laporan kuljartum

7/24/2019 laporan kuljartum

1/22

alat

Kultur jaringan merupakan salah satu cara perbanyakan tanaman secara vegetatif. Kultur

jaringan merupakan teknik perbanyakan tanaman dengan cara mengisolasi bagian tanaman

seperti daun, mata tunas, serta menumbuhkan bagian-bagian tersebut dalam media buatansecara aseptik yang kaya nutrisi dan zat pengatur tumbuh dalam wadah tertutup yang tembus

cahaya sehingga bagian tanaman dapat memperbanyak diri dan bergenerasi menjadi tanaman

lengkap (Tribowo, !!"#. $etode kultur jaringan dikembangkan untuk membantu

memperbanyak tanaman, khususnya untuk tanaman yang sulit dikembangbiakkan secara

generatif. %ibit yang dihasilkan dari kultur jaringan mempunyai beberapa keunggulan, antara

lain& mempunyai sifat yang identik dengan induknya, dapat diperbanyak dalam jumlah yang

besar sehingga tidak terlalu membutuhkan tempat yang luas, mampu menghasilkan bibit

dengan jumlah besar dalam waktu yang singkat, kesehatan dan mutu bibit lebih terjamin,

kecepatan tumbuh bibit lebih cepat dibandingkan dengan perbanyakan konvensional

('ulkarnain, !!#.

)lat-alat yang digunakan dalam kultur jaringan yaitu sebagai berikut* %otol kultur , +awan

etri , ven ,Tabung reaksi, )utoclave , %unsen, rlenmeyer,inset,/eraca

)nalitik,ipet,0ot plate,1amina air flow,scapel,labu ukur. )lat dan bahan yang digunakan

dalam kegiatan di laboratorium memerlukan perlakuan khusus sesuai sifat dan karakteristik

masing-masing.erlakuan yang salah dalam membawa, menggunakan dan menyimpan alat

dan bahan di 1aboratorium dapat menyebabkan kerusakan alat dan bahan, terjadinya

kecelakaan kerja serta dapat menimbulkan penyakit.+ara memperlakukan alat dan bahan di

1aboratorium secara tepat dapat menentukan keberhasilan dan kelancaran kegiatan. )dapun

perlakuan terhadap alat-alat di laboratorium seperti membawa alat sesuai petunjuk

penggunaan,

menggunakan alat sesuai petunjuk penggunaan, menjaga kebersihan alat, dan menyimpan

alat.%erdasarkan uraian sebelumnya maka perlu adanya pengetahuan tentang berbagai

peralatan yang digunakan dalam kultur jaringan.

Tujuandari praktikum ini adalah

2. $engetahui fungsi alat-alat Kultur 3aringan.

. $ahasiswa memahami prosedur kerja praktikum.

Alat dan Bahan)lat dan bahan yang digunakan dalam praktikum engenalan )lat

Kultur 3aringan adalah sebagai berikut* botol kultur , cawan etri , oven, tabung reaksi,

autoclave , bunsen, erlenmeyer, pinset, neraca analitik, ipet ,hol plate, laminar air flow,

scapel,labu ukur.

Prosedur kerja

1angkah 4langkah yang akan digunakan dalam praktikum ini adalah *

2. $enyiapkan alat yang akan digunakan dalam praktikum pengenalan alat kultur

jaringan.


2/22

. $engamati alat kultur jaringan beserta fungsinya.

5. $engambil gambar .

Hasil Pembahasan

)lat 6ungsi 7ambar

%otol Kultur

%erfungsi sebagai tempat

untuk mengkulturkan

atau menanam eksplan

+awan etri

%erfungsi sebagai tempat

untuk memotong-motong

eksplan yang akan

ditanam dalam botol

kultur

ven%erfungsi sebagai alatuntuk mensterilisasi alat

yang akan digunakan

dalam media kultur

Tabung

8eaksi

9igunakan untuk

mengukur larutan dan

menambahkan

)utoclave

%erfungsi untuk

mensterilisasi ahan atau

alat yang pada umumnyaterbuat dari logam,

plastik dll. 9alam

keadaan terbungkus

maupun tidak

%unsen

%erfungsi untuk pemanas

saat memasak media

rlenmeyer

%erfungsi seagai tempat

untuk memanaskanmedia yang akan dibuat

inset%erfungsi sebagai untuk

mengambil ksplan

Timbangan

)nalitik

%erfungsi untuk

menimbang nutrisi yang

akan diberikan pada

media

%erfungsi untuk

mengambil nutrisi yangakan biberikan pada


3/22

ipetmedia dalam skala keci

(micro#

0ol late

%erfungsi untuk untuk

homogen dan juga untuk

pemanas. 0ol plate jugamerupakan alat untuk

mencampur dan

memasak media

kultur.0ol plate

digunakan untuk

memasak segala macam

bahan nutrisi dengan

melibatkan pengaduk dan

pemanas.

1aminar )ir

6low

%erfungsi sebagai alat

untuk mensterilisasikan

media

25

:capel

%erfungsi untuk

memotong eksplan

2;

1abu


4/22

petridish adalah sebagai media perkembangan mikroorganisme (0allmann, !!2 #. ven

adalah salah satu mesin yang digunakan sebagai mesin pengering berbagai komoditas bahan,

dilengkapi dengan alat kontrol suhu otomatis, sehingga suhu pengeringan dapat diatur dan

dikendalikan secara otomatis.Tabung reaksi berfungsi untuk mengukur larutan dan

menambahkan. )utoclave adalah salah satu jenis pressure vessel yang berfungsi untuk

menampung udara panas bertekanan.)utoclave digunakan untuk mensterilkan alat-alatbioteknologi seperti tip, e-tube,mortar pestle, dan lain-lain. %unsen digunakan untuk

memanaskan atau mensterilkan. rlenmeyer dan gelas ukur mempunyai fungsi sama yaitu

sebagai menambah larutan. inset berfungsi sebagai untuk mengambil eksplan.

