uji resistensi bakteri terhadap antibiotika menggunakan metode difusi

7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi

1/19

UJI RESISTENSI BAKTERI TERHADAP

ANTIBIOTIKA MENGGUNAKAN

METODE DIFUSI DANBIOAUTOGRAFI

Nama Kelompok:

Pramuditya. K (12613171)

Dian Noftasari (12613173)

Femmy rs!idina. " (1261317#)

$uliya %ka. & (12613176)'amida! ud!i. $ (12613177)


2/19

*+*$N

1.Dapat melakukan uji aktivitas antimikroba dengan

menggunakan metode difusi cara sumuran dan cakram kertas

(disk method).

2.Dapat melakukan analisis tentang sensitivitas atau resistensi

bakteri terhadap antibiotika.

3.Dapat melakukan uji bioautografi untuk mendeteksi bercak

atau komponen zat aktif sebagai antibakteri.

4.Dapat menentukan komponen zat aktif sebagai antibakteri.


3/19

D$,$- %-

,uatu or/anisme0 akteri dapat menimulkanresistensi ter!adap oat melalui sea yaitu:

1. Perke4ualian dari oat.

2. r/anisme0 akteri memiliki en5im perusak.3. akteri terseut men/amil en5im yan/

dapat memodifkasi oat.

#. -esistensi dalam entuk sekresi suatusustansi ole! akteri dalam umla!erlei!an dan merupakan metaolit yan/anta/onis a/i suatu oat.

. Perua!an materi /enetik di antara aktei.


4/19

etode paper disk

Paper disk diasa!i den/an disin8ektan kemudiandiletakkan pada lempen/an a/ar yan/ tela!diinokulasi. &empen/an a/ar dieramkan selama #9

am. +ika disin8ektan men/!amat pertumu!an

akteri maka akan terli!at daera! erni! sekelilin/4akram kertas. &uas daera! teran/ ini menadiukuran kekuatan daya kera disin8ektan


5/19

etode sumuran

edia $/ar ditanami akteri lalu diuat sumuranden/an diameter 6 mm. ,umuran dieri 2 lsupernatant 4airan kultur. &alu diinkuasi 19;2# amsu!u 37o< untuk kemudian diukur diameter 5ona

!amatnya. =ona !amat merupakan daera! yan/dapat men/!amat pertumu!an akteri sekali/usmenadi ukuran kekuatan oat


6/19

ioauto/raf

aantimikroanya dipinda!kan dari lapisan K& kemedium a/ar yan/ tela! diinokulasikan den/an

merata akteri ui yan/ peka. Dari !asil inkuasipada su!u dan >aktu tertentu akan terli!at 5ona!amatan di sekelilin/ spot dari K& yan/ tela!ditempelkan pada media a/ar. =ona !amatanditampakkan ole! akti?itas senya>a akti8 yan/

terdapat di dalam a!an yan/ diperiksa ter!adappertumu!an mikroor/anisme ui.


7/19

$&$ D$N $'$N

$lat:

$uto4la?e

atan/ pen/aduk.

luetip.

"elas piala 0 eker /lass "elas ukur

nkuator.

Kertas sarin/

&au %rlenmeyer

&aminar $ir Flo> (&$F) &ampu spiritus 0 unsen.

ikro pipet.

se ulat

?en

Pipet tetes.

Paper disk lank

Paper disk $ntiiotik

Petridis! 0 4a>an petri

Pinset

Pipa kapiler

Plat K& 24m @ 1A4m

-ak taun/ reaksi

,endok tanduk.

aun/ reaksi

*B o@

Cello> tip


8/19

a!an:

$ntiiotik , 2

$ntiiotik =

$Euadest steril

%til asetat

'e@ane

edia Nutrient a/ar

edia Nutrient rot!

Na


9/19


10/19

ebelum disamakan dengan standar* dilakukan peremajaan (diambil dengan ose

bulat)

$isamakan sampel uji mikroba dengan standar kekeruhan (+, #arland). $igunakan Na"l

steril.

