril. Dujuan dilakukannya dilution terhadap

sampel tahu adalah untuk melarutkan atau melepaskan mikroba dari sampel tahu ke

dalam P= steril sehingga lebih mudah penanganannya.

Proses dilusi )dilution* yang dilakukan pada pemeriksaan ini adalah teknik

pengenceran bertingkat yang bertujuan untuk memperkecil atau mengurangi jumlah

mikroba yang tersuspensi dalam larutan P= steril.

'al!hal yang perlu diperhatikan selama proses maseration dan dilution adalah -

a. Selalu mengunakan alat dan bahan yang steril, sebab alat yang tidak steril dapatmenyebabkan sampel yang diuji terkontaminasi oleh bakteri yang berasal dari alat

dan bahan yang tidak steril. 'al tersebut dapat menyebabkan hasil pemeriksaan yang

tidak sesuai dengan kondisi angka kuman pada sampel yang sebenarnya. (aka dari

itu, sebelum dilakukan preparasi sampel telah dilakukan proses sterilisasi alat dan

bahan yang digunakan, seperti - sterilisasi ca"an petri, mortar dan pestle, tabung

reaksi yang berisi larutan P=, sterilisasi pipet ukur, sterilisasi larutan media P0$

)Plate Count Agar*.

b. Praktikan tidak boleh menyentuh sampel )tahu* dengan tangan. Dujuannya dalah

untuk menghindari kontaminasi oleh bakteri yang berasal dari tangan praktikan.


20/25

c. Proses maseration selalu dilakukan pada zona steril, misalnya - di dekat api spiritus

yang menyala. 'al ini untuk meminimalisir kontaminasi oleh bakteri yang berasal

dari udara.

d. +iusahakan agar sampel yang dihancurkan harus sehalus mungkin, agar nantinya

ampas sampel tahu tidak mengganggu pengamatan saat mengitung jumlah koloni

yang tumbuh pada media.

e. Saat membuka tabung reaksi )tempat pengenceran sampel* untuk melakukan

pengenceran bertingkat harus dilakukan pada zona steril, kemudian tabung segera

difiksasi saat ingin menutup tabung.

.< Pe$#h#s#n$en/en#i +e$e!i,s##n #n/,# ,u$#n +#-# "#hu -en/#n $e"o-epour

plate

Pada pemeriksaan angka kuman pada tahu digunakan media P0$ sebab media ini

baik untuk pertumbuhan semua jenis mikroba karena di dalamnya mengandung

komposisi casein enzymic hydrolisate yang menyediakan asam amino dan substansi

nitrogen komplek lainnya serta ekstrak yeast mensuplai :itamin B kompleks yang

dibutuhkan oleh bakteri.

Pada pemeriksaan angka kuman sampel tahu digunakan metode pour plate sebab

tidak semua bakteri dapat tumbuh pada permukaan media, ada pula bakteri yang tumbuh

pada bagian tengah media, sehingga media pour plate adalah yang paling cocok

digunakan, sebab sampel yang terdiri dari suspensi bakteri pada tahu dapat menyebar

pada seluruh bagian media.

'al!hal yang perlu diperhatikan saat pemeriksaan angka kuman dengan metode

pour plate adalah -

a. (edia P0$ yang digunakan harus masih dalam keadaan cair )belum membeku* agar

dapat dilakukan homogenisasi campuran media dan sampel.

b. (edia P0$ yang belum membeku dituang pada ca"an petri pada suhu 2!2;?0

setelah penuangan sampel pada ca"an petri. 'al tersebut bertujuan untuk

memperkecil kontaminasi oleh air kondensasi yang dapat timbul apabila media

dituang pada suhu yang sangat tinggi.

c. 'omogenisasi campuran media dan sampel pada ca"an petri harus dilakukan secara

perlahan dan jangan terlalu lama, sebab jika media telah setengah padat, hal tersebut

dapat merusak penampilan8bentuk permukaan media.

.= Pe$#h#s#n h#sil +e!hi"un/#n 4u$l#h ,oloni #,"e!i +e! 8#>#n +e"!i

Pada perhitungan angka kuman pada media kontrol ditemukan 1 buah koloni

kuman dengan bentuk bulat dan ber"arna putih yang tumbuh pada permukaan

media.(edia kontrol yang terdiri dari campuran media P0$ dan P= )garam fisiologis*


21/25

steril tanpa diberi suspensi sampel )tahu*, seharusnya tidak ditumbuhi koloni bakteri,

karena alat dan bahan yang digunakan sudah disterilisasi. 'al!hal yang menyebabkan

tumbuhnya koloni kuman pada media kontrol adalah -

a. Kurangnya proses sterilisasi alat )ca"an petri dan pipet ukur*

b. Kurang optimalnya proses sterilisasi pada media P0$ dan larutan P= yang dibuat,

sehingga bahan!bahan tersebut tidak dalam keadaan steril

c. Kontaminasi oleh bakteri di udara akibat proses isolasi bakteri yang tidak dilakukan

pada zona steril.