/eraca analitik %erfungsi untuk menimbang nutrisi yang akan diberikan pada media.

ipet ukur merupakan alat untuk memindahkan larutan dengan volume yang diketahui.

Tersedia berbagai macam ukuran kapasitas pipet ukur, diantaranya pipet berukuran 2 ml, = ml

dan 2! ml. +ara penggunaanya adalah cairan disedot dengan pipet ukur dengan

bantuanfillersampai dengan volume yang diingini. >olume yang dipindahkan dikeluarkan

menikuti skala yang tersedia (dilihat bahwa skala harus tepat sejajar dengan mensikus cekung

cairan# dengan cara menyamakan tekananfillerdengan udara sekitar.tu. 0otplate adalah suatualat yang berfungsi untuk homogen dan juga untuk pemanas.0otplate juga merupakan alat

untuk mencampur dan memasak media kultur.0otplate digunakan untuk memasak segala

macam bahan nutrisi dengan melibatkan pengaduk dan pemanas.engadukan dan pemanas

yang dihasilkan oleh alat ini bersumber pada energi listrik. %esarnya kecepatan pengaduk dan

pemanasan dapat diatur berdasarkan keperluan(:uryowinoto,22#. 1aminar air flow adalah

suatu alat yang digunakan dalam pekerjaan & persiapan bahan tanaman, penanaman, dan

pemindahan tanaman dari sutu botol ke botol yang lain dalam kultur jaringan. )lat ini disebut

1aminar )ir 6low +abinet, karena meniupkan udara steril secara kontinue melewati tempat

kerja sehingga tempat kerja bebas dari, debu dan spora-spora yang mungkin jatuh kedalam

media, waktu pelaksanaan penanaman. )liran udara berasal dari udara ruangan yang ditarik

ke dalam alat melalui filter pertama, yang kemudian ditiupkan keluar melalui filter yang

sangat halus disebut 0) (0igh efficiency articulate )ir 6ilter?#, dengan menggunakan

blower. 6ungsi laminar air flow ini? untuk menanam eksplan ke dalam botol dalam kondisi

steril atau melakukan sub kultur yang dilengkapi dengan blowerdan lampu ( @etherel,

9. 6. 2" #.:capel adalah alat yang berbentuk catter berfungsi sebagai pemotong atau

menyayat. )lat-alat yang digunakan harus dalam keadaan steril. Karena kondisi yang steril

akan menentukan berhasil tidaknya suatu kegiatan kultur jaringan. Karena jika kondisinya

tidak steril, maka akan mudah terkena kontaminasi sehingga kemampuan totipotensi sel akan

terhambat. Totipotensi sel yaitu kemampuan setiap seltumbuhan untuk menjadi individu yang

sempurna.

Kesimpulan

%erdasarkan pembahasan diatas dapat disimpulkan bahwa

alat 4 alat yang digunakan dalam kultur jaringan beserta fungsinya yaitu & %otol kultur

, +awan etri , ven ,Tabung reaksi, )utoclave , %unsen, rlenmeyer,inset,/eraca

)nalitik,ipet,0ot plate,1amina air flow,scapel,labu ukur,dan :tirrer.

%otol kultur merupakan tempat untuk menkulturkan atau menanam eksplan.+awan

petridish sebagai tempat pengembangbiakan eksplan.ven mengeringkan bahan.Tabung

reaksi ,labu reaksi dan erlenmeyer funsinya sebagai menukur mengambil mencampur


5/22

dan menambah larutan.)utoclave mensterilkan alat 4alat .%unsen alat memanaskan A

mensterilkan dengan api spritus.

inset untuk mengambil eksplan./eraca analitik %erfungsi untuk menimbang nutrisi

yang akan diberikan pada media.0ol plate berguna memanaskan bahan.1amina air

flow penanaman eksplan.scapen untuk menyayat atau memotong. :tirrer untukmengaduk larutan.semua alat-alat diatas harus steril.

Daftar Pustaka

)nonim2,!22.http&AAkuljar.blogspot.comA!22A2!Alaporan-kultur-jaringan-pengenalan-

alat.html.9iakses pada Tanggal !; )pril !2;

)nonim,!2.http&AAkhaeriyah indahnyaberbagi.blogspot.comA!2A!BAlaporan-pengenalan-

alat-kultur-jaringan.htm. 9iakses pada Tanggal !; )pril !2;

)nonim5,!25.http&AAhannahanipeh.blogspot.comA!25A2!Alaporan-praktikum-kultur-

jaringanCB.html. 9iakses pada Tanggal !; )pril !2;

)nonim;,!25.http&AAsaktiofti.blogspot.comA!25A2Apengenalan-alat-alat-laboratorium-

asakti.html. 9iakses pada Tanggal !; )pril !2;

)nonim=,!2;.http&AAprayudimarta.wordpress.comA!2;A!A2=Apengenalan-alat-dan-ruangan-

kultur-jaringanA9iakses pada Tanggal !; )pril !2;

)nonimB,@ordpress http&AAblacksweetranger.wordpress.comApengenalan-alatA9iakses pada

Tanggal !5 )pril !2;

%arahima )bbas, !22. rinsip 9asar Teknik Kultur 3aringan. )lfabeta. %andung.

:uryo. 2. Genetika. 7adjah $ada


6/22

sehingga teknik ini disebut sebagai mbryo 8escue (enyelamatan mbrio#. Kondisi seperti

ini biasanya sering dijumpai pada buah hasil persilangan, dimana absisi buah kerap kali

dijumpai setelah penyerbukan dan pembuahan.