$ituang media agar pada masingmasing petri* setelah suhu turun -60" ditambahkan 200 /mikroba uji. $ihomogenkan dengan ,ara menggoyangkan petri se,ara perlahan. alu ditunggu

sampai beku.

1ntuk metode sumuran* setelah media membeku dibuat sumuran sebanyak 4 lubang sumuran. ( 20

/l produk * 20 /l a5uadest murni* 20 /l ekstrak sirih merah 78* 9 20 /l ekstrak sirih merah0.!8)

1ntuk metode paper disk: kertas ,akram* setelah media membeku* ditempelkan 7 paper disk blank

dan paper disk antibiotik (digunakan pinset).

1ntuk metode bioautogra#i* setelah media membeku* ditempelkan plat ; pada media agar (bagianputih menghadap media)* di diamkan selama 30 menit kemudian di angkat plat ; dari media agar.


11/19

D$$ D$N '$,&


12/19

%D% ,**-$N

Terdapat zona hambatpada kontrol positif,

ekstrak daun sirih

merah ,!" dan 1"


13/19

%D% P$P%- D,K

Terdapat zona hambat

pada antibiotik # $%&T2!' dan tidak adan(a

zona hambat pada

antibiotik ) $*T+ !'

dan blanko.


14/19

$*"-$F

idak terdapat5ona !amat padamedia.


15/19

'asil K& *B 2# nm

erdapat 3 titikpemisa!an padaplat klt.


16/19

*B 366 nm

erdapat 2 titikpemisa!an padaplat klt.


17/19


18/19

P%$'$,$N

Pada siri! mera! didapat spot pada plat K& pada 2H #H dan 4mpada *B 2#nm sedan/kan pada *B 366 nm didapat spot 1 dan 4m den/an nilai -8 A.#167H A.6667 dan A.167 pada *B 2# nm danA.1667 dan A.9333 pada *B 366 (-8I '-801AA). ,edan/kan padaliteratur didapat -8 A9# dan A76. Dari !asil yan/ didapat tidaksesuai den/an literatur. Pada metode sumuran di/unakan antiiotik

(kontrol J) t>een (kontrol ;) ekstrak siri! mera! A.G dan ekstraksiri! mera! 1G. 'asil yan/ didapat yaitu terdapat 5ona !amat 19mm pada kontrol J 2A mm pada ekstrak A. G dan 21 mm padaekstrak 1G serta tidak terentuk 5ona !amat pada kontrol . Dari!asil dapat dili!at a!>a ekstrak siri! mera! 1G memiliki akti?itasantiakteri lei! aik daripada ekstrak siri! mera! A.G karena

men/!asilkan 5ona !amat lei! esar dari 5ona !amat ekstrak siri!mera! A.G. erdasar literatur minyak atsiri siri! mera! mampumen/!amat akteri S.aureus den/an konsentrasi minimal (K')A.2G(1#) K' ekstrak etanol siri! mera! 2.G 8raksi n;!e@ane 2AGdan 8raksi etil asetat 2.G. =ona !amat yan/ terentuk semakinlear den/an menin/katnya konsentrasi ekstrak.


19/19

K%,P*&$N

%kstrak daun siri! mera! A G sensiti8 ter!adapakteri den/an diameter !amat 2A mm danekstrak daun siri! mera! 1 G sensiti8 ter!adapakteri den/an diameter !amat 21 mm.

$ntiiotik , 2 (sul8ametoksa5ol) sensiti8ter!adap akteri S.aureus dan antiiotik S.aureusresisten ter!adap = (metronida5ole.

,enya>a yan/ memiliki akti?itas antiakteri yaitusenya>a triterpenoid La?onoid tannin minyakatsiri alkaloid dan senya>a 8enol pada daun siri!mera!.

uji resistensi bakteri terhadap antibiotika menggunakan metode difusi

Documents