Pada media P0$ yang ditanami sampel tahu )hasil pengenceran bertingkat*, koloni

yang tumbuh pada masing!masing ca"an petri berjumlah kurang dari /; koloni, maka

tidak perlu dilakukan perhitungan angka kuman per m9, sampel tahu yang diuji dapat

dinyatakan layak untuk dikonsumsi karena memenuhi persyaratan kualitas bahan

makanan secara bakteriologis.Semakin tinggi faktor pengenceran sampel, jumlah koloni

yang tumbuh pada media P0$ adalah semakin sedikit.Ctu berarti hasil yang didapat tidak

menyimpang, dalam arti tidak terdapat kesalahan dalam teknik isolasi, karena telah sesuai

dengan dasar teori yaitu pengenceran berikutnya mengandung sel mikroorganisme yang

lebih sedikit dibandingkan dengan pengenceran sebelumnya.

'al!hal yang perlu diperhatikan saat melakukan perhitungan jumlah koloni yang

tumbuh pada media, yaitu harus dibedakan antara bentuk yang termasuk koloni bakteri

dan bentuk yang termasuk ampas tahu, terutama pada pengenceran 1;!1

dimana ampas

tahu masih sangat banyak terlihat.


22/25

BAB ;

PENUTUP


23/25

pada ca"an petri pada suhu 2!2;?0 setelah penuangan sampel pada ca"an petri. 'al

tersebut bertujuan untuk memperkecil kontaminasi oleh air kondensasi yang dapat

timbul apabila media dituang pada suhu yang sangat tinggi. 'omogenisasi campuran

media dan sampel pada ca"an petri harus dilakukan secara perlahan dan jangan terlalu

lama, sebab jika media telah setengah padat, hal tersebut dapat merusak

penampilan8bentuk permukaan media.

3. Deknik perhitungan koloni kuman pada media dilakukan secara :isual dengan

menghitung jumlah koloni yang terlihat.

5. 0ara menentukan angka kuman pada makanan dan minuman melalui jumlah koloni

yang ada dilakukan dengan mengamati kumpulan koloni dimana kumpulan koloni

tersebut berbentuk bulat sempurna dan muncul kepermukaan.

6. 'al!hal yang perlu diperhatikan dalam menghitung koloni kuman serta penentuan

angka kuman dalam makanan dan minuman yaitu harus dibedakan antara bentuk yangtermasuk koloni bakteri dan bentuk yang termasuk ampas tahu, terutama pada

pengenceran 1;!1 dimana ampas tahu masih sangat banyak terlihat.


24/25

DA6TAR PUSTAKA

1. $frianti 9'. ;;. 0ara menga"etkan makanan.

http-88""".pikiranrakyat.com8cetak8;/;828cakra"ala8lainnya;.htm.+iakses

tanggal 12 4uni ;1/

. $khiarif. ;11. +efinisi mikroorganisme. http-88id.sh:oong.com8"riting!and!

speaking811723!definisi!mikroorganisme8MiGzz1(f(


25/25

11. >idodo L. ;;. 'ubungan Dingkat Pengetahuan Penjamah (akanan (engenai

'ygiene +an Sanitasi (akanan +engan Kualitas Bakteriologis (akanan Pada umah

(akan +i Kota (agelang NskripsiO- ijayanti . ;11. Kerusakan bahan pangan.

http-88foodsciencetech3."ordpress.com8;118;188kerusakan!bahan!pangan8.

+iakses tanggal 12 4uni ;1/

1/. >inarno, ;;.!imia Pangan Dan 'i(i. 4akarta- PD. ramedia Pustaka &tama.

1. Ludhabuntara +. ;1;. Pengendalian mikroorganisme dalam bahan pangan.

http-88milkordie.blogspot.com8;;68;28pengendalian!mikroorganisme!dalam!

bahan.html. +iakses tanggal 12 4uni ;1/
http://foodsciencetech46.wordpress.com/2011/01/24/kerusakan-bahan-pangan/http://foodsciencetech46.wordpress.com/2011/01/24/kerusakan-bahan-pangan/http://milkordie.blogspot.com/2008/05/pengendalian-mikroorganisme-dalam-bahan.htmlhttp://milkordie.blogspot.com/2008/05/pengendalian-mikroorganisme-dalam-bahan.htmlhttp://foodsciencetech46.wordpress.com/2011/01/24/kerusakan-bahan-pangan/http://milkordie.blogspot.com/2008/05/pengendalian-mikroorganisme-dalam-bahan.htmlhttp://milkordie.blogspot.com/2008/05/pengendalian-mikroorganisme-dalam-bahan.html

angka lempeng total1.docx

Documents