. Kultur mbryo 9ewasa ($ature mbryo +ulture#

Kultur embrio dewasa dilakukan dengan membudidayakan embrio yang telah dewasa.mbrio ini diambil dari buah yang telah masak penuh dengan tujuan merangsang

perkecambahan dan menumbuhkan embrio tersebut secara in-vitro. Teknik kultur ini

umumnya dikenal dengan sebutan Kultur mbrio (mbryo +ulture#. Kultur embrio lebih

mudah dilakukan dibandingkan dengan penyelamatan embrio. 0al ini disebabkan karena

embrio yang ditanam adalah embrio yang telah berkembang sempurna sehingga media

tanaman yang digunakan juga sangat sederhana. ()nonim, !25#

2.2 Kultur Anther

Kultur anther merupakan salah satu teknik dasar penerapan bioteknologi untuk

pemuliaan tanaman. 9ari kultur anther akan didapatkan tanaman haploid. embentukan

tanaman haploid melalui pembentukan kalus atau androgenesis langsung. $anfaat tanaman

haploid dalam pemuliaan tanaman adalah apabila digandakan kromosomnya dengankolkhisin atau melalui fusi protoplas akan diperoleh tanaman 2!!E homozigot

(http&AAwww.rudyct.com, !25#.

)nther diperoleh dari tunas bunga dan dapat dikulturkan pada medium padat atau cair

sehingga terjadi embryogenesis. :elain itu pollen juga dapat diambil secara aseptic dan

dikulturkan pada medium cair. roses perbanyakan tanaman haploid dengan menggunakan

gametofity jantan semacam ini disebut sebagai androgenesis (Duwono, !!"#.

$enurut @ijayani (2;# Kultur anther dan serbuk sari digunakan untuk menghasilkan

tanaman monoploid atau haploid. $eskipun mutasi mudah terjadi dalam sel biakan namun

banyak mutasi tersebut bersifat resesif. leh karena itu tidak terdektesi karena sel 4 selnya

dalam keadaan diploid atau poliploid.

)dapun factor-faktor yang mempengaruhi teknik kultur anther antara lain &

2. 7enotif

7enotif dari sumber bahan anther memegang peranan penting dalam menentukan

berhasil atau tidaknya kultur anther. Tidak terlalu banyak jenis tanaman yang mempunyai

kemampuan untuk memproduksi tanaman haploid melalui kultur anther.

. Komposisi $edia Kultur

)ndogenesis dapat dikembangkan pada komposisi yang sesuai dengan kebutuhan kultur

embrio.

5. Kondisi Tanaman 9onor


7/22

edia Kultur in!"itro

$edia merupakan faktor utama dalam perbanyakan dengan kultur jaringan (@ijayana,

2;#. Keberhasilan perbanyakan dan perkembangbiakan tanaman dengan metode kultur

jaringan secara umum sangat tergantung pada jenis media. $edia tumbuh pada kultur

jaringan sangat besar pengaruhnya terhadap pertumbuhan dan perkembangan eksplan serta

bibit yang dihasilkannya. leh karena itu, macam-macam media kultur jaringan telahditemukan sehingga jumlahnya cukup banyak. /ama-nama media tumbuh untuk eksplan ini

biasanya sesuai dengan nama penemunya. $edia tumbuh untuk eksplan berisi kualitatif

komponen bahan kimia yang hampir sama, hanya agak berbeda dalam besarnya kadar untuk

tiap-tiap persenyawaan.

)da dua penggolongan media tumbuh & media padat dan media cair. $edia padat pada

umumnya berupa padatan gel, seperti agar, dimana nutrisi dicampurkan pada agar. $edia cair

adalah nutrisi yang dilarutkan di air. $edia cair dapat bersifat tenang atau dalam kondisi

selalu bergerak, tergantung kebutuhan. Komposisi media yang digunakan dalam kultur

jaringan dapat berbeda komposisinya. erbedaan komposisi media dapat mengakibatkan

perbedaan pertumbuhan dan perkembangan eksplanyang ditumbuhkan secara in vitro. $edia

$urashige dan :koog ($:# sering digunakan karena cukup memenuhi unsur hara makro,mikro dan vitamin untuk pertumbuhan tanaman. ( @ikipedia, !25 #

:etiap unsur yang terkandung dalam media mempunyai fungsi bagi metabolisme

tanaman atau proses kultur jaringan. $edia yang digunakan untuk kultur sel dalam bentuk

larutan nutrisi, padat dan cair. $edia $: sebagai media fundamental yang mengandung

nutrisi makro anorganik, nutrisi mikro anorganik, nutrisi 6e, vitamin, organik dan zat

pengatur pertumbuhan tanaman (phytohormon#. hytohormon yang paling banyak digunakan

dalam kultur jaringan tanaman (khususnya media $:# , yaitu &

2. )uksin & /)), ?)) dan ,; 9

. :itokinin & %) dan Kinetin

Komposisi nutrisi makro anorganik mempunyai fungsi, khususnya untuk metabolisme

tanaman. Komposisi tersebut mengandung protein, karbohidrat, asam nukleat, lipid dan lain-

lain.


8/22

)dapun bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah media $: sebagai media

tanam, bunga rosella(embrionya#

sebagai bahan pada praktikum kultur embrio, bunga (anther# pada jantung pisang sebagai

bahan dalam praktikum kultur anther, alcohol untuk mensterilkan eksplan dan ruang penabur

(1)6#, aGuadest steril digunakan untuk membersihkan sisa larutan pensteril, bayclin yang

mengandung +hlorine sebagai bahan sterilisasi eksplan, alumunium foil sebagai penutupbotol kultur* spiritus sebagai bahan bakar bunsen dan untuk sterilisasi eksplan dan alat (pinset

dan scalpel#, label untuk pemberian label pada botol kultur, dan korek api untuk menyalakan

api bunsen.

:edangkan alat yang digunakan adalah )dapun alat yang digunakan pada percobaan ini

adalah botol kultur sebagai tempat penanaman eksplan, autoklaf untuk mensterilkan alat-alat,

petridish untuk tempat meletakkan eksplan, 1)6 (1aminar )ir 6low# untuk menabur atau

tempat menanam, erlenmeyer sebagai wadah larutan, gelas ukur untuk menakar larutan yang

digunakan, timbangan analitik untuk menimbang media dan bahan yang digunakan, scalpel

untuk memotong eksplan, pinset untuk menjepit eksplan pada waktu menanam, handsprayer

untuk menyemprotkan alkohol, lampu bunsen untuk membakar eksplan dan mensterilkan

scalpel dan pinset, gunting untuk membuang bagian tanaman yang tidak terpakai, baju labuntuk dipakai ketika bekerja sehingga mengurangi kontaminasi, masker sebagai penutup

mulut, sarung tangan untuk menutupi tangan, rak kultur sebagai tempat meletakkan botol

kultur, sikat A brush untuk menyikat dan membersihkan eksplan dari kotoran, tutup kepala

untuk menutup rambut, talam untuk membawa botol kultur dalam ruang inkubasi, serbet

untuk membersihkan meja 1)6, pulpen sebagai alat tulis.

etode Pelaksanaan

- :terilisasi )lat dan %ahan

)dapun cara pelaksanaan praktikum ini yaitu mensterilasikan alat-alat maupun bahan

yang akan digunakan.


9/22

untuk membuang semua partikel tanah dan daun mati. Termasuk juga membuang sebagian

besar daun, karena kebanyakan daun tidak digunakan dalam kultur.

5. %ahan tanaman kemudian dicuci dibawah air mengalir selama ! menit, sampai beberapa

jam, tergantung sumber bahan tanaman. ?ni sama artinya dengan membuang jutaan mikroba

ke drainase.

b. $etode Kimia

+ara ini dapat dilakukan dengan larutan sodium hypochlorite (/a+l#. Kebanyakan lab

menggunakan bleach (pemutih# seperti %ayclin, yang mengandung ;E chlorine tersedia. =

m1 %ayclin yang dibuat menjadi 2!! m1 dengan penambahan air destilata akan memberi

konsentrasi 2E chlorine tersedia. Karena kemurniannya, hypochlorite memiliki aktivitas

yang kecil pada p0 melebihi ".! dan akan lebih efektif jika p0 diatur menjadi sekitar B.!

dengan penambahan 0+l.


10/22

larutan klorin, reaksi fisiologis terjadi pada sel sekitar luka. :alah satu prosesnya adalah

produksi bahan biokimia apakah sebagai produk pecahan atau sintesa sebagai mekanisme

perlindungan. Keluarnya substansi dari jaringan akan terjadi. %ahan kimia ini mungkin atau

mungkin tidak memberi pengaruh mematikan pada pertumbuhan kultur.

&.1.2 Kultur Anther

a#6oto Tampak )tas b# 6oto Tampak %awah

0asil praktikum kultur anther ini gagal karena pada eksplan menunjukkan adanya

kontaminasi eksplan yang berasal mikrooganisme seperti jamur, bakteri, atau virus.

rganisme 4 organisme tersebut secara universal terdapat pada jaringan tanaman yang

mungkin terbawa saat anther dijadikan sebagai eksplan. $ikroorganisme tersebut banyak

yang bersifat non-patogenik, artinya mereka tidak menyebabkan bahaya bagi tanaman inang

pada kondisi normal. Kondisi kering dan adanya organisme competitor menyebabkan mereka

dalam kondisi terkontrol. Tapi, kondisi in vitro yang disukai eksplan, yaitu mengandungsukrosa dan hara dalam konsentrasi tinggi, kelembaban tinggi dan suhu yang hangat, juga

disukai mikroorganisme yang seringkali tumbuh dan berkembang sangat cepat, sehingga

mengalahkan eksplan.

'.1 Kesimpulan

Kultur embrio bertujuan untuk memisahkan embrio yang belum dewasa dan

menumbuhkan secara kultur jaringan untuk menghasilkan tanaman viable, sedangkan tujuan

dari eknik kultur anther yaitu untuk membentuk tanaman haploid yang beragam untuk

doubling mendapatkan genotip homozigot secara cepat.

/amun, kedua teknik yang telah dilakukan tersebut gagal dikarenakan terjadinya

kontaminasi pada eksplan. ksplan awal merupakan sumber utama kontaminasi, tapi

kontaminasi kembali dapat terjadi selama proses kultur, sehingga media dan semua wadah

dan alat harus disterilisasi terlebih dahulu. Kontaminasi mungkin terjadi pada permukan

tanaman, antar sel atau dalam sel tanaman. erlakuan awal atau manajemen bahan tanaman

dapat mengurangi jumlah kontaminasi dan dengan mengurangi perlakuan dekontaminasi

yang diperlukan tentu saja dapat mengurangi resiko kerusakan jaringan eksplan.

'.2 #aran

:emua kegiatan harus dilakukan pada kondisi higienis, meskipun tidak selalu perlu pada

laboratorium yang steril.


11/22

Pembuatan medium

1.2.Tujuan

Tujuan praktikum ini adalah mahasiswa memahami dan melakukan pembuatan media kultur

jaringan $:!

Kultur jaringan merupakan suatu rangkaian prosedur untuk memelihara dan

menumbuhkan sel tanaman (dapat berupa kalus, sel, protoplas# dan organ (batang, akar,

embrio# secara aseptik. )septik disini berarti bebas dari kontaminasi mikroba.

Tujuan utama kultur jaringan tanaman yaitu untuk perbanyakan bagian tanaman.

erbanyakan dapat dilakukan dengan cara merangsang pertumbuhan tunas cabang dan

percabangan aksiler atau merangsang terbentuknya tunas pucuk tanaman secara adventif,

baik secara langsung maupun kalus terlebih dahulu. %agian-bagian tanaman dapat tumbuhsecara optimal apabila menggunakan media tepat yang digunakan untuk pemenuhan nutrisi

tanaman. $edia yang digunakan harus mengandung mineral, gula, vitamin dan hormon

dengan perbandingan yang dibutuhkan secara tepat. $edia perlu ditambahkan agar untuk

mendapatkan media semi padat yang fungsinya untuk meletakkan atau membenamkan

jaringan tanaman (@etherell, 2FB#.

$enurut rakash et al. (!!;#, pertumbuhan tanaman in vitro sebagian besar dipengaruhi

oleh komposisi media kultur. Komponen media yang utama dalam kultur jaringan tanaman

yaitu garam, mineral dan gula sebagai sumber karbon dan air. Komponen lain merupakan

tambahan organik, pengatur pertumbuhan, gell agar. Terdapat 25 komposisi media dalam

kultur jaringan antara lain $urashige dan :koog ($:#, 1insmaier dan :koog (1:#, @oodylant $edium (@$#, Knop, Knudson-+, )nderson dan lain-lain. $eskipun beberapa

jumlah komposisi dirubah untuk langkah-langkah kultur jaringan dan spesies tanaman

berbeda, media $: ($urashige dan :koog, 2B# dan 1: (1insmaier dan :koog, 2B=#

paling banyak digunakan dalam kultur jaringan tanaman.

:etiap unsur yang terkandung dalam media mempunyai fungsi bagi metabolisme tanaman

atau proses kultur jaringan. $edia yang digunakan untuk kultur sel dalam bentuk larutan

nutrisi, padat dan cair. $edia $: sebagai media fundamental yang mengandung nutrisi

makro anorganik, nutrisi mikro anorganik, nutrisi 6e, vitamin, organik dan zat pengatur

pertumbuhan tanaman (phytohormon#. hytohormon yang paling banyak digunakan dalam

kultur jaringan tanaman (khususnya media $:# yaitu (:torr, 2"=#&

2. )uksin & /)), ?)) dan ,; 9

. :itokinin & %) dan Kinetin

Komposisi nutrisi makro anorganik mempunyai fungsi, khususnya untuk metabolisme

tanaman. Komposisi tersebut mengandung protein, karbohidrat, asam nukleat, lipid dan lain-

lain.


12/22

;. $g:o;.F0

=. K0;

:edangkan unsur-unsur nutrisi mikro anorganik dalam media $: antara lain&

2. $n:;.;0

. 'n:;.;0

5. 05%5;. Kl

:alah satu unsur 6e berasal dari komponen nutrisi mikro anorganik.


13/22

0ara $ikro

$g:;.F0 F;.!!! = 5F!.!!!

$n:;.;0 ;.;B!

.5!!

'n:;.F0 2.F!

".B!!

+u:;.=0 !.!!=

!.!=

6 %esi

/a9T) 5.F5! 2! 5F.5!!

6e:;.F0 .F"!

F."!!

>?T >itamin danasam amino

Thiamine !.!2! 2! !.2!!

/iacin !.!=!

!.=!!

yridoHine !.!=!

!.=!!

7lycine !.!!

.!!!

$yo >itamin $yo inositol 2! 2! .!!!

7ula :ukrosa 7ula 5!

)gar emadat )gar F

Alat dan bahan4

Alat4


14/22

2. 7elas standar(rlenmeyer, gelas ukur, gelas piala,polpipet#

. Timbangan analitik

5. )lat tulis (pensil#

;. Kertas label

=. Kertas Tissue

B. 7unting

F. )luminimum foil

". ipet

. Kompor gas

2!. anci

22. engaduk panci

2. enuang

25. %otol media (;! botol#

2;. Karet gelang

2=. p0 meter

2B. stirer plate

2F. )uto +lave

Bahan4

2.# 1arutan :tok )-0

.# )ir

5.# )Guadest

;.# )gar (:wallow 7lobe oweder F gr#

=.# 7ula pasir 5! gr

B.# 0+1


15/22

2.5.$an+kah Kerja4

2. ersiapan alat dan bahan praktikum

. ersiapan bahan lain

5. $asukkan larutan stok ke dalam rlenmeyer

;. $asukkan larutan gula kedalam wadah.

=. enambahan aGuades hingga "!!ml

B. engukuran p0

F. enambahan aGuades hingga 2!!! ml

". elarutan

. $emasukkan larutan ke dalam botol media

2!. enutupan dengan aluminium foil

22. elabelan

2. :terilisasi media menggunakan autoclave.

25. enyimpanan

PEBAHA#A%

2. ersiapan alat dan bahan praktikum, tercantum dalam bab metodologi.

. ersiapan bahan lain yaitu gula dan agar

5. $asukkan larutan stok ke dalam rlenmeyer dengan menggunakan pipet. :atu pipet

digunakan hanya untuk satu jenis larutan.


16/22

2. enambahan agar sebanyak F gr

. enambahan aGuades sedemikian sehingga terbentuk larutan homogen sebanyak 2!!!

ml

2. elarutan

9ilakukan dengan melakukan pemanasan dengan kompor, hal ini dilakukan hingga larutan

tidak menggumpal

$emasukkan larutan ke dalam botol media

1arutan sebanyak 2!!!ml dibagi ke dalam ;! botol media,sehingga setiap botol berisi = ml.

2. enutupan dengan aluminium foil

. elabelan

9itulis menggunakan pensilagar tidak luntur sewaktu dilakukan sterilisasi dengan

menggunakan autoclave.

elabelan berisi mengenai formulasi, tanggal pembuatan serta si empu pembuat media.

2. :terilisasi media menggunakan autoclave (2F.= psi , 22o+, ! menit#

+ara sterilisasi menggunakan autoclave*

2. ?si panci autoclave dengan air sampai garis minimal

. $enyusun botol media dalam keranjang autoclave

5. )utoclave ditutup rapat,katup uap dibiarkan pada posisi terbuka.

;. )utoclave dipanaskan dengan meletakkan saklar pada posisi angka 5, menekan

tombol untuk menghidupkan arus listrik sampai air mendidih.

=.


17/22

. :etelah angka pada manometer autoclave menunjukkan angka nol, buka tutup

autoclave keluarkan botol-botol kultur yang telah disterilkan. :elanjutnya letakkan

botol kultur tersebut pada posisi miringA tegak (sesuai keinginan# diruang bersuhu

dingin dan gelap.

PE%*T*P

&.1.Kesimpulan

2. embuatan media adalah salah satu tahapan dari kultur jaringan

. )da berbagai metode dalam pembuatan media, $urashige dan :koog ($:#,

1insmaier dan :koog (1:#, @oody lant $edium (@$#, Knop, Knudson-+,

)nderson dan lain-lain.

5. 9alam media $: digunakan beberapa bahan yang mengandung hara makro, hara

mikro,besi,vitamin, sukrosa dan pemadat.

DA(TA) P*#TAKA

%uku %K$ Kultur 3aringan Tanaman.

9iktat $ata Kuliah Kultur 3aringan oliteknik /egeri 3ember

http&AAayatersenyum.blogspot.comA!2A!BApembuatan-media-ms-kultur-jaringan.html

pen+amatan

Keragamaan jenis tanaman obat mulai dari jenis tanaman dataran rendah sampai

tanaman dataran tinggi menuntut penyesuaian lingkungan untuk kegiatan budidaya tanaman

tersebut. :etiap jenis tanaman obat membutuhkan kondisi lingkungan tertentu agar dapat

tumbuh dan bergembang dengan optimal. 1ingkungan pertumbuhan yang dimaksud meliputi

iklim dan tanah. %eberapa unsur iklim seperti suhu, curah hujan dan penyinaran matahari

secara langsung berpengaruh bagi pertumbuhan tanaman. :etiap tanaman obat membutuhkan

suhu udara yang sesuai agar proses metabolisme dapat berjalan baik, sedangkan suhu tanahakan mempengaruhi proses perkecambahan benih. :uhu tanah yang terlalu rendah dapat

menghambat proses, sedangkan suhu tanah yang terlalu tinggi dapat mematikan embrio yang

terdapat pada biji. Tanaman obat-obatan membutuhkan curah hujan yang cukup dengan

distribusi yang merata. Ketersediaan air merupakan salah satu faktor penentu keberhasilan

budidaya tanaman obat ()nonim2, !2!#.

Tanaman obat dapat dikonsumsi dengan cara diolah terlebih dahulu. %eberapa

tanaman obat dapat digunakan sehari-hari dan diolah dengan cara sederhana seperti direbus

dan dicampur dengan air atau bahan-bahan lainnya, sedangkan tanaman yang lain diolah

secara modern oleh pabrik atau industri rumah tangga dengan cara dikeringkan dan dikemas

dalam kemasan yang praktis untuk dikonsumsi ()nonim2, !2!#.

Tanaman obat keluarga pada dasarnya adalah tanaman yang ditanam di halamanrumah, kebun ataupun sebidang tanah yang dimanfaatkan sebagai budidaya tanaman yang
http://ayatersenyum.blogspot.com/2012/06/pembuatan-media-ms-kultur-jaringan.htmlhttp://ayatersenyum.blogspot.com/2012/06/pembuatan-media-ms-kultur-jaringan.html


18/22

berkhasiat sebagai obat dalam rangka memenuhi kebutuhan keluarga akan obat-obatan.

Tanaman obat keluarga juga berfungsi sebagai pemanfaatan lingkungan di sekitar rumah dan

kebun. 9i era sekarang semakin banyak keluarga yang sadar betul apa manfaat dari tanaman

obat itu sendiri ()nonim, !2!#.

Kalau kita kaji lebih dalam sungguh banyak sekali khasiat dari tanaman obat keluarga

tersebut. %anyak pula jenis nya. :ebagai contoh kumis kucing, sambiloto, lidah kucing danlidah buaya. Tentunya tanaman obat ini sudah banyak di ketahui khasiatnya. $ulai dari kumis

kucing yang berkhasiat sebagai obat pada penyakit pada saluran kencing seperti infeksi

ginjal, infeksi kandung kemih, kencing batu dan encok atau kita bisa juga menanam tanaman

pengusir nyamuk ()nonim, !2!#.

Tanaman obat sambung nyawa di klasifikasikan sebagai berikut &

9ivisi & :permatophyta

:ubdivisi & )ngiospermae

Kelas & 9icotyledonae

%angsa & )sterales (+ampanulatae#

:uku & )steraceae (+ompositae#

$arga & Gynura3enis & Gynuraprocumbens

Tanaman Gynuraprocumbensberbentuk perdu tegak bila masih muda dan dapat

merambat setelah cukup tua. %ila daunnya diremas bau aromatis. %atangnya segi empat

beruas-ruas, panjang ruas dari pangkal sampai ke ujung semakin pendek, ruas berwarna hijau

dengan bercak ungu. 9aun tunggal bentuk elips memanjang atau bulat telur terbalik tersebar,

tepi daun bertoreh dan berambut halus. Tangkai daun panjang I-5 I cm, helaian daun

panjang 5 I-2 I cm, lebar 2- = I cm. 0elaian daun bagian atas berwarna hijau dan bagian

bawah berwarna hijau muda dan mengkilat. Kedua permukaan daun berambut pendek.

Tulang daun menyirip dan menonjol pada permukaan daun bagian bawah. ada tiap pangkal

ruas terdapat tunas kecil berwarna hijau kekuningan. Tumbuhan ini mempunyai bunga

bongkol, di dalam bongkol terdapat bunga tabung berwarna kuning oranye coklat kemerahan

panjang 2-2 I cm, berbau tidak enak. Tiap tangkai daun dan helai daunnya mempunyai

banyak sel kelenjar minyak ()nonim 5, !2!#.

9aun :ambung /yawa oleh sebagian masyarakat ?ndonesia digunakan sebagai obat

kanker kandungan, payudara dan kanker darah dengan memakan 5 lembar daun segar sehari

selama F hari. engobatan tersebut dapat diperpanjang selama 2-5 bulan tergantung dari

keadaan penyakit ()rdhi, !2!#.

9aun tanaman :ambung /yawa mengandung senyawa flavonoid, sterol tak jenuh,

triterpen, polifenol dan minyak atsiri. 0asil penelitian lain melaporkan bahwa tumbuhan ini

mengandung senyawa flavonoid, tanin, saponin, steroid, triterpenoid, asam klorogenat, asam

kafeat, asam vanilat, asam para kumarat, asam p-hidroksi benzoat (:uganda et al., 2""#,asparaginase ($ulyadi, 2"# ()rdhi, !2!#.

embuktian secara ilmiah mengenai khasiat tanaman ini melalui penelitian telah

banyak dilakukan antara lain :ugiyanto et al. (25#, melaporkan adanya efek penghambatan

karsinogenitas benzo(a#piren (%)# oleh preparat tradisional tanaman 7. procumbens,

penelitian $eiyanto (2B# menyatakan bahwa ekstrak etanol daun 7. procumbens (1our.#

$err. mampu memberikan efek antimutagenik terhadap tumor paru mencit yang diakibatkan

oleh %). :ifat antimutagenik ini juga dilaporkan oleh penelitian :ugiyanto et al. (!!5#,

yaitu penghambatan mutasi pada :almonella typhimurium. :ecara in vitro, ekstrak etanol

daun 7. procumbens memiliki ?+=! kurang dari 2!!! ugAml pada larva udang )rtemia salina

1each ($eiyanto et al., 2F#. :elain menghambat karsinogenitas pada kanker paru, 7.

procumbens juga diketahui mampu menghambat karsinogenitas kanker payudara ()rdhi,!2!#.
http://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=procumbenshttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=procumbenshttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=procumbenshttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=Gynurahttp://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/result.jsp?sname=organism&word=procumbens


19/22

0asil tersebut menguatkan hasil penelitian sebelumnya baik terhadap ekstrak

etanolik maupun fraksi-fraksinya yang mengarahkan pada efek kemopreventif Tanaman

:ambung /yawa, baik sebagai blocking maupun suppressing. kstrak etanolik daun 7.

procumbens juga dilaporkan memiliki efek antiangiogenik, sehingga tanaman ini berpotensi

sebagai antimetastasis, anti-invasi ()rdhi, !2!#.

Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui teknik kultur jaringan secaraumum.

Bahan

a. %ahan pembuatan larutan stock

- %ahan kimia untuk nutrisi, vitamin, 6e9T), 'T

- )Guadest

b. %ahan-bahan untuk pembuatan media

- 7ula

- )gar

- )Gua destilata (aGuadest#

- 1arutan stok terdiri atas hara makro, hara mikro, vitamin, 'T

- /a0 2 / dan 0+1 2 /

Alat

a. )lat pembuatan larutan stock

- Timbangan analitik

- :endok

- ipet

- rlenmeyer

b. )lat pembuatan media tanam

- $agneitk stirer

- Timbangan analitik

- ipet

- h meter

- 7elas piala

- %otol-botol kultur

- lastik pp !.5 mm

- Karet gelang

- Kertas label

c. )lat sterilisasi

- )utoklaf

- ven

Prosedur Kerjaa. $elakukan sterilisasi )lat dan $edia Kultur

- $ensterilissasi alat dan media kultur jaringan dilakukan secara bersama-sama menggunakan

autoklaf.

- $embungkus alat-alat kultir seperti petridish, pisau scalpel dan pinset dengan kertas koran.

- $emasukkan botol-botol berisi media dan alat-alat kultur yang telah dibungkus kertas koran

ke dalam autoklaf untuk proses sterilisasi pada suhu 22 +, tekanan 2,= kgAcm selama ;=

menit.

- $enyimpan alat-alat kultur dalam oven

- $enyimpan media pada rak penyimpanan media yang bertujuan untuk mengantisipasi ada

tidaknya kontaminasi pada media sehingga dapat dicegah penggunaan media yang telah

terkontaminasi pada saat penanaman.b. $embuat larutan stok


20/22

2#. 1arutan stok media

- $enimbang bahan-bahan kimia yang telah dikalikan menjadi beberapa kali konsentrasi,

misalnya untuk unsur hara makro dikalikan ! dan unsur hara mikro dikalikan 2!! kali

konsentrasi.

- $elarutkan bahan-bahan kimia tersebut ke dalam aGuadest dengan volume tertentu, misalnya

=!! ml.- $emasukkan masing-masing larutan ke dalanm botol dan menyimpannnya ke dalam

refrigerator.

#. 1arutan stok zat pengatur tumbuh

- $enghitung kebutuhan %) 2!! ppm sebanyak 5!! ml adalah sebagai berikut &

2!!ppm J 2!!mgAl J 5! mgA!.5 l J 5! mgA5!! ml

- $enghitung kebutuhan ?%) 2!! ppm sebanyak 2!! ml adalah sebagai berikut &

2!! ppm J 2!! mgAl J 2! mgA !.2 lJ 2! mgA 2!! ml

- $elarutkan bahan dengan alkohol atau /a0 2 / kemudian ditambah dengan aGuadest

sampai 5!! ml untuk %) dan 2!! ml untuk ?%).

- $emasukkan masing-masing larutan tersebut ke dalam botol dan menyimpannya ke dalamrefrigerator.

c. $embuat media kultur

- $engambil larutan stok yang berisi /a9T), hara makro, hara mikro, vitamin dan 'T.

- $emasukkan larutan stok ke dalam *abu takar dan tambahkan aGuadest sebanyak 2!!!mlA

sampai tanda.

- $emasukkan ke dalam bekerglass.

- $emasukkan gula sebanyak 5! grA tunggu sampai larut.

- $engukur p0 dan mengkondisikannya menjadi =," 4 B, dengan menambahkan 0+l atau

/a0.

- $emasukkan agar sebanyak " grAl.

- $endidihkan larutan tersebut.

- $emasukkan larutan yang sudah jadi ke dalam botol kultur.

- $enutup botol kultur dengan plastik pp dan mengikatnya dengan karet gelang.

- $emasukkan botol kultur tersebut ke dalam autoklaf untuk disterilkan.

d. enaburan

- mengambil daun tanaman obat sambung nyawa yang masih muda yang ada pada tanaman

induk.

- mencuci daun muda di air mengalir.

- mencuci dengan detergen selama tiga menit sambil di elus.

- mencuci lagi dengan air mengalir.

- memasukkan dithane !,E digojlok selama 5! menit, kemudian dithane di buang.- menggojlok lagi dengan agrib !,E selama 5! menit, kemudian agrib di buang dan diganti

dengan aGuades, di gojlok selama 5 menit.

- membawa eksplant ke ruang penaburan.

- mengganti aGuades dengan alcohol F!E dan di gojlok selama 5 menit.

- mengganti alcohol dengan baycline FE dan di gojlok selama F menit.

- mengganti baycline dengan aGuades steril dan di gojlok selama = menit.

- mengganti aGuades dengan campuran aGuades dan bethadin dan di gojlok selama = menit.

- mengambil eksplant dan di potong dalam petridish.

- memasukkan eksplant yang telah di potong ke dalam botol media lalu diamati.

Tabel2. 0asil dari pengamatan kultur jaringan daun sambung nyawa.

$inggu ke 0ari-tanggal-tahun Kegiatan keterangan2 3umat, 2=-;-!22 enaburan $enanam eksplant


21/22

kedalam botol kultur

3umat, -;-!22 engamatan

dan

enaburan

9ari ; botol eksplant yang

ditanam minggu ke 2,

semua botol mengalami

kontaminasi berupa

tumbuhnya jamur padamedia tanam.

enaburan ke dilakukan

untuk mengganti bibit

eksplant yang ditanam

pada penaburan pertama

sebab semua botol

eksplan terkontaminasi.

5 :elasa, 5-= !22 engamatan ada minggu ketiga

setelah penaburan ada 2

botol yang eksplantnya

menunjukkan respon

yakni berupa lengkungan

dan yang lainnya belum

menunjukkan respon.


22/22

ada pengamatan di minggu berikutnya yaitu minggu ketiga, kami menemukan

adanya satu eksplan yang terkontaminasi lagi disebabkan adanya jamur. 9an pada botol

lainnya kami temukan ada satu botol yang eksplantnya menunjukkan respon yakni berupa

lengkungan dan yang lainnya belum menunjukkan respon.

ada pengamatan di minggu selanjutnya yaitu minggu keempat, terdapat satu botol

eksplant yang menunjukkan bahwa tanaman tersebut terus menunjukkan respon, sedangkandua botol lainnya masih dalam keadaan aseptic tanpa ada tanda-tandanya pertumbuhan.

Kesimpulan

9ari hasil praktikum yang telah dilaksanakan dapat di simpulkan bahwa pada

penaburan yang pertama, semua botol eksplan terkontaminasi, ini disebabkan karena jamur.

1alu pada penaburan kedua, terdapat satu botol yang terkontaminasi, satu botol yang

mengalami pertumbuhan, dan dua botol masih aseptic tanpa adanya tanda-tanda

pertumbuhan.

#aran

:aran saya jika praktikum yang akan datang sebaiknya untuk daun tanaman yang akan

di tanam daun yang di pilih daun yang benar-benar masih muda supaya kemungkinan untuktumbuh lebih besar, dan diharapkan agar para mahasiswa harus lebih tertib dalam

melaksanakan praktikum tersebut..

DA(TA) P*#TAKA

)nonim2, !2!. Tanaman Obat.http&AAduniatanaman.comAtanaman-obat.html. 9iakses pada tanggal

= $ei !22.

)nonim, 2B 9esember !!F http&AAkiathidupsehat.comAtanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-

nyowo-gynura-procumbens-lour-merrA. 9iakses pada tanggal B mei !22.

)rdhi, !2!. Tanaman Obat: Khasiat Tanaman Sambung yawa !Gynura procumbens !"our#$

%err#$ http&AAkiathidupsehat.comAtanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-

procumbens-lour-merrA. 9iakses pada tanggal = $ei !22.
http://duniatanaman.com/tanaman-obat.htmlhttp://duniatanaman.com/tanaman-obat.htmlhttp://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://duniatanaman.com/tanaman-obat.htmlhttp://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/http://kiathidupsehat.com/tanaman-obat-khasiat-tanaman-sambung-nyowo-gynura-procumbens-lour-merr/

laporan kuljartum

Documents